Platné znění

Vyhláška Ministerstva zemědělství, kterou se stanoví požadavky na odběr vzorků a principy metod laboratorního zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů a způsob uchovávání vzorků

vyhlášené znění

  1. 2.24. Stanovení obsahu semduramicinu

    Účel, rozsah a princip

    Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu semduramicinu v krmivech a premixech. Obsah semduramicinu se stanoví po extrakci směsným rozpouštědlem hexan-octan ethylnatý a extrakt je přečištěn na pevné fázi a takto přečištěný extrakt je rozpuštěn v definovaném objemu mobilní fáze. Semduramicin se stanoví metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi a po postkolonové derivatizaci s vanilinem při 90 °C je detekován UV-detektorem při vlnové délce 522 nm.

    Opakovatelnost

    Nestanovena.

    Reprodukovatelnost

    Nestanovena.

    Mez stanovitelnosti

    Nestanovena.

  1. 2.25. Stanovení obsahu diclazurilu

    Účel, rozsah a princip

    Postup určuje podmínky pro stanovení obsahu diclazurilu v krmivech a premixech. Mez detekce je 0,1 mg/kg, mez stanovitelnosti je 0,5 mg/kg.

    Vzorek se extrahuje okyseleným methanolem. Extrakt krmiv se čistí na SPE patroně C18. Diclazuril se eluuje směsí okyseleného methanolu a vody. Po odpaření se zbytek rozpustí ve směsi dimethylformamidu a vody. Extrakt z premixů se odpaří a zbytek se rozpustí ve směsi dimethylformamidu a vody. Obsah diclazurilu se stanoví vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi s ternárním gradientem a UV detekcí.

    Opakovatelnost

    1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu diclazurilu:
    od 0,5 do 2,5 mg/kg30 % relat.
    od 2,5 do 5 mg/kg0,75 mg/kg
    nad 5 mg/kg15 % relat.

    Reprodukovatelnost

    Je uvedena u metody.

    Mez stanovitelnosti

    Mez stanovitelnosti je 0,5 mg/kg.

  1. 2.26 Stanovení obsahu carbadoxu

    Účel, rozsah a princip

    Postup určuje podmínky pro stanovení obsahu carbadoxu v krmivech, premixech a doplňkových látkách. Mez detekce je 1 mg/kg, mez stanovitelnosti je 10 mg/kg.

    Vzorek se zvlhčí vodou a extrahuje směsí methanol - acetonitril. Alikvotní podíl extraktu krmiva se po filtraci přečistí na koloně s oxidem hlinitým. Extrakt z premixů a doplňkových látek se přímo ředí na vhodnou koncentraci směsí voda - methanol - acetonitril. Obsah carbadoxu se stanoví vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi s UV detekcí.

    Opakovatelnost

    Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu carbadoxu 10 mg/kg a vyšším 15 % relat. z hodnoty vyššího výsledku.

    Reprodukovatelnost

    Je uvedena u metody.

    Mez stanovitelnosti

    Mez stanovitelnosti je 10 mg/kg.

  1. 2.27. Stanovení obsahu olachindoxu

    Účel, rozsah a princip

    Postup určuje podmínky pro stanovení obsahu olachindoxu v krmivech.

    Vzorek se extrahuje směsí voda - methanol. Obsah olachindoxu se stanoví vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi s UV detekcí.

    Opakovatelnost

    Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí při obsahu 10 až 20 mg/kg překročit 15 % relat. z hodnoty vyššího výsledku

    Reprodukovatelnost

    Je uvedena u metody.

    Mez stanovitelnosti

    Mez stanovitelnosti je 5 mg/kg.

  1. 2.28. Stanovení obsahu lasalocidu

    Účel, rozsah a princip

    Postup určuje podmínky pro stanovení obsahu sodné soli lasalocidu v krmivech a premixech. Mez detekce je 5 mg/kg a mez stanovitelnosti je 30 mg/kg.

    Lasalocid sodný se extrahuje ze vzorku okyseleným methanolem a stanoví se vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi s fluorescenční detekcí.

    Opakovatelnost

    1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu lasalocidu:
    od 30 do 100 mg/kg15 % relat.
    od 100 do 200 mg/kg15 mg/kg
    nad 200 mg/kg7,5 % relat.

    Reprodukovatelnost

    Je uvedena u metody.

    Mez stanovitelnosti

    Mez stanovitelnosti je 30 mg/kg.

  1. 3. Chemoterapeutika
    1. 3.1. Stanovení obsahu dimetridazolu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu dimetridazolu v krmivech a premixech.

      Obsah dimetridazolu se stanoví po extrakci vzorku 90 % methanolem. Následně se přečistí na pevné fázi a stanoví metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s UV detekcí při 309 nm.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu dimetridazolu:
        od 3 do 30 mg/kg15 % relat.
        od 30 do 100 mg/kg5 mg/kg
        nad 100 mg/kg5 % relat.

      Uvedené hodnoty opakovatelnosti se nevztahují pro určení pracovní přesnosti míchacího zařízení podle přílohy č. 16.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu dimetridazolu:
        od 3 do 25 mg/kg20 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg5 mg/kg
        nad 50 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 3 mg/kg.

    1. 3.2. Stanovení obsahu dimetridazolu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu dimetridazolu v krmivech.

      Obsah dimetridazolu se stanoví po extrakci vzorku methanolem a přečištění na alumině spektrofotometricky.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu dimetridazolu:
        do 4 mg/kg50 % relat.
        od 4 do 10 mg/kg2 mg/kg
        od 10 do 25 mg/kg20 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg5 mg/kg
        od 50 do 5 000 mg/kg10 % relat.
        od 5 000 do 10 000 mg/kg500 mg/kg
        nad 10 000 mg/kg5 % relat.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

  1. 4. vitaminy
    1. 4.1. Stanovení obsahu vitaminu A a vitaminu E

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu A a vitaminu E v krmivech a premixech.

      Obsah vitaminu A a E se stanoví po alkalické hydrolýze hydroxidem draselným a následné extrakci na pevné fázi po převedení do cyklohexanu metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na normální fázi s UV detekcí při 325 nm nebo fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 325 nm, emisní vlnová délka 480 nm) pro vitamin A a UV detekce při 292 nm nebo fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 292 nm, emisní vlnová délka 330 nm) pro vitamin E.

      1. Výsledky se vyjadřují pro obsah vitaminu A:
        do 999 m.j./kgs přesností na 1 m.j./kg
        od 1 000 do 9 999 m.j./kgs přesností na 10 m.j./kg
        od 10 000 do 99 999 m.j./kgs přesností na 100 m.j./kg
        od 100 000 do 999 999 m.j./ks přesností na 1 000 m.j./kg
        nad 1 000 000 m.j./kgs přesností na 10 000 m.j./kg

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu vitaminu A (UV detekce):
        od 1 000 do 50 000 m.j./kg20 % relat.
        od 50 000 do 100 000 m.j./kg10 000 m.j./kg
        nad 100 000 m.j./kg10 % relat.
      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 50 mg/kg20 % relat.
        od 50 do 100 mg/kg10 mg/kg
        nad 100 mg/kg10 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu vitaminu A (UV detekce):
        od 1 000 do 4 000 m.j./kg1000 m.j./kg
        od 4 000 do 100 000 m.j./kg25 % relat.
        od 100 000 do 125 000 m.j./kg25 000 m.j./kg
        od 125 000 do 375 000 m.j./kg20 % relat.
        od 375 000 do 600 000 m.j./kg75 000 m.j./kg
        od 600 000 do 800 000 m.j./kg12,5 % relat.
        od 800 000 do 1 000 000 m.j./kg100 000 m.j./kg
        nad 1 000 000 m.j./kg10 % relat.
      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 25 mg/kg 40 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
        od 50 do 150 mg/kg20 % relat.
        od 150 do 200 mg/kg30 mg/kg
        od 200 do 500 mg/kg15% relat.
        od 500 do 750 mg/kg75 mg/kg
        nad 750 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti pro vitamin A je 250 m.j./kg pro fluorescenční detekci, pro UV detekci 1000 m.j./kg. Mez stanovitelnosti pro vitamin E je 0,1 mg/kg pro fluorescenční detekci, pro UV detekci 0,8 mg/kg.

    1. 4.2. Stanovení obsahu vitaminu A a vitaminu E

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu A a vitaminu E v krmivech a premixech.

      Obsah vitaminu A a E se stanoví po alkalické hydrolýze hydroxidem draselným a následné extrakci hexanem a převedením do methanolu metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s UV detekcí při 325 nm nebo fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 325 nm, emisní vlnová délka 480 nm) pro vitamin A a UV detekce při 292 nm nebo fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 292 nm, emisní vlnová délka 330 nm) pro vitamin E.

      1. Výsledky se vyjadřují pro obsah vitaminu A:
        do 999 m.j./kgs přesností na 1 m.j./kg
        od 1 000 do 9 999 m.j./kgs přesností na 10 m.j./kg
        od 10 000 do 99 999 m.j./kgs přesností na 100 m.j./kg
        od 100 000 do 999 999 m.j./ks přesností na 1 000 m.j./kg
        nad 1 000 000 m.j./kgs přesností na 10 000 m.j./kg

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu vitaminu A (UV detekce):
        od 1 000 do 8 000 m.j./kg25 % relat.
        od 8 000 do 13 500 m.j./kg2 000 m.j./kg
        od 13 500 do 40 000 m.j./kg15 % relat.
        od 40 000 do 300 000 m.j./kg37 500 m.j./kg
        od 300 000 do 1 600 000 m.j./kg12,5 % relat.
        od 1 600 000 do 2 600 000 m.j./kg200 000 m.j./kg
        od 2 600 000 do 4 000 000 m.j./kg7,5 % relat.
      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 55 mg/kg 10 % relat.
        od 55 do 100 mg/kg5,5 mg/kg
        od 100 do 250 mg/kg5,5 % relat.
        od 500 do 1 000 mg/kg45 mg/kg
        od 1 000 do 5 000 mg/kg4,5 % relat.
        od 5 000 do 7 500 mg/kg225 mg/kg
        více než 7 500 mg/kg3 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu vitaminu A (UV detekce):
        od 1 000 do 100 000 m.j./kg25 % relat.
        od 100 000 do 125 000 m.j./kg25 000 m.j./kg
        od 125 000 do 375 000 m.j./kg20 % relat.
        od 375 000 do 600 000 m.j./kg75 000 m.j./kg
        od 600 000 do 800 000 m.j./kg12,5 % relat.
        od 800 000 do 1 000 000 m.j./kg100 000 m.j./kg
        nad 1 000 000 m.j./kg10 % relat.
      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 25 mg/kg40 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
        od 50 do 150 mg/kg20 % relat.
        od 150 do 200 mg/kg30 mg/kg
        od 200 do 500 mg/kg15 % relat.
        od 500 do 750 mg/kg75 mg/kg
        nad 750 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti pro vitamin A je 250 m.j./kg pro fluorescenční detekci, pro UV detekci 1000 m.j./kg. Mez stanovitelnosti pro vitamin E je 0,1 mg/kg pro fluorescenční detekci, pro UV detekci 0,8 mg/kg.

    1. 4.3. Stanovení obsahu vitaminu E

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu E v krmivech a premixech.

      Obsah vitaminu E se stanoví po alkalické hydrolýze hydroxidem draselným a následné extrakci na pevné fázi po převedení do cyklohexanu metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na normální fázi s UV detekcí při 292 nm nebo fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 295 nm, emisní vlnová délka 330 nm).

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 50 mg/kg20 % relat.
        od 50 do 100 mg/kg10 mg/kg
        nad 100 mg/kg10 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 25 mg/kg40 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
        od 50 do 150 mg/kg20 % relat.
        od 150 do 200 mg/kg30 mg/kg
        od 200 do 500 mg/kg15 % relat.
        od 500 do 750 mg/kg75 mg/kg
        nad 750 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je pro UV detekci 0,8 mg/kg, pro fluorescenční detekci 0,1 mg/kg.

    1. 4.4. Stanovení obsahu přidaného vitaminu E

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu E v premixech a v krmných směsích.

      Obsah přidaného vitaminu E (octan tokoferolu) se stanoví plynovou chromatografií po extrakci vzorku diethyletherem resp. hexanem přímo, resp. po přečištění na sloupci oxidu hlinitého.

      Opakovatelnost

      Pro premixy: Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí při obsahu vitaminu E 1 500 000 mg/kg překročit hodnotu 88 000 mg/kg.

      Pro krmné směsi: Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí při obsahu vitaminu E 20 mg/kg překročit hodnotu 2,15 mg/kg.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 4.5. Stanovení obsahu vitaminu E

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu E v krmivech a premixech.

      Obsah vitaminu E se stanoví po alkalické hydrolýze hydroxidem draselným a následné extrakci hexanem a převedením do methanolu metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s UV detekcí při 292 nm nebo fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 295 nm, emisní vlnová délka 330 nm).

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 55 mg/kg10 % relat.
        od 55 do 100 mg/kg5,5 mg/kg
        od 100 do 250 mg/kg5,5 % relat.
        od 500 do 1 000 mg/kg45 mg/kg
        od 1 000 do 5 000 mg/kg4,5 % relat.
        od 5 000 do 7 500 mg/kg225 mg/kg
        více než 7 500 mg/kg3 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 25 mg/kg40 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
        od 50 do 150 mg/kg20 % relat.
        od 150 do 200 mg/kg30 mg/kg
        od 200 do 500 mg/kg15 % relat.
        od 500 do 750 mg/kg75 mg/kg
        nad 750 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je pro UV detekci 0,8 mg/kg, pro fluorescenční detekci 0,1 mg/kg.

    1. 4.6. Stanovení obsahu cholinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu cholinu v krmivech a premixech.

      Obsah cholinu se stanoví po hydrolýze vzorku hydroxidem barnatým a přečištění hydrolyzátu na ionexu na základě vzniku komplexu s reineckátem amonným v prostředí roztoku fosforečnanu sodného spektrofotometricky po rozpuštění komplexu v acetonu při vlnové délce 525 nm.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 20 mg/kg.

    1. 4.7. Stanovení obsahu pantothenanu vápenatého

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu pantothenanu vápenatého v premixech.

      Obsah pantothenanu vápenatého se stanoví na základě stimulačního účinku na růst testovacího mikroorganismu Saccharomyces carlsbergensis CCM 4288 (ATCC 9080) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 4.8. Stanovení vitaminů B1, B2, B6

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminů B1, B2, B6 v krmných směsích.

      Vitaminy B1 (thiamin), B2 (riboflavin) a B6 (pyridoxin) se extrahují ze vzorku krmiva vodou a po hydrolýze kyselinou chloristou se stanoví postupem vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) s využitím iontových párů na reverzní fázi. Detekce vitaminu B2, a B6 se provádí přímo fluorescenční detekcí, zatímco vitamin B1 se před detekcí nejprve oxiduje derivatizačním činidlem v reakční smyčce postkolonové derivatizace.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 4.9. Stanovení obsahu vitaminu B2

      Účel, rozsah a princip

      Používají se dva postupy stanovení obsahu vitaminu B2 v premixech - postup fluorometrický a postup difúzní plotnový.

      Obsah vitaminu B2 se stanoví fluorometricky v mírně okyseleném prostředí na základě fluorescence při vlnové délce 440 nm nebo difúzním plotnovým postupem na základě stimulačního účinku na růst testovacího mikroorganismu Lactobacillus rhamnosus CCM 1825 (ATCC 7469).

      Opakovatelnost

      Pro metodu fluorometrickou nestanovena.

      Pro metodu difúzní plotnovou:

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí při obsahu vitaminu B2 500 000 mg/kg překročit hodnotu 40 500 mg/kg.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 4.10. Stanovení obsahu vitaminu B6

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu B6 v premixech.

      Vitamin B6 ve všech jeho formách se stanoví na základě stimulačního účinku na růst testovacího mikroorganismu kvasinky Saccharomyces carlsbergensis CCM 4228 (ATCC 9080) difúzním potnovým způsobem.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 4.11. Stanovení obsahu vitaminu K3

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu K3 v krmivech a premixech.

      Obsah vitaminu K3 se stanoví po extrakci vzorku chloroformem, následné hydrolýze amoniakem, metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na normální fázi s UV detekcí při 264 nm.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 2.9 mg/kg.

    1. 4.12. Stanovení obsahu vitaminu A

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu A v krmivech a premixech. Vitamin A zahrnuje all-trans retinol a jeho cis izomery, které se touto metodou stanoví. Obsah vitaminu A se vyjadřuje v mezinárodních jednotkách (IU) na kg. Mezinárodní jednotka odpovídá aktivitě 0,3 μg all-trans vitaminu A (alkohol) nebo 0,344 μg all-trans vitamin A (acetát) nebo 0,550 μg all-trans vitaminu A (palmitát). Mez stanovitelnosti je 2 000 IU vitaminu A/kg

      Vzorek se hydrolyzuje ethanolickým roztokem hydroxidu draselného a vitamin A se extrahuje petroletherem. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí v methanolu a pokud je to nutné, naředí se na vhodnou koncentraci. Obsah vitaminu A se stanoví metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie na reverzní fázi (RP-HPLC) s UV nebo fluorescenční detekcí. Chromatografické parametry jsou vybrány tak, aby nedocházelo k separaci all-trans vitaminu A (alkohol) a jeho cis izomerů.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 15% relat. z hodnoty vyššího výsledku.

      Reprodukovatelnost

      Je uvedena u metody.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 2000 m.j./kg

    1. 4.13. Stanovení obsahu vitaminu E

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu E v krmivech a premixech. Obsah vitaminu E se vyjadřuje jako mg DL-α-tokoferol acetátu na kg. 1 mg DL-α-tokoferol acetátu odpovídá 0,91 mg DL-α-tokoferolu (vitamin E). Mez stanovitelnosti je 2 mg vitaminu E/kg

      Vzorek se hydrolyzuje ethanolickým roztokem hydroxidu draselného a vitamin E se extrahuje petroletherem. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí v methanolu a pokud je to nutné, naředí se na vhodnou koncentraci. Obsah vitaminu E se stanoví metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie na reverzní fázi (RP-HPLC) s UV nebo fluorescenční detekcí.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 15% relat. z vyššího výsledku.

      Reprodukovatelnost

      Je uvedena u metody.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 2 mg/kg.

  1. 5. Mikroprvky
    1. 5.1. Stanovení obsahu mědi, železa, manganu a zinku

      Postup stanovení obsahu mědi, železa, manganu a zinku je uveden v příloze č. 9, část 8.

    1. 5.2. Stanovení obsahu kobaltu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu kobaltu v krmivech.

      Stanovení je založeno na principu tvorby barevného komplexu kobaltu s 2-nitroso-1-naftolem, jehož absorbance se měří spektrofotometricky.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu kobaltu:
      do 5 mg/kg50 % relat.
      od 5 do 10 mg/kg2,5 mg/kg
      od 10 do 30 mg/kg25 % relat.
      od 30 do 50 mg/kg7,5 mg/kg
      nad 50 mg/kg15% relat.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 5.3. Stanovení obsahu selenu.

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení selenu v krmivech.

      Ve vzorku se po rozkladu kyselinou dusičnou v uzavřeném systému stanoví obsah selenu metodou atomové absorpční spektrometrie (AAS) s hydridovou technikou.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 5 % relat..

      Reprodukovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit 10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 5.4. Stanovení obsahu jodu

      Účel, rozsah a princip

      Používají se dva zkušební postupy. Po mineralizaci vzorku za přídavku hydroxidu sodného jako fixativa při 520 °C se jodidy oxidují v alkalickém prostředí bromnanem a vzniklé jodičnany se stanovují metodou diferenční pulzní rozpouštěcí voltametrie. Postup je vhodný pro stanovení jodu v krmivech a premixech.

      Pro stanovení jodu v premixech se vzorek mineralizuje po přídavku hydroxidu sodného jako fixativa při 520 °C a jodidy se zoxidují manganistanem draselným na jodičnany. Po přidání jodidu draselného se uvolní jod, který se stanoví titrací thiosíranem sodným.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními voltametrickými stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu jodu:
        od 0,5 do 5 mg/kg30 % relat.
        od 5 do 15 mg/kg1,5 mg/kg
        nad 15 mg/kg10 % relat.

      Opakovatelnost pro titrační metodu nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti pro voltametrickou metodu je 0,5 mg/kg. Pro titrační metodu mez stanovitelnosti nestanovena.

  1. 6. Vehikula a pojiva
    1. 6.1. Stanovení obsahu oxidu křemičitého

      Postup stanovení obsahu oxidu křemičitého je uveden v příloze č. 9, část 7.

    1. 6.2. Stanovení obsahu oxidu hlinitého

      Postup stanovení obsahu oxidu hlinitého je uveden v příloze č. 9, část 7.

  1. 7. Výpočty
    1. 7.1. Vyhodnocování a výpočet výsledků stanovení obsahu doplňkových látek pro difúzní plotnové postupy

      Účel, rozsah a princip

      Postup uvádí a specifikuje uzančně závazný způsob pro vyhodnocování a výpočet výsledků při stanovení obsahu doplňkových látek v krmivech a premixech pro difúzní plotnové postupy.

      Průměry inhibičních resp. stimulačních zón, vzniklých při stanovení doplňkových látek difusním plotnovým postupem, se měří pomocí odpichovátka s přesností nejméně na 0,1 mm. Ze souboru takto získaných hodnot se vypočítá aritmetický průměr pro každou koncentraci zkoušeného vzorku i standardu.

  1. 8. Antioxidanty
    1. 8.1. Stanovení obsahu ethoxyquinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení ethoxyquinu v krmivech.

      Ethoxyquin je ze vzorku extrahován methanolem a alikvotní podíl extraktu je po zředění vodou reextrahován do petroletheru a obsah ethoxyquinu je stanoven fluorometricky.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 8.2. Stanovení obsahu butylhydroxytoluenu, butylhydroxyanisolu a galátů
      Účel, rozsah a princip
      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu butylhydroxytoluenu, butylhydroxyanisolu a galátů v tucích.
      Vzorek se rozpustí v hexanu a butylhydroxytoluen, butylhydroxyanisol a galáty se extrahují acetonitrilem. Vlastní stanovení se provádí postupem vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) s použitím UV detekce při 280 nm.
      Opakovatelnost
      Nestanovena.
      Reprodukovatelnost
      Nestanovena.
      Mez stanovitelnosti
      Nestanovena.
  1. 9. Barviva
    1. 9.1. Stanovení obsahu kapsatinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení celkového obsahu barviva vyjádřeného jako kapsatin, převažujícího barviva papriky.

      Obsah kapsatinu se stanoví po extrakci vzorku benzenem způsobem podle Benedikta spektrofotometricky.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 9.2. Stanovení obsahu nativních a přidaných karotenoidů

      Účel, rozsah a princip

      Používají se dva postupy. Jeden specifikuje podmínky pro stanovení obsahů esterů kyseliny apo-karotinové, citranaxantinu a kantaxantinu, druhý specifikuje podmínky pro stanovení obsahu karoténů, veškerých xantofylů, luteinu a zeaxantinu.

      Vzorek se extrahuje rozpouštědlem, přečistí se postupem sloupcové chromatografie a obsah příslušného barviva se stanoví spektrofotometricky.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 15 % relat.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

  1. 10. Konzervanty
    1. 10.1. Stanovení obsahu kyseliny mravenčí

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu kyseliny mravenčí v silážích.

      Kyselina mravenčí se stanovuje postupem podle Fuchse. Těkavé kyseliny, vydestilované ze vzorku se podrobí reakci s manganistanem draselným. Kyselina mravenčí je jako jediná oxidována v neutrálním nebo slabě alkalickém prostředí.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 10.2. Stanovení obsahu kysličníku siřičitého

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu kysličníku siřičitého v krmivech.

      Kysličník siřičitý se uvolní po okyselení vzorku krmiva proudem dusíku a jímá se do roztoku elektrolytu. Obsah kysličníku siřičitého se stanoví metodou diferenční pulzní polarografie.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 10.3. Stanovení obsahu formaldehydu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu formaldehydu v krmivech.

      Ze vzorku se po okyselení kyselinou fosforečnou izoluje formaldehyd destilací s vodní parou a formaldehyd se v destilátu stanoví po reakci s kyselinou chromotropovou fotometricky při 570 nm.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

  1. 11. Zchutňovadla
    1. 11.1. Stanovení obsahu sacharinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu sacharinu v krmivech.

      Sacharin se extrahuje z vodného roztoku krmiva chloroformem a jeho obsah se stanoví metodou diferenční pulzní polarografie.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

  1. 12. Mikrobiotika
    1. 12.1. Stanovení počtu zárodků bakterií kmene Streptococcus

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení počtu zárodků kmene Streptococcus skupiny D v krmivech a premixech.

      Stanovení počtu zárodků bakterií kmene Streptococcus se provádí na selektivních půdách podle Slanetze a Bartleye. Jako referenční půda se při stanovení používá další selektivní půda (např. KF agar) nebo u premixů vhodná neselektivní půda. Naočkované půdy jsou kultivovány při 37 °C ± 1 °C. Růst a počty kolonií se vyhodnocují po dvou a čtyřdenní kultivaci.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

    1. 12.2. Stanovení počtu zárodků bakterií kmene Bacillus

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení počtu zárodků kmene Bacillus v krmivech.

      Stanovení počtu zárodků bakterií kmene Bacillus se provádí anaerobní kultivací na krevním agaru při 37 °C. Počty kolonií, charakteristické pro dané mikroorganismy, se vyhodnocují po 18 - 24 hodinách.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

Příloha č. 11

k vyhlášce č. 124/2001 Sb.

Laboratorní zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů

Seznam postupů fyzikálního zkoušení krmiv

Příloha č. 11 Laboratorní zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů Seznam postupů fyzikálního zkoušení krmiv
Název postupuOznačení postupu
1. Stanovení odrolu lisovaných krmivA
2. Stanovení zrnitostiA
3. Stanovení ferromagnetických příměsíA
  1. 1. Stanovení odrolu lisovaných krmiv

    Účel, rozsah a princip

    Postup specifikuje podmínky pro stanovení odrolu u granulovaných krmiv. Postup je použitelný pro všechny druhy krmiv a premixů. Odrol se stanoví vážkově jako sypký podíl po oddělení granulí na předepsaném sítu.

  1. 2. Stanovení zrnitosti

    Účel, rozsah a princip

    Postup specifikuje podmínky pro stanovení zrnitosti sypkých krmiv. Postup je použitelný pro všechny druhy krmiv a premixů. Zrnitost se stanoví vážkově jako hmotnostní podíly částic různých velikostí prosévací zkouškou konečného vzorku na předepsaných sítech.

  1. 3. Stanovení ferromagnetických příměsí

    Účel, rozsah a princip

    Postup specifikuje podmínky pro stanovení ferromagnetických příměsí. Postup je použitelný pro všechny druhy krmiv a premixů. Ferromagnetické příměsi se stanoví vážkově na základě svých magnetických vlastností po separaci ze vzorku krmiva magnetem.

Příloha č. 12

k vyhlášce č. 124/2001 Sb.

Laboratorní zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů

Seznam postupů smyslového zkoušení krmiv

Příloha č. 12 Laboratorní zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů Seznam postupů smyslového zkoušení krmiv
Název postupu ;Označení postupu
1. Posuzování barvy, struktury a konzistenceA
2. Posuzování pachuA
  1. 1. Posuzování barvy, struktury a konzistence

    Princip

    Posuzují se a stanoví odchylky od barvy typické pro dané krmivo, u struktury a konzistence kvalita opracování krmných surovin, případné porušení původního stavu krmiva, u lisovaných krmiv velikost granulí.

  1. 2. Posuzování pachu

    Princip

    Posuzuje se druh a intenzita pachu v původním stavu a po zahřátí a odchylky od pachu, který je pro dané krmivo typický.

Příloha č. 13

k vyhlášce č. 124/2001 Sb.

Laboratorní zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů

Seznam postupů speciálního zkoušení krmiv

Příloha č. 13 Laboratorní zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů Seznam postupů speciálního zkoušení krmiv
Název postupuOznačení postupu
1. Mikroskopie krmivA
2. Stanovení škůdců v obilovinách, luštěninách a olejnináchA
3. Stanovení škůdců v krmných směsíchA
4. Stanovení snětivosti pšeniceA
5. Stanovení druhové čistoty, nečistot a škodlivých nečistot u obilovin, luštěnin a olejninA
6. Mikroskopická identifikace a určování složek živočišného původu
  1. 1. Mikroskopie krmiv

    Slouží k identifikaci jednotlivých druhů krmiv a k určení přítomnosti semen a plodů, uvedených jako nežádoucí látky ve vyhlášce Ministerstva zemědělství č.194/1996 Sb., ve znění pozdějších předpisů, kterou se provádí zákon o krmivech. Buněčné struktury se posuzují mikroskopicky porovnáním s preparáty připravenými z jednotlivých druhů krmiv, zbavených všech cizích příměsí.

  1. 2. Stanovení škůdců v obilovinách, luštěninách a olejninách

    Princip

    Živí škůdci se zjišťují po prosátí vzorku v propadu, popř. v podílu na sítě buď pouhým okem, popř. pomocí lupy nebo stereoskopickým mikroskopem. Seznam škůdců je uveden v příloze č.2 vyhlášky Ministerstva zemědělství č. 194/1996 Sb., ve znění pozdějších předpisů, kterou se provádí zákon o krmivech.

  1. 3. Stanovení škůdců v krmných směsích

    Princip

    Živí škůdci se zjišťují po prosátí vzorku v propadu, popř. v podílu na sítě buď pouhým okem, popř. pomocí lupy nebo stereoskopickým mikroskopem. Seznam škůdců je uveden v příloze č. 2 vyhlášky Ministerstva zemědělství č. 194/1996 Sb., ve znění pozdějších předpisů, kterou se provádí zákon o krmivech.

  1. 4. Stanovení snětivosti pšenice

    Princip

    Za snětivou se považuje pšenice, která obsahuje zrna napadená snětí, snětivé kuličky, případně vykazuje pach po sněti. Konečný vzorek se vysype na světlou podložku a smyslově se posuzuje zamazání zrn sporami sněti, výskyt snětivých kuliček a pachu po sněti. Jestliže vzorek vykazuje kterýkoliv z uvedených znaků, označí se pšenice za snětivou.

  1. 5. Stanovení druhové čistoty, nečistot a škodlivých nečistot u obilovin, luštěnin a olejnin

    Princip

    Mechanicky nebo ručně se z poměrné části konečného vzorku oddělí nečistoty a škodlivé nečistoty se vyjadřují jako % podíl.

  1. 6. Mikroskopická identifikace a určování složek živočišného původu

    Princip

    Representativní a vhodně upravený vzorek se použije pro identifikaci. Komponenty živočišného původu jsou identifikovány na základě typických, mikroskopicky rozlišitelných charakteristik (např. svalová vlákna a jiné masité části, chrupavky, kosti, rohy, chlupy, štětiny, krev, peří, vaječné skořápky, rybí kosti, šupiny). Identifikace musí být provedena v prosívaných frakcích i v koncentrovaném sedimentu.

Příloha č. 14

k vyhlášce č. 124/2001 Sb.

Zkoušení homogenity

  1. 1. Homogenita premixů a krmiv s použitím premixů

    Zkoušení homogenity se uskutečňuje pomocí doplňkové látky nebo přidané aminokyseliny, dávkované do premixu nebo do krmiv s použitím premixu. Tato doplňková látka nebo aminokyselina musí být stanovitelná metodami zkoušení, které jsou uvedené v přílohách č. 7 až 10. Homogenita se zkouší v rámci jedné partie.

  1. 2. Zkoušení homogenity partie

    Pro test homogenity partie se vybere nj, obalů nebo u volně ložených krmiv nj hypotetických částí partie a z každé z nich se odebere jediný dílčí vzorek, který se samostatně upraví a tím se získá nj, zkušebních vzorků. Z výsledků zkoušek x1, x2, x3....xnj se stanoví analýza s2.

  1. 3. Stanovení celkového rozptylu
    1. Pro stanovení celkového rozptylu použijeme výraz:
      2. kde:
        1. k je celkový počet odebraných dílčích vzorků (počet úrovní)
        2. je průměr uvnitř úrovně
        3. je průměr ze všech analytických stanovení (celkový průměr), uvedených ve sloupci 3 protokolu o zkouškách
  1. 4. Stanovení rozptylu metody
    1. Pro stanovení rozptylu zkušební metody použijeme výraz:
      2. kde:
        1. n je počet paralelních opakování pro ověření metody (ověřovací série)
        2. xi je i-té stanovení na vzorku, který je použit k ověření metody (ověřovací série),
        3. je průměr stanovení u vzorku, který je použit k ověření metody (ověřovací série), uvedených ve sloupci 7 protokolu o zkouškách
  1. 5. Partie krmiva nebo premixu se považuje za homogenní pouze tehdy, když platí:
  1. 6. Počet vzorkovaných obalů nebo hypotetických částí je následující:
    Příloha č. 14 Zkoušení homogenity
    Počet obalů v partiiVzorkovaná hmotnost volně
    ložené partie - t    		Počet vzorkovaných obalů -
    částí (díl. vzorků)
    do 25do 1,505
    26 – 50od 1,51 – 2506
    51 – 100od 2,51 – 5,007
    101 – 200od 5,01 – 10,009
    201 – 300od 10,01 – 15,0011
    301 – 500od 15,01 – 25,0013
    501 – 800od 25,01 – 40,0016
    801 – 1 300od 40,01 – 65,0020

Příloha č. 15

k vyhlášce č. 124/2001 Sb.

Obecné podmínky pro použití zkušební metody

  1. 1. Pracovní postup
    1. Pracovní postup obsahuje dostatečně přesné a podrobné instrukce k provádění zkušební metody:
      1. 1.1. princip postupu, chemické reakce a případné interakce stanovovaného znaku, popis matrice a rozmezí stanovovaného znaku
      2. 1.2. použité chemikálie včetně chemické čistoty, příprava roztoků s uvedením koncentrace a stability
      3. 1.3 podrobný postup zkoušky, údaje o kalibraci, měření, výpočet
  1. 2. Shodnost metody

    Shodnost metody označuje těsnost shody mezi nezávislými výsledky zkoušek získanými za předem specifikovaných podmínek. Míra shodnosti se počítá jako směrodatná odchylka výsledků zkoušek sx.

    Odhad hodnoty sx se počítá pomocí rozpětí R, které je definováno jako rozdíl mezi nejmenší a největší hodnotou paralelního stanovení.

    1. Provádí-li se dvě paralelní stanovení na m vzorcích, je směrodatná odchylka vyjádřena
      2. kde Rj = | xj1 - x j2 | je rozpětí, tj. rozdíl dvo u paralelních stanovení, provedených na j-tém vzorku. Z vypočtené směrodatné odchylky sx se vypočte ukazatel opakovatelnosti (r) analytické metody v dané analytické laboratoři. Pro opakovatelnost /r/ platí (při dvou paralelních opakování a hladinu významnosti P (0,95)): r = 2,8.sx. Směrodatná odchylka sx resp. opakovatelnost se určuje z dostatečně velkého počtu vzorků téhož druhu materiálu (p ≥ 20). Směrodatná odchylka sx se neurčuje z jedné ověřovací série, ale z dlouhodobého měření v dané laboratoři na vzorcích téhož druhu materiálu.
  1. 3. Správnost metody

    Správnost metody určuje těsnost shody mezi průměrnou hodnotou získanou z velké řady výsledků zkoušek a přijatou referenční hodnotou. Referenční hodnota se odvodí jako

    1. a) teoretická nebo stanovená hodnota založená na vědeckých podkladech
    2. b) přiřazená nebo certifikovaná hodnota založená na experimentálních pracích národních nebo mezinárodních organizací
    3. c) odsouhlasená nebo certifikovaná hodnota založená na spolupráci pod patronací vědeckých nebo technických skupin
    4. d) jestliže není k dispozici očekávaná hodnota veličiny uvedená v bodech a) až c), uvede se střední hodnota specifikovaného souboru měření (medián, průměr).
  1. 4. Linearita metody

    Linearitou metody se označuje přímková závislost mezi odezvou detekce a koncentrací analytu. Linearita se ověřuje metodami matematické statistiky. V případě zkušebních metod nevykazujících lineární závislost mezi odezvou detekce a koncentrací analytu, postupuje se metodami matematické statistiky, které nejsou založeny na předpokladu většinou normálního rozdělení a nepoužívají odhadu žádných parametrů.

  1. 5. Citlivost metody

    Citlivost metody určuje nejmenší rozdíl koncentrace stanovovaného znaku, jež odpovídá nejmenšímu zjistitelnému rozdílu, jenž může být zjištěn vhodnou odezvou signálu metody.

  1. 6. Mez stanovitelnosti metody

    Mezí stanovitelnosti metody se rozumí nejnižší koncentrace stanovovaného znaku, kdy je dosažena statisticky přijatelná správnost a přesnost. Většinou se jako mez stanovitelnosti bere první bod kalibrační křivky.

  1. 7. Selektivita metody

    Selektivita metody udává přehled o použitelnosti zkušební metody vzhledem ke koncentraci rušivých prvků. Zpravidla se udává, jaká koncentrace určitého znaku v matrici vzorku nemá statisticky významný vliv na správnost výsledků.

  1. 8. Výpočet opakovatelnosti a reprodukovatelnosti

    Opakovatelnost vyjadřuje shodnost za podmínek opakovatelnosti a reprodukovatelnost shodnost za podmínek reprodukovatelnosti. Pro mez opakovatelnosti (r) a reprodukovatelnosti (R) platí

    1. r = 2,8 × sr resp. r = 2,8.sx (viz čl. 2 přílohy 15); R = 2,8 × s R, kde odhad rozptylu reprodukovatelnosti s R2 je dán součtem odhadu rozptylu opakovatelnosti sr2 a mezilaboratorního rozptylu s L2 a platí:
    2. s R2 = s r2 + s L2
    1. Hodnoty s r2 a s L2 se určí podle následujících rovnic:
      3. kde
        4. kde ni je počet výsledků a yi, je jeden takovýto výsledek, p je počet laboratoří, které poskytly alespoň jeden výsledek.
    1. Ve speciálním případě, kdy pro všechna ni platí ni=n=2, se použije rozpětí wi=2si, čímž se získají vztahy:

Příloha č. 16

k vyhlášce č. 124/2001 Sb.

Způsob posouzení pracovní přesnosti míchacího zařízení

  1. 1. Zkoušení pracovní přesnosti se uskutečňuje u všech míchacích zařízení, která slouží pro finální výrobu premixů a krmiv s použitím premixů.
  2. 2. Ke zkoušení se používá výhradně jako indikační doplňková látka dimetridazol nebo lasalocid, u které je před zkouškou ověřen obsah účinné látky a látka je upravena tak, aby veškeré částice propadaly drátěným sítem o velikosti strany oka 0,5 mm. Pro zkoušku pracovní přesnosti 1 : 10 000 se odvažuje 100 g jako 100 % látky na 1 tunu míchaného substrátu, k ověření pracovní přesnosti 1 : 100 000 se odvažuje 10 g jako 100 % látky. Před použitím látky je přípustné její předmíchání do 1 kg použitého nosiče.
  3. 3. Ke zkoušce se používá jako nosič pro míchací zařízení sloužící k výrobě premixů s minerálním nosičem nebo pro výrobu doplňkových minerálních krmiv, krmný vápenec jemně nebo velmi jemně mletý. V ostatních případech se používá ke zkoušce jako nosič pšeničná mouka krmná. Velikost částic míchaného substrátu má být menší jak než 1 mm.
  4. 4. Míchací zařízení, u kterého se uskutečňuje zkouška, nesmí propouštět míchaný substrát, míchací element musí být úplný, nepoškozený, zbavený zbytků a zcela vyprázdněný. Pokud se jedná o typové míchací zařízení, porovná se technické provedení míchacího zařízení s technickými podmínkami jeho výrobce a o porovnání se vyhotovuje protokol o shodě.
  5. 5. Protokol o shodě obsahuje tyto náležitosti:
    1. a) o jaké zařízení se jedná a kdo je jeho výrobcem,
    2. b) typ míchacího zařízení,
    3. c) výrobní číslo (pokud je uvedeno),
    4. d) rok výroby,
    5. e) provozovatel (pokud se nejedná o zkoušky u výrobce zařízení),
    6. f) posouzení shody výrobku s technickými podmínkami:
      1. - technické parametry (pohon, pracovní část - míchací element, vyprazdňovací zařízení)
      2. - funkční parametry (opotřebení mechanických částí, změny tvaru dílů, těsnost stroje po naplnění),
      3. - souhrnné vyjádření a případná doporučení,
      4. - kdo provedl posouzení shody (popis, případně razítko),
      5. - za provozovatele (výrobce) podpis, případně razítko,
      6. - datum vyhotovení protokolu.
  1. 6. Vlastní postup zkoušky

    Míchací zařízení se naplní míchaným nosičem (pšeničnou moukou krmnou, krmným vápencem), který se odváží s přesností ± 1 % z celkové jeho navážky. Odvažuje se takové množství, aby zaplnilo nejméně dvě třetiny objemu míchacího prostoru, který je udán výrobcem. Po kontrole těsnosti míchacího zařízení, která se uskutečňuje za jeho chodu, se za klidu míchacího elementu vpraví na povrch nosiče odvážené množství (s přesností 0,01 g) indikační doplňkové látky a míchací zařízení se uvede do chodu na dobu stanovenou výrobcem v technických podmínkách (pokud není stanovena na dobu udanou provozovatelem). Po ukončení stanovené doby se přikročí k odběru vzorků.

  1. 7. Odběr vzorků se uskutečňuje podle technického provedení míchacího zařízení buď za jeho klidu přímo z míchacího prostoru, nebo při jeho vyprazdňování za chodu míchacího zařízení. Odběr dílčích vzorků se uskutečňuje pomocí dvouplášťového vertikálního vzorkovače nebo pomocí vzorkovací krabice pro odběr vzorků z celého průřezu toku materiálu. Pokud nelze použít k odběru vzorků při vyprazdňování žádnou z uvedených vzorkovacích pomůcek, lze výjimečně použít vhodnou vzorkovací lopatku. Za dílčí vzorek se považuje jeden vpich vzorkovače nebo jeden náběr vzorkovací krabicí. Takto odebrané dílčí vzorky se neupravují a přímo vkládají do obalů.
  2. 8. Úprava a zkoušení vzorků

    Úpravu vzorků pro zkoušení stanovuje příloha č. 7, bod 1.7. Pro zkoušení se používají výhradně postupy uvedené v příloze č. 10, a to pro lasalocid pod bodem 2.23 a pro dimetridazol pod bodem 3.1.

    1. Pro doplňkové látky dimetridazol a lasalocid, které jsou ustanoveny k ověření přesnosti míchacích zařízení, platí následující hodnoty opakovatelnosti:
      Příloha č. 16 Způsob posouzení pracovní přesnosti míchacího zařízení
      Doplňková látkaObsah mg/kgOpakovatelnost
      Lasalocidod 0,5 do 1510 % relat.
      od 50 do 1505 % relat.
      Dimetridazolod 5 do 1510 % relat.
      od 50 do 1805 mg

    Z každého upraveného dílčího vzorku vždy po samostatné úpravě mícháním se oddělí dva zkušební vzorky pro 2 paralelní stanovení indikační doplňkové látky a u jednoho náhodně vybraného dílčího vzorku se oddělí čtyři zkušební vzorky pro 4 paralelní stanovení. Provedené paralelní stanovení u každého dílčího vzorku se nesmí od sebe odchylovat o více než je stanovená opakovatelnost pro danou metodu zkoušení. Z dvou paralelních stanovení u každého dílčího vzorku se vypočítá pro každý vzorek průměrná hodnota obsahu doplňkové látky, která slouží pro stanovení celkového rozptylu.

  1. 9. Stanovení celkového rozptylu

    Pro zpracování celkového rozptylu se použije jednotlivá paralelní stanovení u dílčích vzorků, z kterých se vypočte průměrná hodnota pro každý dílčí vzorek. Do výpočtu se dosadí průměrné hodnoty (x) dílčích vzorků.

    1. Pro stanovení celkového rozptylu (s2) platí:
      2. kde: k je celkový počet odebraných dílčích vzorků (počet úrovní)
      3. je průměr uvnitř úrovně
      4. je průměr ze všech analytických stanovení (celkový průměr)
  1. 10. Stanovení rozptylu zkušební metody
    1. Pro stanovení rozptylu zkušební metody platí:
      2. kde: n je počet paralelních opakování pro ověření metody (ověřovací sérii)
      3. xi je i-té stanovení na vzorku, který je použit k ověření metody (ověřovací sérii),
      4. je průměr stanovení u vzorku, který je použit k ověření metody (ověřovací sérii),
  1. 11. Pracovní přesnost míchacího zařízení se považuje za vyhovující, pokud zkoušený substrát vykazuje homogenitu použité doplňkové látky a pro uvedené platí vztah: kdy
  1. 12. Ze zkoušení pracovní přesnosti míchacího zařízení se vystavuje protokol o zkouškách, který obsahuje:
    1. a) typ míchacího zařízení, o které se jedná a pro jakou pracovní přesnost bylo zkoušeno (§ 7 odst. 3 písmeno b) zákona č. 91/1996 Sb.),
    2. b) kdo je výrobcem míchacího zařízení,
    3. c) jaká indikační doplňková látka byla použita a v jakém obsahu na kg zkoušeného substrátu (teorie),
    4. d) vlastní výsledky jednotlivých zkoušek obsahující číslo vzorku, pod kterým byl zařazen do zkoušek, pořadové číslo paralelního stanovení, prokázaný obsah doplňkové látky v paralelním stanovení, průměrný obsah doplňkové látky v dílčím vzorku, celkový průměr ze všech paralelních stanovení použitých k výpočtu celkového rozptylu, celkový rozptyl, rozptyl metody, f-test vypočítaný, f-test tabelovaný pro úroveň 0,1,
    5. e) závěrečné hodnocení,
    6. f) datum vyhotovení protokolu,
    7. g) razítko a podpis osoby provádějící zkoušky

    Protokol o zkoušení pracovní přesnosti je přenosný na stejné typy míchacích zařízení za předpokladu, že míchací zařízení bylo posouzeno a vystaven protokol o shodě mezi typem míchacího zařízení, které již vyhovělo požadavkům pro pracovní přesnost a míchacím zařízením, které je posuzováno, zda je shodné.

  1. 13. Vzor protokolu o zkouškách.

    Protokol o zkouškách č.

    Obrázek

Příloha č. 17

k vyhlášce č. 124/2001 Sb.

Hodnoty reprodukovatelnosti pro metody zkoušení

Pokud není u metod zkoušení v přílohách č. 9 a 10 určeno jinak, používají se hodnoty reprodukovatelnosti uvedené v následující tabulce.

Příloha č. 17 Hodnoty reprodukovatelnosti pro metody zkoušení
Jakostní znakDeklarovaný obsahAnalytické rozpětí
Vlhkost (voda)do 15 %± 0,3 % abs.
nad 15 %± 2 % rel.
Dusíkaté látkydo 160 g/kg± 4 g/kg
160 - 320 g/kg± 2,5 % rel.
nad 320 g/kg± 8 g/kg
Tuk4 - 100 g/kg± 4 g/kg
100 - 200± 4 % rel.
nad 200 g/kg± 8 g/kg
Vláknina4 - 100± 4 g/kg
nad 100 g/kg± 4 %rel.
Popel2 - 40 g/kg± 10 % rel.
40 - 100 g/kg± 4 g/kg
100 - 150 g/kg± 4 % rel.
150 - 200 g/kg± 6 g/kg
nad 200 g/kg± 3 % rel.
Škrobdo 120 g/kg± 6 g/kg
120 - 200± 5 % rel.
nad 200 g/kg± 10 g/kg
Cukr5 - 250 g/kg± 5 g/kg
250 - 500± 2 % rel.
nad 500 g/kg± 10 g/kg
Fosfor1,2 - 10 g/kg± 0,6 g/kg
nad 10 g/kg± 6 % rel.
Vápník1 - 5 g/kg± 0,5 g/kg
5 - 60 g/kg± 10 % rel.
60 - 100 g/kg± 6 g/kg
nad 100 g/kg± 6 % rel.
Hořčík, draslík2 - 50 g/kg± 10 % rel
nad 50 g/kg± 5 g/kg
Sodík0,4 - 1,6 g/kg± 0,2 g/kg
1,6 - 80 g/kg± 12,5 % rel.
nad 80 g/kg± 10 g/kg
Nerozpustný podíl popele v HCl3 - 100 g/kg± 3 g/kg
nad 100 g/kg± 3 % rel.
Chloridy jako NaCldo 10 g/kg± 1 g/kg
10 - 50 g/kg± 10 % rel.
nad 50 g/kg± 5 g/kg
Močovina (krmivo)2 - 20 g/kg± 2 g/kg
20 - 100 g/kg± 10 % rel.
Močovina (surovina)100 - 200 g/kg± 10 g/kg
nad 200 g/kg± 5 % rel.
Uhličitany jako CaCO32 - 25 g/kg± 2 g/kg
25 - 100 g/kg± 8 % rel.
nad 100 g/kg± 8 g/kg
Stravitelnost dusíkatých látekbez rozdílu obsahu± 2 %rel.
Aminokyselinybez rozdílu obsahu± 10 %rel.
Mastné kyselinynad 50 g/kg± 10 %rel.
Kyselost tukunad 4 mg KOH/g tuku± 15 %rel.
Karotenoidybez rozdílu obsahu± 15 %rel.
Měď, kobalt, železo, zinek, mangan
mez stanovitelnosti nestanovena		do 5 mg/kg± 50 % rel.
5 - 10 mg/kg± 2,5 mg/kg
10 - 30 mg/kg± 25 % rel.
30 - 50 mg/kg± 7,5 mg/kg
nad 50 mg/kg± 15 %rel.
Jodbez rozdílu obsahu± 25 %rel.
Vitamin A
mez stanovitelnosti 2 000 m.j./kg		2 000 - 4 000 m.j./kg1 000 m.j./kg
4 000 - 100 000 m.j./kg25 % rel.
100 000 - 125 000 m.j./kg25 000 m.j./kg
125 000 - 375 000 m.j./kg20 % rel.
375 000 - 600 000 m.j./kg75 000 m.j./kg
600 000 - 800 000 m.j./kg12,5 % rel.
800000 - 1000000100 000 m.j./kg
nad 1 000 000 m.j./kg10 % rel.
Vitamin E
mez stanovitelnosti 25 mg/kg		25 - 50 mg/kg± 10 mg/kg
50 - 150 mg/kg± 20 % rel.
150 - 200 mg/kg± 30 mg/kg
200 - 500 mg/kg± 15 %rel.
500 - 750 mg/kg± 75 mg/kg
nad 750 mg/kg± 10 % rel.
Avilamycin, avoparcin, flavofosfolipol, monensinát sodný, salinomycinát sodný, tylosinfosfát, virginiamycin, zinkbacitracin a další antibiotika
mez stanovitelnosti 0,5 mg/kg		0,5 - 25 mg/kg± 40 % rel.
25 - 50 mg/kg± 10 mg/kg
50 - 100 mg/kg± 20 % rel.
100 - 200 mg/kg± 20 mg/kg
nad 200 mg/kg± 10 % rel.
Olachindox
mez stanovitelnosti 2 mg/kg		2 - 12 mg/kg± 50 % rel.
12 - 40 mg/kg± 6 mg/kg
40 - 300 mg/kg± 15 % rel.
300 - 450 mg/kg± 45 mg/kg
450 - 5 000 mg/kg± 10 % rel.
5 000 - 10 000 mg/kg± 500 mg/kg
nad 10 000 mg/kg± 5 % rel.
Amprolium
mez stanovitelnosti 20 mg/kg		20 - 100 mg/kg± 10 mg/kg
100 - 5 000 mg/kg± 10 % rel.
5 000 - 10 000 mg/kg± 500 mg/kg
nad 10 000 mg/kg± 5 % rel.
Meticlorpindol
mez stanovitelnosti 40 mg/kg		40 - 100 mg/kg± 15 mg/kg
100 - 300 mg/kg± 15 % rel.
300 - 450 mg/kg± 45 mg/kg
450 - 5 000 mg/kg± 10 % rel.
Robenidin, dimetridazol
mez stanovitelnosti 4 mg/kg		4 - 10 mg/kg± 2 mg/kg
10 - 25 mg/kg± 20 % rel.
25 - 50 mg/kg± 5 mg/kg
50 - 5 000 mg/kg± 10 % rel.
5 000 - 10 000 mg/kg± 500 mg/kg
nad 10 000 mg/kg± 5 % rel.
Methylbenzochát
mez stanovitelnosti 5 mg/kg		5 - 10 mg/kg± 50 % rel.
10 - 20 mg/kg± 5 mg/kg
20 - 40 mg/kg± 25 % rel.
40 - 100 mg/kg± 10 mg/kg
100 - 5 000 mg/kg± 10 % rel.
5 000 - 10 000 mg/kg± 500 mg/kg
nad 10 000 mg/kg± 5 % rel.
Aflatoxin B1
mez stanovitelnosti 1 μg/kg		1 - 4 μg/kg± 50 % rel.
4 - 10 μg/kg± 2 μg/kg
nad 10 μg/kg± 20 % rel.
Arsen
mez stanovitelnosti nestanovena		do 1 mg/kg± 50 % rel.
1 - 2,5 mg/kg± 0,5 mg/kg
2,5 - 15 mg/kg± 20 % rel.
15 - 30 mg/kg± 3 mg/kg
nad 30 mg/kg± 10 % rel.
Olovo
mez stanovitelnosti 1 mg/kg		1 - 3 mg/kg± 50 % rel.
3 - 5 mg/kg± 1,5 mg/kg
5 - 10 mg/kg± 30 % rel.
10 - 20 mg/kg± 3 mg/kg
20 - 40 mg/kg± 15 % rel.
40 - 60 mg/kg± 6 mg/kg
nad 60 mg/kg± 10 % rel.
Kadmium
mez stanovitelnosti 0,1 mg/kg		0,10 - 0,20 mg/kg± 50 % rel.
0,20 - 0,40 mg/kg± 0,10 mg/kg
0,40 - 1,0 mg/kg± 25 % rel
1,0 - 2,5 mg/kg± 0,25 mg/kg
nad 2,5 mg/kg± 10 % rel.
Chlorované uhlovodíky
*) pro HCH a HCB mez stanovitelnosti 2 μg/kg, pro ostatní 5 μg/kg		5 - 100 μg/kg *)± 50 % rel.
100 - 200 μg/kg± 50 μg/kg
nad 200 μg/kg± 25 % rel.
Fluor
mez stanovitelnosti nestanovena		do 12 mg/kg± 50 % rel.
12 - 15 mg/kg± 6 mg/kg
15 - 30 mg/kg± 40 % rel.
30 - 60 mg/kg± 12 mg/kg
60 - 500 mg/kg± 20 % rel.
500 - 1 000 mg/kg± 100 mg/kg
nad 1 000 mg/kg± 10 % rel.
Gossypolnad 500 mg/kg± 20 % rel.
Rtuť
mez stanovitelnosti 0,04 mg/kg		0,04 - 0,06 mg/kg± 50 % rel.
0,06 - 0,10 mg/kg± 0,03 mg/kg
0,10 - 0,20 mg/kg± 30 % rel.
0,20 - 0,30 mg/kg± 0,06 mg/kg
nad 0,30 mg/kg± 20 % rel.
Hořčičná silicebez rozdílu obsahu± 20 % rel.
Druhová čistotabez rozdílu obsahubez tolerance
Škodlivé nečistotybez rozdílu obsahubez tolerance
Vinylthiooxazolidonbez rozdílu obsahu± 20 % rel.
Metabolizovaná energiebez rozdílu obsahu± 0,3 MJ/kg
  1. 1) Zákon č. 91/1996 Sb., o krmivech, ve znění zákona č. 244/2000 Sb.
  2. 2) Vyhláška č. 294/1997 Sb., o mikrobiologických požadavcích na potraviny, způsobu jejich kontroly a hodnocení, ve znění vyhlášky č. 91/1999 Sb.
  3. 3) § 7 zákona č. 91/1996 Sb., ve znění zákona č. 244/2000 Sb.
  4. 4) § 17 zákona č. 91/1996 Sb., ve znění zákona č. 244/2000 Sb.