Platné znění

Vyhláška Ministerstva životního prostředí, kterou se stanoví metody pro zjišťování fyzikálně-chemických a chemických vlastností chemických látek a chemických přípravků a vlastností chemických látek a chemických přípravků nebezpečných pro životní prostředí

účinné od 1. 1. 1999Pro látky, jež obsahují dusík se používá vhodné TSK (pro NH4 nebo NO3) podle toho co je známo nebo odhadováno o výskytu nitrifikace (příloha 2). Jestliže se nitrifikace vyskytuje, ale není úplná, koriguje se spotřeba kyslíku podle změn koncentrace dusitanů a dusičnanů (příloha 5).

účinné od 1. 1. 1999V případě, že se stanovuje organický uhlík a /nebo se provedla specifická analýza, počítá se stupeň rozkladu podle odstavce I. 7.

účinné od 1. 1. 1999Všechny výsledky se zapisují do tabulkových sestav.

  1. účinné od 1. 1. 1999V. 3. 2 Platnost zkoušky

    účinné od 1. 1. 1999Normální spotřeba kyslíku inokulem je 20 - 30 mg.l-1 a nemá být větší než 60 mg.l-1 v průběhu 28 dnů. Hodnoty větší než 60 mg.l-1 vyžadují kritické hodnocení výsledků a experimentální techniky.

    účinné od 1. 1. 1999V případě, že pH je mimo rozsah 6 - 8,5 a spotřeba kyslíku zkoušenou látkou je menší než 60 % je nutno zkoušku opakovat s nižší koncentrací zkoušené látky.

    účinné od 1. 1. 1999Viz odst. I.

  1. účinné od 1. 1. 1999V. 3. 3 Protokol o zkoušce

    účinné od 1. 1. 1999Dále je uveden příklad protokolu.

    účinné od 1. 1. 1999MANOMETRICKÁ RESPIROMETRICKÁ ZKOUŠKA

    1. účinné od 1. 1. 19991. LABORATOŘ
    2. účinné od 1. 1. 19992. DATUM ZAHÁJENÍ ZKOUŠKY
    3. účinné od 1. 1. 19993. ZKOUŠENÁ LÁTKA
      1. účinné od 1. 1. 1999Název:
      2. účinné od 1. 1. 1999Koncentrace zásobního roztoku:
      3. účinné od 1. 1. 1999Počáteční koncentrace v médiu:
      4. účinné od 1. 1. 1999Objem v nádobce:
      5. účinné od 1. 1. 1999TSK nebo CHSK v mg.mg-1 zkoušené látky (NH4, NO3):
    1. účinné od 1. 1. 19994. INOKULUM
      1. účinné od 1. 1. 1999Zdroj:
      2. účinné od 1. 1. 1999Provedená úprava:
      3. účinné od 1. 1. 1999Předúprava, pokud byla provedena:
      4. účinné od 1. 1. 1999Koncentrace suspendovaných látek v reakční směsi:
    1. účinné od 1. 1. 19995. TABULKA SPOTŘEB KYSLÍKU
      účinné od 1. 1. 1999
      MANOMETRICKÁ RESPIROMETRICKÁ ZKOUŠKA
      Čas (dny)
      07142128
      spotřeba kyslíku (mg) zkoušenou látkou1
      2
      a, průměr
      spotřeba kyslíku (mg) ve slepém pokuse3
      4
      b, průměr
      opravená BSK (mg)(a1 - bm)
      BSK na zkoušené látky(a2 - bm)
      % rozkladu (BSK/TKS).100D1 (a1)
      D2 (a2)
      průměr*
    2. účinné od 1. 1. 1999* pokud je mezi D1 a D2 výrazný rozdíl nemůže být počítán jejich průměr
    3. účinné od 1. 1. 1999Poznámka: Obdobný formulář může být použit pro referenční látku a pro kontrolu toxicity.
    1. účinné od 1. 1. 19996. OPRAVA NA NITRIFIKACI (Viz příloha 5)
      účinné od 1. 1. 1999
      MANOMETRICKÁ RESPIROMETRICKÁ ZKOUŠKA
      Den028Rozdíl
      (i) Koncentrace dusičnanů (mg N.l-1)(N)
      (ii) Kyslíkový ekvivalent (4,57.N.V) (mg)--
      (iii) Koncentrace dusitanů (mg N.l-1)(N)
      (iv) Kyslíkový ekvivalent (3,43.N.V) (mg)--
      (ii + iv) Celkový kyslíkový ekvivalent--
    1. účinné od 1. 1. 19997. ANALÝZA UHLÍKU (nepovinná)

      účinné od 1. 1. 1999Analyzátor uhlíku:

      účinné od 1. 1. 1999
      MANOMETRICKÁ RESPIROMETRICKÁ ZKOUŠKA
      Čas (dny)Slepý pokus (mg.l-1)Zkoušená látka (mg.l-1)
      0(CSPO)(C0)
      28*(CSPt)(Ct)
      * nebo na konci inkubace

      účinné od 1. 1. 1999

    1. účinné od 1. 1. 19998. ROZKLAD VÝCHOZÍ LÁTKY (nepovinně)
      1. účinné od 1. 1. 1999Sb = koncentrace ve fyzikálně - chemické kontrole (sterilní) po 28 dnech
      2. účinné od 1. 1. 1999Sa = koncentrace v inokulované nádobě po 28 dnech

      účinné od 1. 1. 1999

      1. účinné od 1. 1. 1999kde
        1. účinné od 1. 1. 1999% BR = biologický rozklad výchozí látky vyjádřený v %.
    1. účinné od 1. 1. 19999. ABIOTICKÝ ROZKLAD

      účinné od 1. 1. 1999a = spotřeba kyslíku ve sterilní kontrole po 28 dnech, (mg)

      účinné od 1. 1. 1999

      účinné od 1. 1. 1999(viz část 1 a 3)

      účinné od 1. 1. 1999

  1. účinné od 1. 1. 1999IV. E ZKOUŠKA V UZAVŘENÝCH LAHVIČKÁCH
    1. účinné od 1. 1. 1999VI. 1. PRINCIP ZKUŠEBNÍ METODY

      účinné od 1. 1. 1999Roztok zkoušené látky, obvykle 2 - 5 mg.l-1 v minerálním médiu, se inokuluje malým množstvím směsné kultury a udržuje se ve zcela naplněných uzavřených lahvích, bez přístupu světla, při konstantní teplotě.

      účinné od 1. 1. 1999Rozklad se sleduje analýzou rozpuštěného kyslíku v průběhu 28 dnů. Množství spotřebovaného kyslíku po korekci na slepý pokus, který se provádí paralelně, se vyjadřuje jako procento TSK nebo CHSK.

    1. účinné od 1. 1. 1999VI. 2 POPIS METODY
      1. účinné od 1. 1. 1999VI. 2. 1 Přístroje
        1. účinné od 1. 1. 1999a) BSK lahvičky se sponkami, 250 - 300 ml.
        2. účinné od 1. 1. 1999b) Vodní lázeň nebo inkubátor, ve kterých se lahvičky udržují při konstantní teplotě (± 1 °C nebo lepší) za nepřístupu světla.
        3. účinné od 1. 1. 1999c) Velké skleněné lahve 2 - 5 l pro přípravu média a pro naplnění lahviček.
        4. účinné od 1. 1. 1999d) Kyslíková elektroda a oximetr nebo vybavení a chemikálie pro Winklerovu metodu.
      1. účinné od 1. 1. 1999VI. 2. 2 Příprava minerálního média

        účinné od 1. 1. 1999Zásobní roztoky se připravují podle I. 6. 2.

        účinné od 1. 1. 1999Smíchá se 1 ml roztoků (a) až (d) a doplní se do 1 l zřeďovací vodou.

      1. účinné od 1. 1. 1999VI. 2. 3 Příprava inokula

        účinné od 1. 1. 1999Inokulum se běžně získává z odtoku z biologické čistírny nebo z laboratorní jednotky, které čistí převážně komunální odpadní vody. Alternativním zdrojem inokula může být povrchová voda. Běžně se užívá jedna kapka až 5 ml filtrátu na 1 l média. Vhodné množství inokula se musí vyzkoušet (viz. I. 6. 4. 2 a I. 6. 5)

      1. účinné od 1. 1. 1999VI. 2. 4 Příprava lahví

        účinné od 1. 1. 1999Minerální médium se silně provzdušňuje po dobu 20 minut. V jedné zkoušce je nutné použít jedno minerální médium. Obecně je médium připraveno pro práci po 20 h stání při pracovní teplotě. Pro kontrolu se stanoví obsah kyslíku v médiu. Jeho obsah by měl být okolo 9 mg.l-1 při 20 °C. Všechny operace s médiem nasyceným vzduchem se provádí tak, aby nevznikly bublinky, např. se použije sifon.

        účinné od 1. 1. 1999Připravují se paralelní skupiny BSK lahviček pro simultánní měření zkoušené látky a referenční látky. Připraví se dostatečný počet lahviček, včetně slepých pokusů tak, aby v každém zvoleném časovém intervalu např. 0, 7, 14, 21 a 28 dnů byly k dispozici vždy alespoň 2 lahvičky. K tomu, aby bylo možné určit 10 denní okno je potřeba více lahviček.

        účinné od 1. 1. 1999Do velkých lahví se do 1/3 naplní provzdušněné médium, pak se přidá zásobní roztok zkoušené látky a referenční látky do zvláštní lahve tak, aby konečná koncentrace látek byla max. 10 mg.l-1. Slepý pokus se nasazuje bez zkoušené a referenční látky.

        účinné od 1. 1. 1999Ke zjištění, zda aktivita inokula není limitující, nesmí koncentrace kyslíku v lahvičkách klesnout pod 0,5 mg.l-1. Toto omezuje koncentraci zkoušené látky na 2 mg.l-1. Ovšem pro látky těžce rozpustné ve vodě a s nízkou TSK lze použít koncentraci 5 - 10 mg.l-1. V některých případech lze doporučit provádět paralelně měření při 2 koncentracích studované látky např 2 a 5 mg.l-1. Běžně se TSK počítá pro tvorbu amonných solí, ale v případech, kdy se předpokládá nitrifikace, počítá se TSK pro tvorbu dusičnanů (viz příloha 2). V případech, kdy nitrifikace není úplná, počítá se korekce z analytických koncentrací dusičnanů.

        účinné od 1. 1. 1999V případě, že zkoušená látka je toxická (např. v případě dříve zjištěné nízké biologické rozložitelnosti), musí se nasadit nové série lahviček.

        účinné od 1. 1. 1999Nasazuje se za stejných podmínek jako v předchozím případě.

        účinné od 1. 1. 1999Roztok ve velkých lahvích se inokuluje odtokem z biologické čistírny (1 kapka až 5 ml) nebo jiným inokulem jako např. říční vodou (viz I. 6. 4. 2). Nakonec se lahve doplní na objem provzdušněným médiem a s pomocí hadičky, která sahá na dno, se připraví homogenní roztok.

      1. účinné od 1. 1. 1999VI. 2. 5 Počet lahviček běžného pokusu
        1. účinné od 1. 1. 1999V běžném pokusu se používají následující lahvičky:
          1. účinné od 1. 1. 1999nejméně 10 se zkoušenou látkou a inokulem,
          2. účinné od 1. 1. 1999nejméně 10 jen s inokulem,
          3. účinné od 1. 1. 1999nejméně 10 s obsahem referenční látky a inokulem
          4. účinné od 1. 1. 1999a dále, je-li to zapotřebí 6 lahviček obsahujících zkoušenou látku, referenční látku a inokulum (kontrola toxicity). Pro zjištění 10 denního okna je zapotřebí dvojnásobný počet lahviček.
      1. účinné od 1. 1. 1999VI. 2. 6 Provedení zkoušky

        účinné od 1. 1. 1999Připravený roztok se ihned po přípravě plní do příslušné skupiny lahviček a to ze spodní čtvrtiny lahve (nikoliv ze dna), tak, aby se všechny lahvičky úplně naplnily. Jemně se poklepe, aby se odstranily bublinky. Lahvičky určené pro počátek pokusu se ihned analyzují na obsah kyslíku Winklerovou metodou nebo pomocí oximetru. Obsah lahviček lze konzervovat pro pozdější analýzu přídavkem síranu manganatého a hydroxidu sodného. Takto fixované lahvičky, které obsahují hnědě zbarvené hydratované oxidy Mn3+ se skladují na temném místě při teplotě 10 - 20 °C nejdéle po dobu 24 h. Zbývající lahvičky se uzavřou (bez bublinek) a inkubují se při 20 °C ve tmě. Každá série musí být doprovázena slepým pokusem, který kontroluje inokulum.

        účinné od 1. 1. 1999V duplicitních lahvičkách se nejméně 1x týdně stanovuje kyslík a to po celou dobu 28 dnů.

        účinné od 1. 1. 1999Týdenní vzorky umožňují stanovení 14 denního okna, kdežto vzorky každé 3 - 4 dny dovolují stanovit 10 denní okno, což vyžaduje dvojnásobný počet lahviček.

        účinné od 1. 1. 1999Pro látky, které obsahují dusík se musí provést korekce na nitrifikaci. To se provádí tak, že se změří kyslík pomocí oximetru a pak se stanoví dusičnany a dusitany. Spotřeba kyslíku na tuto oxidaci se počítá podle přílohy 5.

    1. účinné od 1. 1. 1999VI. 3 VÝSLEDKY A ZPRÁVA
      1. účinné od 1. 1. 1999VI. 3. 1 Zpracování výsledků

        účinné od 1. 1. 1999Nejprve se vypočte BSK po každé časové periodě tak, že se odečte spotřeba kyslíku v mg.l-1 slepého pokusu od spotřeby se zkoušenou látkou. Takto získaný výsledek se dělí koncentrací zkoušené látky a tím se získá specifická BSK v mg kyslíku na mg látky. Pak se vypočítá procentní biologická rozložitelnost jako podíl specifické BSK a specifické TSK (počítané podle přílohy 2. 2) nebo CHSK (stanovené analyticky podle přílohy 2. 3).

        účinné od 1. 1. 1999

        účinné od 1. 1. 1999

        1. účinné od 1. 1. 1999nebo

        účinné od 1. 1. 1999

        1. účinné od 1. 1. 1999kde
          1. účinné od 1. 1. 1999zk. l. = zkoušená látka,
          2. účinné od 1. 1. 1999sl. p. = slepý pokus.

        účinné od 1. 1. 1999Je potřeba podotknout, že tyto dvě metody neposkytují nezbytně stejné výsledky. Upřednostnit by se měla metoda s použitím TSK.

        účinné od 1. 1. 1999Pro zkoušenou látku obsahující dusík se používá vhodná TSK (NH4 nebo NO3) podle toho, co se ví nebo očekává o výskytu nitrifikace (viz příloha 5). V případě, že se nitrifikace vyskytuje, ale není úplná, koriguje se spotřeba kyslíku podle analytických koncentrací dusitanů a dusičnanů.

      1. účinné od 1. 1. 1999VI. 3. 2 Platnost výsledků

        účinné od 1. 1. 1999Spotřeba kyslíku ve slepých pokusech nesmí být vyšší než 1,5 mg.l-1 po 28 dnech. Vyšší hodnoty vyžadují prozkoumání použité experimentální techniky. Zbytková koncentrace kyslíku v lahvičkách nesmí být nižší než 0,5 mg.l-1 v jakémkoliv časovém úseku zkoušky. Tyto kyslíkové hladiny jsou platné jen v případě, že metoda, jíž se stanovuje kyslík, je schopná tyto koncentrace přesně měřit.

        účinné od 1. 1. 1999Viz také část I.5.2.

      1. účinné od 1. 1. 1999VI. 3. 3 Závěrečná zpráva

        účinné od 1. 1. 1999Viz I.8.

    1. účinné od 1. 1. 1999VI. 4 PŘEHLED VÝSLEDKŮ
      1. účinné od 1. 1. 1999Příklad uspořádání výsledků může být následující:

        účinné od 1. 1. 1999ZKOUŠKA V UZAVŘENÝCH LAHVIČKÁCH

        1. účinné od 1. 1. 19991. LABORATOŘ
        2. účinné od 1. 1. 19992. DATUM ZAČÁTKU ZKOUŠKY
        3. účinné od 1. 1. 19993. ZKOUŠENÁ LÁTKA
          1. účinné od 1. 1. 1999Název:
          2. účinné od 1. 1. 1999Koncentrace zásobního roztoku: mg.l-1
          3. účinné od 1. 1. 1999Počáteční koncentrace v lahvičce: mg.l-1
          4. účinné od 1. 1. 1999TSK nebo CHSK: mg O2.mg zkoušené látky-1
        1. účinné od 1. 1. 19994. INOKULUM
          1. účinné od 1. 1. 1999Zdroj:
          2. účinné od 1. 1. 1999Úprava:
          3. účinné od 1. 1. 1999Předúprava v případě, že byla použita:
          4. účinné od 1. 1. 1999Koncentrace v reakční směsi: mg/l
        1. účinné od 1. 1. 19995. PROVEDENÁ STANOVENÍ

          účinné od 1. 1. 1999Metoda: Winkler / oximetr

          účinné od 1. 1. 1999
          MANOMETRICKÁ RESPIROMETRICKÁ ZKOUŠKA ZKOUŠKA V UZAVŘENÝCH LAHVIČKÁCH
          Stanoveno (mg.l-1)
          0n1n2
          Slepý pokus1C1
          2C2
          Průměr
          Zkoušená látka1a1
          2a2
          Průměr
        2. účinné od 1. 1. 1999Poznámka: Podobný vzor může být použit i pro referenční látku a pro kontrolu toxicity.
        1. účinné od 1. 1. 19996. OPRAVA NA NITRIFIKACI
          účinné od 1. 1. 1999
          MANOMETRICKÁ RESPIROMETRICKÁ ZKOUŠKA ZKOUŠKA V UZAVŘENÝCH LAHVIČKÁCH
          Doba inkubace0n1n2n3
          (i) Koncentrace dusičňanů (mg N.l-1)
          (ii) Změna koncentrace dusičňanů (mg N.l-1)
          (iii) Kyslíkový ekvivalent (mg N.l-1)
          (iv) Koncentrace dusitanů (mg N.l-1)
          (v) Změna v koncentraci dusitanů (mg N.l-1)
          (vi) Kyslíkový ekvivalent (mg N.l-1)
          (iii + vi) Celkový kyslíkový ekvivalent (mg N.l-1)
        1. účinné od 1. 1. 19997. DOSAŽENÉ ODSTRANĚNÍ: % ROZKLADU
          účinné od 1. 1. 1999
          MANOMETRICKÁ RESPIROMETRICKÁ ZKOUŠKA ZKOUŠKA V UZAVŘENÝCH LAHVIČKÁCH
          Odstranění po n dnech (mg.l-1)
          n1n2n3
          Lahev 1: (mto - mtx) - (mbo - mbx)
          Lahev 2: (mto - mtx) - (mbo - mbx)
          Lahev 1:

          Lahev 2:

          účinné od 1. 1. 1999Průměr nelze počítat v případě velkých diferencí replikátů.

          1. účinné od 1. 1. 1999mto = hodnota ve zkušební lahvičce v čase 0
          2. účinné od 1. 1. 1999mx = hodnota ve zkušební lahvičce v čase x
          3. účinné od 1. 1. 1999mbo = hodnota slepého pokusu v čase 0
          4. účinné od 1. 1. 1999mbx = hodnota slepého pokusu v čase x

          účinné od 1. 1. 1999Uplatní se všechny korekce na nitrifikaci iii + vi z části 6.

        1. účinné od 1. 1. 19998. SPOTŘEBA KYSLÍKU VE SLEPÉM POKUSU

          účinné od 1. 1. 1999Spotřeba kyslíku ve slepém pokusu je (mbo - mb28) v mg.l-1. Tato spotřeba je důležitá pro platnost zkoušky. Měla by být menší než 1,5 mg.l-1.

  1. účinné od 1. 1. 1999IV. F ZKOUŠKA MITI
    1. účinné od 1. 1. 1999VII. 1 PRINCIP METODY

      účinné od 1. 1. 1999Měření spotřeby kyslíku míchaného roztoku nebo suspenze zkoušené látky v minerálním médiu, které je inokulováno speciální kulturou neadaptovaných mikroorganismů je prováděno automaticky po dobu 28 dnů ve stíněném uzavřeném respirometru při 25 ± 1 °C. Uvolněný CO2 je absorbován v hydroxidu sodném. Biologická rozložitelnost je vyjádřena jako procentický úbytek kyslíku (korigovaný slepým pokusem) teoretické spotřeby kyslíku (TSK). Procento primární biologické rozložitelnosti lze také počítat z doprovodné chemické analýzy provedené na začátku a na konci inkubace, případně podle analýzy DOC.

    1. účinné od 1. 1. 1999VII. 2. POPIS METODY
      1. účinné od 1. 1. 1999VII. 2. 1 Přístroje
        1. účinné od 1. 1. 1999a) automatický elektrolytický měřič BSK nebo respirometr vybavený 6 baňkami, každá objemu 300 ml s uzávěry, které umožňují absorbci CO2,
        2. účinné od 1. 1. 1999b) místnost s konstatní teplotou nebo vodní lázeň s teplotou 25 ± 1 ° C,
        3. účinné od 1. 1. 1999c) zařízení pro filtraci s membránovými filtry (nepovinně),
        4. účinné od 1. 1. 1999d) analyzátor CO2 (nepovinně).
      1. účinné od 1. 1. 1999VII. 2. 2 Příprava minerálního média

        účinné od 1. 1. 1999Vždy 3 ml dále uvedených roztoků a, b, c, a d se doplní deionizovanou vodou na objem 1000 ml.

        účinné od 1. 1. 1999
        MANOMETRICKÁ RESPIROMETRICKÁ ZKOUŠKA ZKOUŠKA V UZAVŘENÝCH LAHVIČKÁCH
        a)Hydrogenfosforečnan draselný K2HPO421,75 g,
        dihydrogenfosforečnan draselný KH2PO48,50 g,
        dodekahydrát hydrogenfosforečnanu sodného
        Na2HPO4. 12 H2O        		44,60 g,
        chlorid amonný NH4Cl
        se rozpustí v 1000 ml vody. Hodnota pH by měla být 7,2.        		1,70 g
        b)Heptahydrát síranu hořečnatého MgSO4. 7 H2O
        se rozpustí v 1000 ml vody.        		22,50 g
        c)Chlorid vápenatý CaCl2
        se rozpustí v 1000 ml vody.
        		27,50 g
        d)hexahydrát chloridu železitého FeCl3 . 6H2O
        se rozpustí v 1000 ml vody.        		0,25 g
      1. účinné od 1. 1. 1999VII. 2. 3 Příprava inokula

        účinné od 1. 1. 1999Odeberou se vzorky z nejméně deseti lokalit, kde se používají a vypouštějí různé chemikálie. Z míst jako jsou čistírny městských a průmyslových odpadních vod, řek, jezer a moří se odebírá l litr kalu, povrchových půd, vody a j., které se pečlivě smíchají. Po odstranění vyflotovaných látek a odstátí se pH supernatantu upraví na 7 ± 1 hydroxidem sodným nebo kyselinou fosforečnou. Do práce se bere vhodný objem tohoto filtrovaného supernatantu a naplní se jím nádoba, která se 23,5 h provzdušňuje. Třicet minut po ukončení provzdušňování se odlije 1/3 objemu a doplní stejným objemem rozoku, který obsahuje vždy po 0,1 % glukosy, peptonu a hydrogenfosforečnanu draselného a obnoví se provzdušňování. Tento postup se opakuje jednou denně. Kalová jednotka musí být provozovaná podle zásad dobré laboratorní praxe: odtok musí být čirý, teplota musí být udržovaná při 25 ± 2 °C, pH má být 7 ± 1, kal má dobře sedimentovat, provzdušňování musí být dostatečné za všech okolností, mají být přítomni provoci a aktivita kalu se má kontrolovat pomocí referenční látky nejméně každé 3 měsíce. Takto získané inokulum se nepoužívá dříve než po 1 měsíci kultivace a déle než po čtyřech měsících. Proto je nutné odebírat vzorky ze zvolených 10 míst každé 3 měsíce.

        účinné od 1. 1. 1999K udržení stejné aktivity čerstvého a starého kalu se filtrovaný supernatant starého kalu smíchává se stejným objemem nového kalu a směs se kultivuje podle popsaného postupu. Do práce se kal bere 18 - 24 h po přídavku živin.

      1. účinné od 1. 1. 1999VII. 2. 4 Příprava baněk
        1. účinné od 1. 1. 1999Připravuje se 6 baněk podle schematu:
          1. účinné od 1. 1. 1999č. 1 zkoušená látka ve zřeďovací vodě 100 mg.l-1
          2. účinné od 1. 1. 1999č. 2, 3, 4 zkoušená látka v minerálním médiu 100 mg.l-1
          3. účinné od 1. 1. 1999č. 5 referenční látka (např. anilin) v minerálním médiu 100 mg.l-1
          4. účinné od 1. 1. 1999č. 6 minerální médium

        účinné od 1. 1. 1999Málo rozpustné látky se přidávají přímo odvážením nebo odměřením objemu nebo se zpracují jak je uvedeno v příloze č. 3, s výjimkou těch, u kterých nemohou být použita rozpouštědla nebo emulgátory. Do speciálních uzávěrů lahví se přidá absorbent oxidu uhličitého. pH v baňkách č. 2, 3 a 4 se upraví na 7,0.

      1. účinné od 1. 1. 1999VII. 2. 5 Provedení zkoušky

        účinné od 1. 1. 1999Baňky č. 2, 3, 4 (zkušební suspenze), č. 5 (kontrola aktivity), č. 6 (slepý pokus) se inokulují malým množstvím inokula tak, aby výsledná koncentrace kalu byla 30 mg.l-1. Láhev č. 1 je bez inokula, čímž se získává abiotická kontrola.Nasadí se zátka, zkontroluje se těsnost, zapnou se míchadla a započne se s měřením úbytku kyslíku za stíněných podmínek. Denně se kontroluje teplota, míchání, zapisovač spotřeby kyslíku a zaznamenávají se všechny změny barvy obsahu láhve. Při využití 6 křivkového zapisovače se získává přímo křivka BSK. Na konci inkubace, která je obvykle 28 dní, měří se pH v láhvi a stanovuje zbytková koncentrace zkoušené látky a jejich metabolitů a v případě zkoušení látek rozpustných ve vodě také DOC (postup podle přílohy 2). V případě těkavých látek se používá speciální postup. V případě výskytu nitrifikace se stanovují, jestliže je to možné, dusičnany a dusitany.

    1. účinné od 1. 1. 1999VII. 3. DATA A ZPRÁVA
      1. účinné od 1. 1. 1999VII. 3. 1 Zpracování výsledků
        1. účinné od 1. 1. 1999Spotřeba kyslíku zkoušenou látkou za daný čas v mg, korigovaná slepým pokusem za stejnou dobu, se dělí hmotností zkoušené látky v pokusu. Tento postup poskytuje výsledek vyjádřený jako spotřeba kyslíku v mg.mg-1 zkoušené látky, což je:

          účinné od 1. 1. 1999

          1. účinné od 1. 1. 1999kde
            1. účinné od 1. 1. 1999zk. l. = zkoušená látka,
            2. účinné od 1. 1. 1999sl. p. = slepý pokus,
            3. účinné od 1. 1. 1999m = hmotnost zkoušené látky.
        1. účinné od 1. 1. 1999Procentický biologický rozklad se získá ze vztahu:

          účinné od 1. 1. 1999

        účinné od 1. 1. 1999Pro směsi se TSK vypočítává z elementární analýzy, tak jako pro jednoduché látky. Dosazuje se odpovídající TSK pro NH4 a NO3 podle toho, zda se úplná nitrifikace vyskytuje či ne. V případě neúplné nitrifikace se vychází ze změn koncentrace NO3 a NO2 podle přílohy 5.

        účinné od 1. 1. 1999Spočítá se procento primárního biologického rozkladu z úbytku původní chemické látky (viz I.7.2)

        účinné od 1. 1. 1999

        účinné od 1. 1. 1999V případě, že se v lahvi č. 1 zjistí fyzikálně-chemický úbytek původní látky zaznamená se tento jev a za koncentraci zkoušené látky (Sb) po 28 dnech se dosadí tato koncentrace.

        1. účinné od 1. 1. 1999V případě stanovení DOC (nepovinné) se úplná procentická biologická rozložitelnost počítá ze vztahu:

          účinné od 1. 1. 1999

        účinné od 1. 1. 1999Jestliže byl zjištěn úbytek DOC v láhvi č. 1, která měří abiotický rozklad, pak se do výpočtu dosazuje koncentrace DOC zjištěná v této láhvi.

        účinné od 1. 1. 1999Všechny výsledky se zaznamenají do souhrnu, jehož vzor je přiložen.

      1. účinné od 1. 1. 1999VII. 3. 2 Platnost výsledků

        účinné od 1. 1. 1999Slepý pokus mívá spotřebu kyslíku inokulem 20 - 30 mg.l-1 a neměl by být větší než 60 mg.l-1 v průběhu 28 dnů. Hodnoty větší než 60 mg.l-1 vyžadují kritické vyhodnocení získaných dat a experimentální techniky. V případě, že pH je mimo rozsah 6 - 8,5 a spotřeba kyslíku zkoušenou látkou je menší než 60 %, zkouška by měla být opakována s nižší koncentrací látky.

        účinné od 1. 1. 1999Viz také I.5.2.

        účinné od 1. 1. 1999V případě, že rozklad anilinu, vypočítaný ze spotřeby kyslíku, nedosáhne 40 % po 7 dnech a 65 % po 14 dnech, je nutné zkoušku považovat za neplatnou.

      1. účinné od 1. 1. 1999VII. 3. 3 Zpráva

        účinné od 1. 1. 1999Viz I.8.

    1. účinné od 1. 1. 1999VII. 4 PŘEHLED VÝSLEDKŮ
      1. účinné od 1. 1. 1999Příklad uspořádání je uveden dále:

        účinné od 1. 1. 1999MITI (I) ZKOUŠKA

        1. účinné od 1. 1. 19991. LABORATOŘ
        2. účinné od 1. 1. 19992. DATUM ZAHÁJENÍ POKUSU
        3. účinné od 1. 1. 19993. ZKOUŠENÁ LÁTKA
          1. účinné od 1. 1. 1999Název:
          2. účinné od 1. 1. 1999Koncentrace zásobního roztoku: mg.l-1 jako látka
          3. účinné od 1. 1. 1999Počáteční koncentrace v médiu, Co: mg.l-1 jako látka
          4. účinné od 1. 1. 1999Objem reakční směsi, V: ml
          5. účinné od 1. 1. 1999TSK: mg O2.l-1
        1. účinné od 1. 1. 19994. INOKULUM
          účinné od 1. 1. 1999
          MANOMETRICKÁ RESPIROMETRICKÁ ZKOUŠKA ZKOUŠKA V UZAVŘENÝCH LAHVIČKÁCH MITI (I) ZKOUŠKA
          Lokality, odkud byly získány vzorky:
          1) ...6) ...
          2) ...7) ...
          3) ...8) ...
          4) ...9) ...
          5) ...10) ...

          účinné od 1. 1. 1999Koncentrace suspendovaných látek v aktivovaném kalu po aklimatizaci na syntetické splašky = ... mg.l-1.

          účinné od 1. 1. 1999Objem aktivovaného kalu v konečném médiu = . . . ml

          účinné od 1. 1. 1999Koncentrace kalu v konečném médiu = . . . mg.l-1

        1. účinné od 1. 1. 19995. SPOTŘEBA KYSLÍKU: BIOLOGICKÁ ROZLOŽITELNOST
          1. účinné od 1. 1. 1999Typ použitého respirometru:
            účinné od 1. 1. 1999
            MANOMETRICKÁ RESPIROMETRICKÁ ZKOUŠKA ZKOUŠKA V UZAVŘENÝCH LAHVIČKÁCH MITI (I) ZKOUŠKA
            Čas (dny)
            07142128
            spotřeba kyslíku (mg)
            zkoušenou látkou            		a1
            a2
            a3
            spotřeba kyslíku (mg)
            ve slepém pokuse            		b
            opravená spotřeba
            kyslíku (mg)            		(a1 - b)
            (a2 - b)
            (a3 - b)
            BSK na mg zkoušené
            látky            		Lahev 1
            Lahev 2
            Lahev 3
            % rozkladu1
            2
            3
            průměr*
          2. účinné od 1. 1. 1999Poznámka: Podobný vzor může být použit pro referenční látku
          3. účinné od 1. 1. 1999* neprůměrovat, jestliže jsou mezi jednotlivými měřeními velké rozdíly
        1. účinné od 1. 1. 19996. ANALÝZA UHLÍKU (nepovinně)
          1. účinné od 1. 1. 1999Analyzátor uhlíku:
            účinné od 1. 1. 1999
            MANOMETRICKÁ RESPIROMETRICKÁ ZKOUŠKA ZKOUŠKA V UZAVŘENÝCH LAHVIČKÁCH MITI (I) ZKOUŠKA
            BaňkaDOC% odstraněného DOCPrůměr
            ZměřenoOpraveno
            Voda + zkoušená látkaa--
            Kal + zkoušená látkab1b1 - c
            Kal + zkoušená látkab2b2 - c
            Kal + zkoušená látkab3b3 - c
            Slepý pokudc--
        1. účinné od 1. 1. 19997. SPECIFICKÁ CHEMICKÁ ANALÝZA
          účinné od 1. 1. 1999
          MANOMETRICKÁ RESPIROMETRICKÁ ZKOUŠKA ZKOUŠKA V UZAVŘENÝCH LAHVIČKÁCH MITI (I) ZKOUŠKA
          Zbytek zkoušené chemikálie na konci zkoušky% rozkladu
          slepý pokusSb
          inokulované mediumSa1
          Sa1
          Sa3
          účinné od 1. 1. 1999% rozkladu = [(Sb- Sa)/Sb].100

          účinné od 1. 1. 1999Počítá se pro lahve č. a1, a2, a3.

        1. účinné od 1. 1. 19998. POZNÁMKY

          účinné od 1. 1. 1999Je-li k dispozici, může být připojena křivka BSK v závislosti na čase.

účinné od 1. 1. 1999

PŘÍLOHA 1

účinné od 1. 1. 1999

účinné od 1. 1. 1999Zkratky a definice

účinné od 1. 1. 1999
PŘÍLOHA 1 Zkratky a definice
DO: Rozpuštěný kyslík, dissolved oxygen, (mg.l-1), je
koncentrace kyslíku, který je rozpuštěn ve vodném
vzorku.
BSK: Biochemická spotřeba kyslíku, biochemical oxygen
demand, BOD, (g), je množství kyslíku, jež je v průběhu
oxidace zkoušené látky spotřebováno mikroorganismy. Je
také vyjádřena jako spotřeba kyslíku v g na g látky.
(Viz metoda V).
CHSK: Chemická spotřeba kyslíku, chemical oxygen demand, COD,
(g), je množství kyslíku, jež je spotřebováno v průběhu
oxidace zkoušené látky horkým kyselým dichromanem.
Poskytuje měřítko o množství oxidovatelných látek, jež
jsou přítomny ve vzorku. Vyjadřuje se také v g kyslíku
na g látky. (Viz metoda VI).
DOC: Rozpuštěný organický uhlík, dissolved organic carbon,
je organický uhlík přítomný v roztoku nebo ve filtrátu
získaném filtrací přes filtr o velikosti pórů 0,45
mikrometr nebo jako centrifugát získaný při
odstřeďování po dobu 15 minut při 40 000 m.s-2 (plus
mínus 4000 g).
TSK: Teoretická spotřeba kyslíku, theoretical oxygen demand,
ThOD, (mg), je celkové množství kyslíku, které je
potřebné pro úplnou oxidaci látky. Vypočítává se z
molekulového vzorce látky (viz příloha 2.2) a vyjadřuje
se v mg kyslíku na mg látky.
TCO2: Teoretický oxid uhličitý, theoretical carbon dioxide,
ThCO2, je množství oxidu uhličitého, které by mělo
vzniknout ze známého nebo změřeného obsahu uhlíku v
látce za předpokladu její plné mineralizace; vyjadřuje
se jako mg oxidu uhličitého vyvinutého 1 mg
zkoušené látky.
TOC: Celkový organický uhlík, total organic carbon, ve
vzorku je součet organického uhlíku v roztoku a v
suspenzi.
IC: Anorganický uhlík, inorganic carbon.
TC: Celkový uhlík, total carbon, je součet organického a
anorganického uhlíku ve vzorku.
  1. účinné od 1. 1. 1999Primární (základní) biologický rozklad:

    účinné od 1. 1. 1999jsou změny chemické struktury látky podrobené biologickému působení, vedoucí ke ztrátě specifických vlastností látky.

  1. účinné od 1. 1. 1999Úplný (konečný) biologický rozklad (aerobní):

    účinné od 1. 1. 1999je stupeň rozkladu látky dosažený v podmínkách jejího úplného zužitkování mikroorganismy, vedoucí k produkci oxidu uhličitého, vody, minerálních solí a nové buněčné hmoty (biomasy).

  1. účinné od 1. 1. 1999Snadná biologická rozložitelnost:

    účinné od 1. 1. 1999je arbitrážní klasifikací látek, které byly podrobeny vyhledávacím zkouškám úplné biologické rozložitelnosti; výsledky těchto zkoušek jsou natolik přesvědčivé, že lze přijmout předpoklad, že se látky budou ve vodném prostředí a za aerobních podmínek rychle a úplně biologicky rozkládat.

  1. účinné od 1. 1. 1999Inherentní biologická rozložitelnost:

    účinné od 1. 1. 1999klasifikace chemických látek, pro které jsou nepochybné důkazy o jejich biologické rozložitelnosti (primární nebo konečné) při použití kterékoliv metody zkoušení.

  1. účinné od 1. 1. 1999Odstranitelnost:

    účinné od 1. 1. 1999je přístupnost látek možnosti být odstraněny při biologickém čištění odpadních vod bez nepříznivého ovlivňování normálního průběhu čisticích pochodů. Všeobecně, látky snadno biologicky rozložitelné jsou odstranitelné, neplatí to ale pro všechny inherentně rozložitelné látky. Spolupůsobit mohou také abiotické procesy.

  1. účinné od 1. 1. 1999Lag(ová) fáze:

    účinné od 1. 1. 1999je, ve zkoušce úbytku (die-away, odstranění, vymizení), doba od inokulace do dosažení alespoň 10 % biologického rozkladu. Lag fáze je obvykle velmi variabilní a špatně reprodukovatelná.

  1. účinné od 1. 1. 1999Doba rozkladu:

    účinné od 1. 1. 1999je doba od konce lag fáze do dosažení 90 % maximálně dosažitelného rozkladu.

  1. účinné od 1. 1. 199910 denní okno

    účinné od 1. 1. 1999je 10 dnů, které bezprostředně následují po dosažení 10 % rozkladu.

účinné od 1. 1. 1999

PŘÍLOHA 2

účinné od 1. 1. 1999

účinné od 1. 1. 1999Výpočet a stanovení vhodných skupinových parametrů

účinné od 1. 1. 1999V závislosti na zvolené zkušební metodě je požadována znalost některých úhrnných parametrů. V další části přílohy jsou popsány některé postupy jak takovéto parametry odvodit. Využití těchto parametrů je popsáno u jednotlivých metod.

  1. účinné od 1. 1. 19991. Obsah uhlíku

    účinné od 1. 1. 1999Obsah uhlíku se počítá ze známého elementárního složení nebo se stanoví elementární analýzou zkoušené látky.

  1. účinné od 1. 1. 19992. Teoretická spotřeba kyslíku (TSK)

    účinné od 1. 1. 1999Teoretická spotřeba kyslíku (TSK) může být spočítána ze znalosti elementárního složení nebo z výsledků elementární analýzy. Pro látku obecného složení

    účinné od 1. 1. 1999CcHhClclNnNanaOoPpSs

    1. účinné od 1. 1. 1999o molekulové hmotnosti MH, bez nitrifikace,

    účinné od 1. 1. 1999

    1. účinné od 1. 1. 1999nebo s nitrifikací

    účinné od 1. 1. 1999

  1. účinné od 1. 1. 19993. Chemická spotřeba kyslíku (CHSK)

    účinné od 1. 1. 1999Chemická spotřeba kyslíku (CHSK) se stanoví postupem VI.

  1. účinné od 1. 1. 19994. Rozpuštěný organický uhlík (DOC)

    účinné od 1. 1. 1999Rozpuštěný organický uhlík je definován jako organický uhlík jakékoliv chemické látky nebo směsi ve vodě, který projde filtrem s velikostí pórů 0,45 µm.

    účinné od 1. 1. 1999Vzorky ze zkušebních nádob se filtrují bezprostředně po odběru ve filtrační aparatuře přes vhodný filtr. Prvních 20 ml (toto množství může být zmenšeno při použití malých filtrů) se vylije. Objemy 10 - 20 ml nebo menší, v případě nástřiku (objem závisí na potřebném objemu pro analýzu), se uschovávají pro analýzu. Koncentrace DOC se stanovuje pomocí analyzátoru organického uhlíku, který umožňuje přesné stanovení koncentrace uhlíku, jež je ekvivalentní nebo menší než 10 procent počáteční koncentrace použité ve zkoušce.

    účinné od 1. 1. 1999Filtrované vzorky, které není možné analyzovat ve stejný pracovní den mohou být konzervovány uložením v chladu při teplotě 2 - 4 °C po dobu 48 h nebo při teplotách nižších než - 18 °C po dobu delší.

    1. účinné od 1. 1. 1999Poznámky:
      1. účinné od 1. 1. 1999Membránové filtry jsou často impregnovány povrchově aktivními látkami za účelem jejich hydrofilizace. Filtr tudíž může obsahovat několik mg rozpustného uhlíku, jenž může interferovat při stanovení biologické rozložitelnosti. Povrchově aktivní látky a jiné rozpustné organické látky se z filtrů odstraňují vyvařením v deionizované vodě 3 krát jednu hodinu. Filtry se pak skladují ve vodě po dobu 1 týdne. Každé balení filtrů musí být zkoušeno, zda neobsahuje rozpustný organický uhlík.
      2. účinné od 1. 1. 1999V závislosti na typu membránového filtru může docházet k adsorpci zkoušené látky na filtru. Proto je potřebné tuto možnost ověřit.
      3. účinné od 1. 1. 1999Místo filtrace může být použito pro rozlišení mezi TOC a DOC odstřeďování při 40 000 m.s-1 (4000 g) po dobu 15 min. Tato metoda však není vhodná při počáteční koncentraci DOC < 10 mg.l-1, protože nelze odstranit všechny bakterie nebo se může zpětně rozpouštět uhlík, který je součástí bakteriální plasmy.

účinné od 1. 1. 1999LITERATURA

účinné od 1. 1. 1999Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 12 th ed., Am. Pub. Hlth. Ass., Am. Wat. Poll. Control Fed., Oxygen Demand,1965

účinné od 1. 1. 1999Wagner, R. Vom Wasser, 1976, Vol. 46, 139

účinné od 1. 1. 1999DIN Entwurf 38 409, Teil 41 - Deutsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung, Summarische Wirkungs- und Stoffkenngrössen (Grupe H). Bestimmung des Chemischen Sauerstoffbedarfs

účinné od 1. 1. 1999(CSB) (H41), Normenausschuss Wasserwesen (NAW) in DIN Deutsches Institut für Normung e. V.

účinné od 1. 1. 1999Gerike, P. The biodegradability testing of poorly water soluble compounds. Chemosphere, 1984, Vol. 13(1), 169.

účinné od 1. 1. 1999

PŘÍLOHA 3

účinné od 1. 1. 1999

účinné od 1. 1. 1999Vyhodnocení biologické rozložitelnosti těžce rozpustných látek

účinné od 1. 1. 1999Při stanovení biologické rozložitelnosti látek těžce rozpustných ve vodě si zaslouží zvláštní pozornost následující aspekty.

účinné od 1. 1. 1999Protože homogenní kapaliny způsobují zřídka problémy při odebírání vzorků doporučuje se tuhé látky nejprve vhodným způsobem homogenizovat a tím zabránit chybám způsobeným nehomogenitou. Zvláštní pozornost musí být věnována odběrům vzorků obsahujících jen několik mg ze směsí látek, které obsahují velká množství nečistot.

účinné od 1. 1. 1999V průběhu zkoušek se mají používat různé způsoby míchání. Pozornost musí být věnována tomu, aby míchání bylo přiměřené pro udržení látky v disperzi ale zároveň, aby nedocházelo k přehřívání, nadměrnému pěnění a nadměrných střižným silám.

účinné od 1. 1. 1999K vytvoření stabilní emulze se může použít emulgátor, který není toxický pro bakterie, není biologicky rozložitelný a nesmí v průběhu zkoušky pěnit.

účinné od 1. 1. 1999Stejná kritéria jako na emulgátory se aplikují na rozpouštědla.

účinné od 1. 1. 1999Pro tuhé zkoušené látky se nedoporučují tuhé nosiče. Takovéto nosiče však mohou být vhodné pro zkoušení olejovitých látek.

účinné od 1. 1. 1999V případě, že se použijí pomocné látky jako jsou emulgátory, rozpouštědla a nosiče musí se provést odpovídají slepý pokus.

účinné od 1. 1. 1999Pro studium biologické rozložitelnosti těžce rozpustných látek lze použít kteroukoliv ze tří respirometrických zkoušek (CO2, BSK, MITI).

účinné od 1. 1. 1999LITERATURA

účinné od 1. 1. 1999de Morsier, A. et al., Biodegradation tests for poorly soluble compounds. Chemosphere, 1987, Vol. 16, 833.

účinné od 1. 1. 1999Gerike, P., The biodegradability testing of poorly water soluble compounds. Chemosphere, 1984, Vol. 13, 169.

účinné od 1. 1. 1999

PŘÍLOHA 4

účinné od 1. 1. 1999

účinné od 1. 1. 1999Vyhodnocení biologické rozložitelnosti látek potenciálně toxických pro inokulum

účinné od 1. 1. 1999V případech, kdy se látka po zkouškách snadné biologické rozložitelnosti jeví jako obtížně rozložitelná, doporučuje se rozlišit, zda jde o inhibiční působení nebo o odolnost látky vůči rozkladu (Reynolds et al., 1987).

účinné od 1. 1. 1999Ve zkoušce toxicity a biologické rozložitelnosti se použijí stejná nebo podobná inokula.

účinné od 1. 1. 1999Ke zjištění toxicity látky, která se zkouší na snadnou biologickou rozložitelnost (zkoušky podle metod IV. A - F) se doporučuje použít zkoušku inhibice dýchání aktivovaného kalu nebo stanovení BSK nebo metodu inhibice růstu nebo kombinaci těchto metod.

účinné od 1. 1. 1999Chceme.li se vyhnout inhibici z důvodu toxicity měla by být koncentrace zkoušené látky použitá v pokusech podle metod IV menší než I/10 EC50 (nebo menší než EC20) zjištěné zkouškou toxicity. Látky s EC50 > 300 mg.l-1 nemají pravděpodobně toxické účinky při zkouškách snadné biologické rozložitelnosti podle metod IV. Hodnoty EC50 < 20 mg.l-1 mohou při následném zkoušení pravděpodobně způsobovat potíže. Lze doporučit práci s nízkými koncentracemi, což vyžaduje použití přesné a citlivé zkoušky v uzavřených lahvích IV. E nebo použití 14C značených látek. Vyšší koncentrace zkoušené látky může případně umožnit použití adaptovaného inokula. V tomto případě se ale přichází o specifičnost zkoušky snadné biologické rozložitelnosti, jako základního klasifikačního kriteria metod zkoušení podle IV.

účinné od 1. 1. 1999LITERATURA

účinné od 1. 1. 1999Reynolds, L. et. al., Evaluation of the toxicity of substances to be assessed for biodegradability. Chemosphere, 1987, Vol. 16, 2259.

účinné od 1. 1. 1999

PŘÍLOHA 5

účinné od 1. 1. 1999

účinné od 1. 1. 1999Oprava na spotřebu kyslíku při nitrifikaci

účinné od 1. 1. 1999Chyby při stanovení spotřeby kyslíku ve zkouškách látek, které neobsahují dusík, jsou málo významné (ne větší než 5 procent) i když dochází k nepravidelné oxidaci amoniakálního dusíku ve slepém pokusu a v řádné zkoušce. Ovšem zkoušení látek, obsahujících dusík může být provázeno vážnými chybami.

  1. účinné od 1. 1. 1999V případě, že je pozorována neúplná nitrifikace, musí být spotřeba kyslíku měřenou směsí opravena o spotřebu na oxidaci amoniaku a amonných iontů na dusitany a dusičnany, vycházejíc z předpokladu platnosti následujících rovnic:

    účinné od 1. 1. 1999

    účinné od 1. 1. 1999

  1. účinné od 1. 1. 1999Celkově:

    účinné od 1. 1. 1999

účinné od 1. 1. 1999Z rovnice (1) vychází spotřeba kyslíku při oxidaci 28 g dusíku obsaženého v NH4Cl na dusitan 96 g, což je faktor 3,43 (96:28). Stejným způsobem lze z rovnice (3) vypočítat spotřebu kyslíku na oxidaci amoniakálního dusíku na dusičnan 128 g, což dává faktor 4,57 (128:28).

účinné od 1. 1. 1999Protože popsané reakce jsou následné, působené určitými různými druhy bakterií, může koncentrace dusitanů stoupat i klesat; při jejím poklesu dochází ke vzniku určité koncentrace dusičnanů. Spotřeba kyslíku na tvorbu dusičnanů se získá násobením přírůstku koncentrace dusičnanů faktorem 4,57, spotřeba kyslíku na zvýšení obsahu dusitanů se získá násobením tohoto přírůstku faktorem 3,43 nebo při poklesu obsahu dusitanů jsou ztráty kyslíku přepočitatelné faktorem -3,43.

  1. účinné od 1. 1. 1999To znamená:
    1. účinné od 1. 1. 1999Kyslík spotřebovaný pro tvorbu dusičnanů = 4,57. přírůstek koncentrace dusičnanů
    2. účinné od 1. 1. 1999Kyslík spotřebovaný pro tvorbu dusitanů = 3,43. přírůstek koncentrace dusitanů
    3. účinné od 1. 1. 1999Kyslík ztracený při úbytku NO2 = - 3,43. přírůstek koncentrace dusičnanů

účinné od 1. 1. 1999Takže

účinné od 1. 1. 1999spotřeba kyslíku na nitrifikaci = ±3,43. změna koncentrace dusitanů + 4,57. změna koncentrace dusičnanů

účinné od 1. 1. 1999a z toho

účinné od 1. 1. 1999spotřeba kyslíku pro oxidaci uhlíku = celková spotřeba - spotřeba na nitrifikaci.

účinné od 1. 1. 1999Alternativně v případech, kdy se stanoví pouze celkový oxidovaný dusík může se spotřeba kyslíku na nitrifikaci v prvním přiblížení získat násobením přírůstku koncentrace oxidovaného dusíku faktorem 4,57.

účinné od 1. 1. 1999Opravená spotřeba kyslíku příslušná oxidaci uhlíku se pak srovnává s TSK NH3, jak je uvedeno v příloze 2.

  1. účinné od 1. 1. 1999V ROZLOŽITELNOST - BIOLOGICKÁ SPOTŘEBA KYSLÍKU
    1. účinné od 1. 1. 19991 METODA
      1. účinné od 1. 1. 19991. 1 ÚVOD

        účinné od 1. 1. 1999Cílem této metody je měření biochemické spotřeby kyslíku (BSK) tuhých nebo kapalných organických látek. Výsledky dosažitelné touto metodou platí v první řadě pro látky rozpustné ve vodě; v zásadě lze touto metodou zkoušet i těkavé a ve vodě obtížně rozpustné látky.

        účinné od 1. 1. 1999Metodu lze použít jen pro organické látky, které v koncentracích používaných při zkoušce nemají žádný inhibiční účinek na inokulum. Není-li daná látka při koncentracích používaných ve zkoušce rozpustná, je pro zajištění její dostatečné dispergace případně třeba použít zvláštní postupy, např. dispergaci ultrazvukem.

        účinné od 1. 1. 1999Při interpretaci nižších hodnot získaných jako výsledek zkoušky a při volbě vhodných koncentrací při zkoušení může být užitečná znalost údajů o toxicitě zkoušené látky.

      1. účinné od 1. 1. 19991. 2 DEFINICE A JEDNOTKY

        účinné od 1. 1. 1999Biochemická spotřeba kyslíku (BSK) je definována jako množství rozpuštěného kyslíku, které je nutné k biochemické oxidaci určitého množství rozpuštěné látky za předepsaných podmínek.

        účinné od 1. 1. 1999Výsledky se udávají jako g spotřeby kyslíku (BSK) na 1 g zkoušené látky.

      1. účinné od 1. 1. 19991. 3. REFERENČNÍ LÁTKY

        účinné od 1. 1. 1999Doporučuje se použít vhodnou referenční látku pro přezkoušení aktivity inokula.

      1. účinné od 1. 1. 19991. 4. PRINCIP METODY

        účinné od 1. 1. 1999Určité množství zkoušené látky se rozpustí nebo disperguje ve vhodném živném médiu bohatém na kyslík, poté se naočkuje inokulem a za stálé předepsané teploty se ve tmě inkubuje. BSK se stanoví na základě rozdílu mezi obsahem rozpuštěného kyslíku před začátkem a na konci zkoušky. Zkouška musí trvat nejméně 5 dní, avšak ne více než 28 dní.

        účinné od 1. 1. 1999Souběžně s touto zkouškou je třeba provést slepý pokus bez zkoušené látky.

      1. účinné od 1. 1. 19991. 5 KRITÉRIA KVALITY

        účinné od 1. 1. 1999Stanovení BSK není možné považovat za bezpečné stanovení biologické rozložitelnosti dané látky. Tuto zkoušku lze považovat pouze za první posouzení (vyhledávací, skríningovou).

      1. účinné od 1. 1. 19991. 6 POPIS METODY

        účinné od 1. 1. 1999Připraví se roztok nebo disperze zkoušené látky o vhodné koncentraci. Poté se stanoví BSK pomocí některé vhodné národní nebo mezinárodní standardizované metody.

    1. účinné od 1. 1. 19992 ÚDAJE A VYHODNOCENÍ

      účinné od 1. 1. 1999BSK zkoušené látky se vypočítá podle zvolené metody a vyjádří se v g spotřeby kyslíku na 1 g zkoušené látky.

    1. účinné od 1. 1. 19993 ZÁVĚREČNÁ ZPRÁVA

      účinné od 1. 1. 1999Uvede se použitá metoda. Jako biochemická spotřeba kyslíku se uvede průměrná hodnota nejména tří platných výsledků měření. Je třeba uvést všechny informace a poznámky důležité pro interpretaci výsledků, zejména co se týká nečistot, skupenství, toxických účinků a složení zkoušené látky, které by mohly ovlivnit výsledek.

      účinné od 1. 1. 1999Pokud bylo použito aditivum pro inhibici biologické nitrifikace, je třeba to uvést.

    1. účinné od 1. 1. 19994 LITERATURA
      1. účinné od 1. 1. 1999Seznam normovaných metod, např.:
        1. účinné od 1. 1. 1999NF T 90-103: Determination of the Biochemical Oxygen Demand
        2. účinné od 1. 1. 1999NBN 4O7: Biochemical Oxygen Demand
        3. účinné od 1. 1. 1999NEN 3235 5.4: Bepaling van het biochemisch zuurstofverbruik (BZV)
        4. účinné od 1. 1. 1999The Determination of Biochemical Oxygen Demand, Methods for the examination of Water and Associated Materials, HMSO, London.
        5. účinné od 1. 1. 1999ISO 5815: Determination of biochemical oxygen demand after n days.
  1. účinné od 1. 1. 1999VI ROZLOŽITELNOST - CHEMICKÁ SPOTŘEBA KYSLÍKU
    1. účinné od 1. 1. 19991 METODA
      1. účinné od 1. 1. 19991. 1 ÚVOD