Platné znění

Vyhláška Ministerstva zemědělství, kterou se stanoví požadavky na odběr vzorků a principy metod laboratorního zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů a způsob uchovávání vzorků

Název postupuOznačení postupu
1.Stimulátory růstu
1.1.Stanovení obsahu avilamycinu-A-
1.2.Stanovení obsahu avoparcinu-A-
1.3.Stanovení obsahu flavofosfolipolu-A-
1.4.Stanovení obsahu olachindoxu-B-
1.5.Stanovení obsahu monensinu-A-
1.6.Stanovení obsahu monensinu-A-
1.7.Stanovení obsahu salinomycinu-A-
1.8.Stanovení obsahu salinomycinu-A-
1.9.Stanovení obsahu tylosinu-A--B-
1.10.Stanovení obsahu virginiamycinu-A--B-
1.11.Stanovení obsahu zinkbacitracinu-A-
1.12.Stanovení obsahu zinkbacitracinu-B-
1.13.Stanovení obsahu flavofosfolipolu-B-
1.14.Stanovení obsahu avoparcinu-B-
1.15.Stanovení obsahu monensinu-B-
1.16.Stanovení obsahu spiramycinu-B-
1.17.Stanovení obsahu virginiamycinu-B-
2.Antikokcidika
2.1.Stanovení obsahu amprolia-A-
2.2.Stanovení obsahu amprolia-B-
2.3.Stanovení obsahu diclazurilu-A-
2.4.Stanovení obsahu lasalocidu-A-
2.5.Stanovení obsahu maduramicinu-A-
2.6.Stanovení obsahu methylbenzochátu-A-
2.7.Stanovení obsahu narasinu-A-
2.8.Stanovení obsahu narasinu-A-
2.9.Stanovení obsahu nikarbazinu-B-
2.11.Stanovení obsahu robenidinu-A--B-
2.12.Stanovení obsahu sulfaquinoxalinu-B-
2.13.Stanovení obsahu meticlorpindolu-A-
2.14.Stanovení obsahu meticlorpindolu-B-
2.15.Stanovení obsahu kurasanu-A-
2.16.Stanovení obsahu salinomycinu - je uvedeno v Příloze 10, část 1
2.17.Stanovení obsahu monensinu - je uvedeno v Příloze 10, část 1
2.19.Stanovení obsahu halofuginonu-B-
2.20.Stanovení obsahu decoquinátu-B-
2.21.Stanovení obsahu arprinocidu-B-
2.22.Stanovení obsahu ethopabátu-A-
2.23.Stanovení obsahu lasalocidu-A-
2.24.Stanovení obsahu semduramicinu-A-
2.25Stanovení obsahu diclazurilu-B-
2.26Stanovení obsahu carbadoxu-B-
2.27.Stanovení obsahu olachindoxu-B-
2.28.Stanovení obsahu lasalocidu-B-
3.Chemoterapeutika
3.1.Stanovení obsahu dimetridazolu-A-
3.2.Stanovení obsahu dimetridazolu-B-
4.Vitaminy
4.1.Stanovení obsahu vitaminu A a vitaminu E-A-
4.2.Stanovení obsahu vitaminu A a vitaminu E-A-
4.3.Stanovení obsahu vitaminu E-A-
4.4.Stanovení obsahu přidaného vitaminu E-A-
4.5.Stanovení obsahu vitaminu E-A-
4.6.Stanovení obsahu cholinu-A-
4.7.Stanovení obsahu pantothenanu vápenatého-A-
4.8.Stanovení obsahu vitaminu B1, B2, B6-A-
4.9.Stanovení obsahu vitaminu B2-A-
4.10.Stanovení obsahu vitaminu B6-A-
4.11.Stanovení obsahu vitaminu K3-A-
4.12Stanovení obsahu vitaminu A-B-
4.13Stanovení obsahu vitaminu E-B-
5.Mikroprvky
5.1.Stanovení obsahu manganu, zinku, železa a mědi - je uvedeno v příloze 9, část 8-A-
5.2.Stanovení obsahu kobaltu-B-
5.3.Stanovení obsahu selenu-B-
5.4.Stanovení obsahu jodu-A-
6.Vehikula a pojiva
6.1.Stanovení obsahu oxidu křemičitého je uvedeno v příloze č. 9, část 7-A-
6.2.Stanovení obsahu oxidu hlinitého je uvedeno v příloze č. 9, část 7-A-
7.Výpočty
7.1.Vyhodnocování a výpočet výsledků stanovení obsahu doplňkových látek pro difúzní plotnové postupy-A-
8.Antioxidanty
8.1.Stanovení obsahu ethoxyquinu-B-
8.2.Stanovení obsahu butylhydroxytoluenu, butylhydroxyanisolu a galátů-B-
9.Barviva
9.1.Stanovení obsahu kapsantinu-B-
9.2.Stanovení obsahu nativních a přidaných karotenoidů-B-
10.Konzervanty
10.1.Stanovení obsahu kyseliny mravenčí-B-
10.2.Stanovení obsahu oxidu siřičitého-B-
10.3.Stanovení obsahu formaldehydu-A-
11.Zchutňovadla
11.1.Stanovení obsahu sacharinu-B-
12.Mikrobiotika
12.1.Stanovení počtu zárodků bakterií kmene Streptococcus-B-
12.2.Stanovení počtu zárodků bakterií kmene Bacillus-B-
  1. 1. Stimulátory růstu
    1. 1.1. Stanovení obsahu avilamycinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu avilamycinu v krmivech a premixech.

      Obsah avilamycinu se stanoví difúzním plotnovým postupem na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Micrococcus luteus CCM 732 (ATCC 10 240).

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu avilamycinu:
      od 10 do 25 mg/kg40 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
      od 50 do 100 mg/kg20 % relat.
      od 100 do 200 mg/kg20 mg/kg
      nad 200 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 10 mg/kg.

    1. 1.2. Stanovení obsahu avoparcinu

      Účel, rozsah a princip

      Používají se tři zkušební postupy, z nichž dva jsou pro stanovení obsahu avoparcinu v premixech bez i za přítomnosti ionoforových antikokcidik. Třetí postup se používá pro stanovení obsahu avoparcinu v krmivech.

      Vzorek se extrahuje směsným rozpouštědlem aceton-voda-kyselina chlorovodíková a obsah avoparcinu se stanoví na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Bacillus subtilis CCM 1999 (ATCC 6633) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu avoparcinu:
        od 10 do 25 mg/kg40 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
        od 50 do 100 mg/kg20 % relat.
        od 100 do 200 mg/kg20 mg/kg
        nad 200 mg/kg10% relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 10 mg/kg.

    1. 1.3. Stanovení obsahu flavofosfolipolu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení flavofosfolipolu v premixech.

      Obsah flavofosfolipolu se stanoví na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Staphylococcus aureus CCM 2022 (ATCC 6538) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu flavofosfolipolu nad 200 mg/kg 10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 200 mg/kg.

    1. 1.4. Stanovení obsahu olachindoxu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu olachindoxu v krmivech a premixech. Obsah olachindoxu se stanoví po extrakci směsným rozpouštědlem metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s UV-detekcí.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu olachindoxu:
      od 5 do 15 mg/kg25 % relat.
      od 15 do 100 mg/kg15 % relat.
      od 100 do 1 500 mg/kg10 % relat.
      od 1 500 do 5 000 mg/kg150 mg/kg
      nad 5 000 mg/kg3 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu olachindoxu:
      od 5do 12 mg/kg50 % relat.
      od 12 do 40 mg/kg6 mg/kg
      od 40 do 300 mg/kg15 % relat.
      od 300 do 450 mg/kg45 mg/kg
      od 450 do 5 000 mg/kg10 % relat.
      od 5 000 do 10 000 mg/kg500 mg/kg
      nad 10 000 mg/kg5 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 5 mg/kg.

    1. 1.5. Stanovení obsahu monensinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu monensinu v krmivech a premixech.

      Obsah monensinu se stanoví na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Bacillus subtilis CCM 1999 (ATCC 6633) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu monensinu:
        od 20 do 25 mg/kg40 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
        od 50 do 100 mg/kg20 % relat.
        od 100 do 200 mg/kg20 mg/kg
        nad 200 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 20 mg/kg.

    1. 1.6. Stanovení obsahu monensinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu monensinu v krmivech a premixech.

      Obsah monensinu se stanoví po extrakci směsným rozpouštědlem, extrakt je přečištěn na pevné fázi a takto přečištěný extrakt je rozpuštěn v definovaném objemu mobilní fáze. Monensin se stanovuje metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi a po postkolonové derivatizaci s p-dimethylaminobenzaldehydem při 90 °C je detekován UV-detektorem při vlnové délce 600 nm.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu monensinu:
        od 0,2 do 30 mg/kg15 % relat.
        od 30 do 90 mg/kg4,5 mg/kg
        nad 90 mg/kg5 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu monensinu:
        do 30 mg/kg5 mg/kg
        od 30 do 100 mg/kg15 % relat.
        od 100do 200 mg/kg15 mg/kg
        od 200do 50 000 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 0,2 mg/kg.

    1. 1.7. Stanovení obsahu salinomycinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení salinomycinu v krmivech a premixech.

      Obsah salinomycinu se stanoví na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Bacillus subtilis CCM 1999 (ATCC 6633) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu salinomycinu:
      od 10 do 25 mg/kg40 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
      od 50 do 100 mg/kg20 % relat.
      od 100 do 200 mg/kg20 mg/kg
      nad 200 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 10 mg/kg.

    1. 1.8. Stanovení obsahu salinomycinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu salinomycinu v krmivech a premixech.

      Obsah salinomycinu se stanoví po extrakci směsným rozpouštědlem, extrakt je přečištěn na pevné fázi a takto přečištěný extrakt je rozpuštěn v definovaném objemu mobilní fáze. Salinomycin se stanovuje metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi a po postkolonové derivatizaci s p-dimethylaminobenzaldehydem při 90 °C je detekován UV-detektorem při vlnové délce 600 nm.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu salinomycinu:
      od 1,4 do 25 mg/kg20 % relat.
      od 25 do 100 mg/kg5 mg/kg
      nad 100 mg/kg5 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu salinomycinu:
      do 30 mg/kg5 mg/kg
      od 30 do 100 mg/kg15 % relat.
      od 100 do 200 mg/kg15 mg/kg
      od 200 do 50 000 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 1,4 mg/kg.

    1. 1.9. Stanovení obsahu tylosinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení tylosinu v krmivech a premixech od obsahu nad 10 mg/kg.

      Obsah tylosinu se stanoví po extrakci vzorku ethanolem na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Micrococcus varians CCM 552 (ATCC 9341) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 10 % relativních.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu tylosinu:
      od 10 do 25 mg/kg40 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
      od 50 do 100 mg/kg20 % relat.
      od 100 do 200 mg/kg20 mg/kg
      nad 200 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 10 mg/kg.

    1. 1.10. Stanovení obsahu virginiamycinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení virginiamycinu v krmivech a premixech.

      Vzorek je extrahován směsí kyseliny citrónové a acetonu a obsah virginiamycinu se stanoví na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Micrococcus varians CCM 552 (ATCC 9341) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 10 % relativních.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu virginiamycinu:
      od 5 do 25 mg/kg40 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
      od 50 do 100 mg/kg20 % relat.
      od 100 do 200 mg/kg20 mg/kg
      nad 200 mg/kg 10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 1.11. Stanovení obsahu zinkbacitracinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení zinkbacitracinu v premixech.

      Obsah zinkbacitracinu se stanoví na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Micrococcus luteus CCM 732 (ATCC 10 240) difúzním plotnovým postupem.

      1. 1. Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 200 mg/kg.

    1. 1.12. Stanovení obsahu zinkbacitracinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení zinkbacitracinu v krmivech a premixech.

      Obsah zinkbacitracinu se stanoví po extrakci vzorku směsí okyseleného zředěného roztoku methanolu na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Micrococcus luteus CCM 732 (ATCC 10 240) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu zinkbacitracinu:
      od 5 do 10 mg/kg2 mg/kg
      od 10 mg/kg do 25 mg/kg20 % relat.
      od 25 mg/kg do 50 mg/kg5 mg/kg
      nad 50 mg/kg10 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu zinkbacitracinu:
      od 5 do 25 mg/kg40 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
      od 50 do 100 mg/kg20 % relat.
      od 100 do 200 mg/kg20 mg/kg
      nad 200 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 5 mg/kg.

    1. 1.13. Stanovení obsahu flavofosfolipolu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení flavofosfolipolu v krmivech a premixech.

      Obsah flavofosfolipolu po extrakci vzorku zředěným methanolem se stanoví na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Staphylococcus aureus CCM 2022 (ATCC 6538) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu flavofosfolipolu nad 200 mg/kg 5,5 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu flavofosfolipolu:
      od 1 do25 mg/kg40 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
      od 50 do 100 mg/kg20 % relat.
      od 100 do 200 mg/kg20 mg/kg

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 1 mg/kg.

    1. 1.14. Stanovení obsahu avoparcinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení avoparcinu v krmivech a premixech.

      Obsah avoparcinu se stanoví na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Bacillus subtilis CCM 1999 (ATCC 6633) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu avoparcinu:
      od 2 do 10 mg/kg2 mg/kg
      od 10 do 25 mg/kg20 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg5 mg/kg
      nad 50 mg/kg10 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu avoparcinu:
      od 2 do 25 mg/kg40 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
      od 50 do 100 mg/kg20 % relat.
      od 100 do200 mg/kg20 mg/kg
      nad 200 mg/kg10 % relat

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 2 mg/kg.

    1. 1.15. Stanovení obsahu monensinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu monensinu v krmivech a premixech.

      Obsah monensinu se stanoví na základě jeho inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Bacillus subtilis CCM 1999 (ATCC 6633) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu monensinu:
      od 10 do 25 mg/kg20 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg5 mg/kg
      nad 50 mg/kg10 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu monensinu:
      od 10 do 25 mg/kg40 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
      od 50 do 100 mg/kg20 % relat.
      od 100 do 200 mg/kg20 mg/kg
      nad 200 mg/kg10% relat

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 10 mg/kg.

    1. 1.16. Stanovení obsahu spiramycinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu spiramycinu v krmivech a premixech.

      Obsah spiramycinu se stanoví na základě jeho inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Micrococcus luteus CCM 552 (ATCC 9341) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu spiramycinu:
      od 1 do 10 mg/kg2 mg/kg
      od 10 do 25 mg/kg20 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg5 mg/kg
      nad 50 mg/kg10 % relat.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 1 mg/kg.

    1. 1.17. Stanovení obsahu virginiamycinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu virginiamycinu v krmivech a premixech.

      Obsah virginiamycinu se po extrakci vzorku methanolickým roztokem smáčedla (Tween) stanoví na základě jeho inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Micrococcus luteus CCM 732 (ATCC 10 240) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu virginiamycinu:
      od 2 do 10 mg/kg2 mg/kg
      od 10 do 25 mg/kg20 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg5 mg/kg
      nad 50 mg/kg10 % relat.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti 2 mg/kg.

  1. 2. Antikokcidika
    1. 2.1. Stanovení obsahu amprolia

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu amprolia v krmivech a premixech.

      Obsah amprolia se stanoví po extrakci methanolem a přečištění na pevné fázi metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie na reverzní fázi s UV-detekcí při vlnové délce 270 nm.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu amprolia:
      od 1,3 do 30 mg/kg15 % relat.
      od 30 do 60 mg/kg4,5 mg/kg
      od 60 do 120 mg/kg7,5 % relat.
      od 120 do 180 mg/kg9 mg/kg
      nad 180 mg/kg5 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu amprolia:
      do 120 mg/kg15 % relat.
      od 5 000 - do 30 000 mg/kg10 % relat

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 1,3 mg/kg.

    1. 2.2. Stanovení obsahu amprolia

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu amprolia v krmivech a premixech. Mez detekce je 1 mg/kg a mez stanovitelnosti je 25 mg/kg.

      Vzorek se extrahuje směsí methanol - voda. Po zředění extraktu mobilní fází a membránové filtraci se obsah amprolia stanoví vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií s výměnou kationtů a s UV detekcí.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu amprolia:
      od 25 do 500 mg/kg15 % relat.
      od 500 do 1000 mg/kg75 mg/kg
      nad 1 000 mg/kg7,5 % relat.

      Reprodukovatelnost

      Je uvedena u metody.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 25 mg/kg.

    1. 2.3. Stanovení obsahu diclazurilu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu diclazurilu v krmivech a premixech.

      Obsah diclazurilu se stanoví po extrakci vzorku okyseleným methanolem a přečištění na pevné fázi metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie na reverzní fázi s použitím UV detekce při vlnové délce 280 nm.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu diclazurilu:
      do 5 mg/kg (krmné směsi)13 % relat.
      od 200 do 1 000 mg/kg (premixy)4,5 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu diclazurilu
      do 5 mg/kg (krmné směsi)26 % relat.
      od 200 do 1 000 mg/kg (premixy)9 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 0,2 mg/kg.

    1. 2.4. Stanovení obsahu lasalocidu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu lasalocidu v premixech.

      Obsah lasalocidu se stanoví na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Bacillus subtilis CCM 1999 (ATCC 6633) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 20 mg/kg.

    1. 2.5. Stanovení obsahu maduramicinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu maduramicinu v premixech.

      Obsah maduramicinu se stanoví po extrakci vzorku směsí acetonitrilu a dichlormethanu, předkolonové derivatizaci dansylchloridem a následném přečištění na pevné fázi metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s použitím fluorescenční detekce (excitační vlnová délka 224 nm; emisní vlnová délka 515 nm) nebo UV detekce při vlnové délce 224 nm.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 8 mg/kg.

    1. 2.6. Stanovení obsahu methylbenzochátu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu methylbenzochátu v krmivech a premixech.

      Obsah methylbenzochátu se stanoví po extrakci vzorku methanolovým roztokem methansulfonové kyseliny, po přečištění extrakcí dichlormethanem je izolován na chromatografickém ionexovém sloupci a znovu extrahován dichlormethanem, nakonec stanoven metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s UV detekcí nebo FF detekcí (excitační vlnová délka 265 nm, emisní vlnová délka 390 nm).

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu methylbenzochátu.

      od 1 do 15 mg/kg10 % relat.
      od 1 000 do 4 500 mg/kg5 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu methylbenzochátu:
      od 1 do 15 mg/kg15 % relat.
      od 1 000 do 4 500 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 1 mg/kg pro UV detekci a 0,5 mg/kg pro FF detekci.

    1. 2.7. Stanovení obsahu narasinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu narasinu v premixech.

      Obsah narasinu se stanoví na základě inhibičního účinku na růst testovacího mikroorganismu Bacillus subtilis CCM 1999 (ATCC 6633) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 20 mg/kg.

    1. 2.8. Stanovení obsahu narasinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu narasinu v krmivech a premixech.

      Obsah narasinu se stanoví po extrakci směsným rozpouštědlem, extrakt je přečištěn na pevné fázi a takto přečištěný extrakt je rozpuštěn v definovaném objemu mobilní fáze. Narasin se stanoví metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie na reverzní fázi a po postkolonové derivatizaci s p-dimethylaminobenzaldehydem při 90 °C je detekován UV-detektorem při vlnové délce 600 nm.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu narasinu:
      od 10 do 30 mg/kg5 mg/kg
      od 30 do 100 mg/kg15 % relat.
      od 100 do 200 mg/kg15 mg/kg
      od 200 do 50 000 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 0,7 mg/kg.

    1. 2.9. Stanovení obsahu nikarbazinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení nikarbazinu v krmivech a premixech.

      Obsah nikarbazinu se stanoví spektrofotometricky po extrakci n-hexanem a chromatografické separaci v prostředí alkalického roztoku chloridu draselného.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 2.11. Stanovení obsahu robenidinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu robenidinu v krmivech a premixech.

      Obsah robenidinu se stanoví po extrakci vzorku okyseleným methanolem, jeho přečištění na alumině A, metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie na reverzní fázi s použitím UV detekce při vlnové délce 347 nm.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu robenidinu vyšším než 15 mg/kg hodnotu 10 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu robenidinu:
      od 3,1 do 10 mg/kg2 mg/kg
      od 10 do 25 mg/kg20 % relat.
      od 25 do 50 mg/kg5 mg/kg
      od 50 do 5000 mg/kg10 % relat.
      od 5 000 do 10 000 mg/kg500 mg/kg
      nad 10 000 mg/kg5 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 3,1 mg/kg.

    1. 2.12. Stanovení obsahu sulfaquinoxalinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení sulfaquinoxalinu v krmivech a premixech. Mez stanovitelnosti je 20 mg/kg.

      Vzorek se extrahuje roztokem dimethyformamidu s chloroformem a obsah sulfaquinoxalinu se stanoví po jeho alkalické hydrolýze, diazotaci a kopulaci N-2-aminoethyl-1-naftylaminem, spektrofotometricky při vlnové délce 545 nm.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu sulfaquinoxalinu:
      20 až 100 mg/kg10 mg/kg
      100 až 5 000 mg/kg10 % relat.
      5 000 až 10 000 mg/kg500 mg/kg
      nad 10 000 mg/kg5 % relat.

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 2.13. Stanovení obsahu meticlorpindolu (clopidol, coyden)

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu meticlorpindolu v krmivech a premixech.

      Obsah meticlorpindolu se stanoví po extrakci vzorku směsným rozpouštědlem methanol-amoniak a po jeho převedení do mobilní fáze metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s UV detekcí při 265 nm.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu meticlorpindolu.

      do 100 mg/kg5 % relat.
      od 100 do 200 mg/kg5 mg/kg

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu meticlorpindolu:
      od 50 do 200 mg/kg15 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 3,6 mg/kg.

    1. 2.14. Stanovení obsahu meticlorpindolu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu meticlorpindolu v krmivech a premixech.

      Obsah meticlorpindolu se stanoví po extrakci vzorku směsným rozpouštědlem methanol - chloroform-amoniak, následném přečištění chromatografií na pevné fázi na oxidu hlinitém a na ionexu spektrofotometricky při vlnových délkách 267, 297 a 327 nm s ohledem na korekci pozadí.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu meticlorpindolu:
        od 30 do 100 mg/kg5 mg/kg
        nad 100 mg/kg5 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu meticlorpindolu:
        od 30 do 100 mg/kg15 mg/kg
        od 100 do 300 mg/kg15 % relat.
        od 300 do 450 mg/kg45 mg/kg
        od 450 do 5 000 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 30 mg/kg.

    1. 2.15. Stanovení obsahu kurasanu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení kurasanu v premixech.

      Obsah kurasanu se stanoví po extrakci hexanem spektrofotometricky v UV oblasti při vlnové délce 361 nm.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 2.16. Stanovení obsahu salinomycinu

      Postup stanovení obsahu salinomycinu je uveden v příloze č. 10,část 1.

    1. 2.17. Stanovení obsahu monensinu

      Postup stanovení obsahu monensinu je uveden v příloze č. 10, část 1.

    1. 2.19. Stanovení obsahu halofuginonu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu halofuginonu v krmivech a premixech.

      Obsah halofuginonu se stanoví po extrakci horkou vodou a přečištění na ionexu metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s UV-detekcí při vlnové délce 243 nm.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu halofuginonu do 3 mg/kg hodnotu 0,5 mg/kg.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 1 mg/kg.

    1. 2.20. Stanovení obsahu decoquinátu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu decoquinátu v krmivech.

      Vzorek se extrahuje methanolickým roztokem chloridu vápenatého a obsah decoquinátu se stanoví fluorometricky.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 2.21. Stanovení obsahu arprinocidu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu arprinocidu v krmivech.

      Vzorek se extrahuje chloroformem a obsah arprinocidu je stanoven vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC) s UV detekcí při 254 nm.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 2.22. Stanovení obsahu ethopabátu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu ethopabátu v krmivech a premixech.

      Obsah ethopabátu se stanoví po extrakci vzorku methanolem a přečištění chromatografií na pevné fázi na alumině B metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 268 nm; emisní vlnová délka 350 nm).

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu ethopabátu:
      od 0,03 do 1 mg/kg40 % relat.
      od 1 do 4 mg/kg0,4 mg/kg
      od 4 do 20 mg/kg10 % relat.
      od 20 do 1 000 mg/kgnestanovena
      nad 1 000 mg/kg5 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu ethopabátu:
      od 0,03 do 1 mg/kgnestanovena
      od 1 do 20 mg/kg20 % relat.
      od 20 do 1000 mg/kgnestanovena
      nad 1 000 mg/kg15 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 0,03 mg/kg.

    1. 2.23. Stanovení obsahu lasalocidu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu lasalocidu v krmivech a premixech.

      Obsah lasalocidu se stanoví po extrakci vzorku methanolem a jeho převedení do mobilní fáze metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s fluorescenční detekcí při excitační vlnové délce 310 nm a emisní vlnové délce 419 nm.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu lasalocidu:
        od 0.4 do 20 mg/kg20 % relat.
        od 20 do 40 mg/kg4 mg/kg
        nad 40 mg/kg10 % relat.

      Uvedené hodnoty opakovatelnosti se nevztahují pro určení pracovní přesnosti míchacího zařízení podle přílohy č. 16.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu lasalocidu:
        od 0.4 do 50 mg/kg30 % relat.
        od 50 do 75 mg/kg15 mg/kg
        nad 75 mg/kg20 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 0,4 mg/kg.

    1. 2.24. Stanovení obsahu semduramicinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu semduramicinu v krmivech a premixech. Obsah semduramicinu se stanoví po extrakci směsným rozpouštědlem hexan-octan ethylnatý a extrakt je přečištěn na pevné fázi a takto přečištěný extrakt je rozpuštěn v definovaném objemu mobilní fáze. Semduramicin se stanoví metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi a po postkolonové derivatizaci s vanilinem při 90 °C je detekován UV-detektorem při vlnové délce 522 nm.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 2.25. Stanovení obsahu diclazurilu

      Účel, rozsah a princip

      Postup určuje podmínky pro stanovení obsahu diclazurilu v krmivech a premixech. Mez detekce je 0,1 mg/kg, mez stanovitelnosti je 0,5 mg/kg.

      Vzorek se extrahuje okyseleným methanolem. Extrakt krmiv se čistí na SPE patroně C18. Diclazuril se eluuje směsí okyseleného methanolu a vody. Po odpaření se zbytek rozpustí ve směsi dimethylformamidu a vody. Extrakt z premixů se odpaří a zbytek se rozpustí ve směsi dimethylformamidu a vody. Obsah diclazurilu se stanoví vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi s ternárním gradientem a UV detekcí.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu diclazurilu:
      od 0,5 do 2,5 mg/kg30 % relat.
      od 2,5 do 5 mg/kg0,75 mg/kg
      nad 5 mg/kg15 % relat.

      Reprodukovatelnost

      Je uvedena u metody.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 0,5 mg/kg.

    1. 2.26 Stanovení obsahu carbadoxu

      Účel, rozsah a princip

      Postup určuje podmínky pro stanovení obsahu carbadoxu v krmivech, premixech a doplňkových látkách. Mez detekce je 1 mg/kg, mez stanovitelnosti je 10 mg/kg.

      Vzorek se zvlhčí vodou a extrahuje směsí methanol - acetonitril. Alikvotní podíl extraktu krmiva se po filtraci přečistí na koloně s oxidem hlinitým. Extrakt z premixů a doplňkových látek se přímo ředí na vhodnou koncentraci směsí voda - methanol - acetonitril. Obsah carbadoxu se stanoví vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi s UV detekcí.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu carbadoxu 10 mg/kg a vyšším 15 % relat. z hodnoty vyššího výsledku.

      Reprodukovatelnost

      Je uvedena u metody.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 10 mg/kg.

    1. 2.27. Stanovení obsahu olachindoxu

      Účel, rozsah a princip

      Postup určuje podmínky pro stanovení obsahu olachindoxu v krmivech.

      Vzorek se extrahuje směsí voda - methanol. Obsah olachindoxu se stanoví vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi s UV detekcí.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí při obsahu 10 až 20 mg/kg překročit 15 % relat. z hodnoty vyššího výsledku

      Reprodukovatelnost

      Je uvedena u metody.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 5 mg/kg.

    1. 2.28. Stanovení obsahu lasalocidu

      Účel, rozsah a princip

      Postup určuje podmínky pro stanovení obsahu sodné soli lasalocidu v krmivech a premixech. Mez detekce je 5 mg/kg a mez stanovitelnosti je 30 mg/kg.

      Lasalocid sodný se extrahuje ze vzorku okyseleným methanolem a stanoví se vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií na reverzní fázi s fluorescenční detekcí.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu lasalocidu:
      od 30 do 100 mg/kg15 % relat.
      od 100 do 200 mg/kg15 mg/kg
      nad 200 mg/kg7,5 % relat.

      Reprodukovatelnost

      Je uvedena u metody.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 30 mg/kg.

  1. 3. Chemoterapeutika
    1. 3.1. Stanovení obsahu dimetridazolu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu dimetridazolu v krmivech a premixech.

      Obsah dimetridazolu se stanoví po extrakci vzorku 90 % methanolem. Následně se přečistí na pevné fázi a stanoví metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s UV detekcí při 309 nm.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu dimetridazolu:
        od 3 do 30 mg/kg15 % relat.
        od 30 do 100 mg/kg5 mg/kg
        nad 100 mg/kg5 % relat.

      Uvedené hodnoty opakovatelnosti se nevztahují pro určení pracovní přesnosti míchacího zařízení podle přílohy č. 16.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu dimetridazolu:
        od 3 do 25 mg/kg20 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg5 mg/kg
        nad 50 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 3 mg/kg.

    1. 3.2. Stanovení obsahu dimetridazolu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu dimetridazolu v krmivech.

      Obsah dimetridazolu se stanoví po extrakci vzorku methanolem a přečištění na alumině spektrofotometricky.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu dimetridazolu:
        do 4 mg/kg50 % relat.
        od 4 do 10 mg/kg2 mg/kg
        od 10 do 25 mg/kg20 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg5 mg/kg
        od 50 do 5 000 mg/kg10 % relat.
        od 5 000 do 10 000 mg/kg500 mg/kg
        nad 10 000 mg/kg5 % relat.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

  1. 4. vitaminy
    1. 4.1. Stanovení obsahu vitaminu A a vitaminu E

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu A a vitaminu E v krmivech a premixech.

      Obsah vitaminu A a E se stanoví po alkalické hydrolýze hydroxidem draselným a následné extrakci na pevné fázi po převedení do cyklohexanu metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na normální fázi s UV detekcí při 325 nm nebo fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 325 nm, emisní vlnová délka 480 nm) pro vitamin A a UV detekce při 292 nm nebo fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 292 nm, emisní vlnová délka 330 nm) pro vitamin E.

      1. Výsledky se vyjadřují pro obsah vitaminu A:
        do 999 m.j./kgs přesností na 1 m.j./kg
        od 1 000 do 9 999 m.j./kgs přesností na 10 m.j./kg
        od 10 000 do 99 999 m.j./kgs přesností na 100 m.j./kg
        od 100 000 do 999 999 m.j./ks přesností na 1 000 m.j./kg
        nad 1 000 000 m.j./kgs přesností na 10 000 m.j./kg

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu vitaminu A (UV detekce):
        od 1 000 do 50 000 m.j./kg20 % relat.
        od 50 000 do 100 000 m.j./kg10 000 m.j./kg
        nad 100 000 m.j./kg10 % relat.
      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 50 mg/kg20 % relat.
        od 50 do 100 mg/kg10 mg/kg
        nad 100 mg/kg10 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu vitaminu A (UV detekce):
        od 1 000 do 4 000 m.j./kg1000 m.j./kg
        od 4 000 do 100 000 m.j./kg25 % relat.
        od 100 000 do 125 000 m.j./kg25 000 m.j./kg
        od 125 000 do 375 000 m.j./kg20 % relat.
        od 375 000 do 600 000 m.j./kg75 000 m.j./kg
        od 600 000 do 800 000 m.j./kg12,5 % relat.
        od 800 000 do 1 000 000 m.j./kg100 000 m.j./kg
        nad 1 000 000 m.j./kg10 % relat.
      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 25 mg/kg 40 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
        od 50 do 150 mg/kg20 % relat.
        od 150 do 200 mg/kg30 mg/kg
        od 200 do 500 mg/kg15% relat.
        od 500 do 750 mg/kg75 mg/kg
        nad 750 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti pro vitamin A je 250 m.j./kg pro fluorescenční detekci, pro UV detekci 1000 m.j./kg. Mez stanovitelnosti pro vitamin E je 0,1 mg/kg pro fluorescenční detekci, pro UV detekci 0,8 mg/kg.

    1. 4.2. Stanovení obsahu vitaminu A a vitaminu E

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu A a vitaminu E v krmivech a premixech.

      Obsah vitaminu A a E se stanoví po alkalické hydrolýze hydroxidem draselným a následné extrakci hexanem a převedením do methanolu metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s UV detekcí při 325 nm nebo fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 325 nm, emisní vlnová délka 480 nm) pro vitamin A a UV detekce při 292 nm nebo fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 292 nm, emisní vlnová délka 330 nm) pro vitamin E.

      1. Výsledky se vyjadřují pro obsah vitaminu A:
        do 999 m.j./kgs přesností na 1 m.j./kg
        od 1 000 do 9 999 m.j./kgs přesností na 10 m.j./kg
        od 10 000 do 99 999 m.j./kgs přesností na 100 m.j./kg
        od 100 000 do 999 999 m.j./ks přesností na 1 000 m.j./kg
        nad 1 000 000 m.j./kgs přesností na 10 000 m.j./kg

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu vitaminu A (UV detekce):
        od 1 000 do 8 000 m.j./kg25 % relat.
        od 8 000 do 13 500 m.j./kg2 000 m.j./kg
        od 13 500 do 40 000 m.j./kg15 % relat.
        od 40 000 do 300 000 m.j./kg37 500 m.j./kg
        od 300 000 do 1 600 000 m.j./kg12,5 % relat.
        od 1 600 000 do 2 600 000 m.j./kg200 000 m.j./kg
        od 2 600 000 do 4 000 000 m.j./kg7,5 % relat.
      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 55 mg/kg 10 % relat.
        od 55 do 100 mg/kg5,5 mg/kg
        od 100 do 250 mg/kg5,5 % relat.
        od 500 do 1 000 mg/kg45 mg/kg
        od 1 000 do 5 000 mg/kg4,5 % relat.
        od 5 000 do 7 500 mg/kg225 mg/kg
        více než 7 500 mg/kg3 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu vitaminu A (UV detekce):
        od 1 000 do 100 000 m.j./kg25 % relat.
        od 100 000 do 125 000 m.j./kg25 000 m.j./kg
        od 125 000 do 375 000 m.j./kg20 % relat.
        od 375 000 do 600 000 m.j./kg75 000 m.j./kg
        od 600 000 do 800 000 m.j./kg12,5 % relat.
        od 800 000 do 1 000 000 m.j./kg100 000 m.j./kg
        nad 1 000 000 m.j./kg10 % relat.
      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 25 mg/kg40 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
        od 50 do 150 mg/kg20 % relat.
        od 150 do 200 mg/kg30 mg/kg
        od 200 do 500 mg/kg15 % relat.
        od 500 do 750 mg/kg75 mg/kg
        nad 750 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti pro vitamin A je 250 m.j./kg pro fluorescenční detekci, pro UV detekci 1000 m.j./kg. Mez stanovitelnosti pro vitamin E je 0,1 mg/kg pro fluorescenční detekci, pro UV detekci 0,8 mg/kg.

    1. 4.3. Stanovení obsahu vitaminu E

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu E v krmivech a premixech.

      Obsah vitaminu E se stanoví po alkalické hydrolýze hydroxidem draselným a následné extrakci na pevné fázi po převedení do cyklohexanu metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na normální fázi s UV detekcí při 292 nm nebo fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 295 nm, emisní vlnová délka 330 nm).

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 50 mg/kg20 % relat.
        od 50 do 100 mg/kg10 mg/kg
        nad 100 mg/kg10 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 25 mg/kg40 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
        od 50 do 150 mg/kg20 % relat.
        od 150 do 200 mg/kg30 mg/kg
        od 200 do 500 mg/kg15 % relat.
        od 500 do 750 mg/kg75 mg/kg
        nad 750 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je pro UV detekci 0,8 mg/kg, pro fluorescenční detekci 0,1 mg/kg.

    1. 4.4. Stanovení obsahu přidaného vitaminu E

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu E v premixech a v krmných směsích.

      Obsah přidaného vitaminu E (octan tokoferolu) se stanoví plynovou chromatografií po extrakci vzorku diethyletherem resp. hexanem přímo, resp. po přečištění na sloupci oxidu hlinitého.

      Opakovatelnost

      Pro premixy: Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí při obsahu vitaminu E 1 500 000 mg/kg překročit hodnotu 88 000 mg/kg.

      Pro krmné směsi: Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí při obsahu vitaminu E 20 mg/kg překročit hodnotu 2,15 mg/kg.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 4.5. Stanovení obsahu vitaminu E

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu E v krmivech a premixech.

      Obsah vitaminu E se stanoví po alkalické hydrolýze hydroxidem draselným a následné extrakci hexanem a převedením do methanolu metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reverzní fázi s UV detekcí při 292 nm nebo fluorescenční detekcí (excitační vlnová délka 295 nm, emisní vlnová délka 330 nm).

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 55 mg/kg10 % relat.
        od 55 do 100 mg/kg5,5 mg/kg
        od 100 do 250 mg/kg5,5 % relat.
        od 500 do 1 000 mg/kg45 mg/kg
        od 1 000 do 5 000 mg/kg4,5 % relat.
        od 5 000 do 7 500 mg/kg225 mg/kg
        více než 7 500 mg/kg3 % relat.

      Reprodukovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit při obsahu vitaminu E (UV detekce):
        od 0,8 do 25 mg/kg40 % relat.
        od 25 do 50 mg/kg10 mg/kg
        od 50 do 150 mg/kg20 % relat.
        od 150 do 200 mg/kg30 mg/kg
        od 200 do 500 mg/kg15 % relat.
        od 500 do 750 mg/kg75 mg/kg
        nad 750 mg/kg10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je pro UV detekci 0,8 mg/kg, pro fluorescenční detekci 0,1 mg/kg.

    1. 4.6. Stanovení obsahu cholinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu cholinu v krmivech a premixech.

      Obsah cholinu se stanoví po hydrolýze vzorku hydroxidem barnatým a přečištění hydrolyzátu na ionexu na základě vzniku komplexu s reineckátem amonným v prostředí roztoku fosforečnanu sodného spektrofotometricky po rozpuštění komplexu v acetonu při vlnové délce 525 nm.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 20 mg/kg.

    1. 4.7. Stanovení obsahu pantothenanu vápenatého

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu pantothenanu vápenatého v premixech.

      Obsah pantothenanu vápenatého se stanoví na základě stimulačního účinku na růst testovacího mikroorganismu Saccharomyces carlsbergensis CCM 4288 (ATCC 9080) difúzním plotnovým postupem.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 4.8. Stanovení vitaminů B1, B2, B6

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminů B1, B2, B6 v krmných směsích.

      Vitaminy B1 (thiamin), B2 (riboflavin) a B6 (pyridoxin) se extrahují ze vzorku krmiva vodou a po hydrolýze kyselinou chloristou se stanoví postupem vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) s využitím iontových párů na reverzní fázi. Detekce vitaminu B2, a B6 se provádí přímo fluorescenční detekcí, zatímco vitamin B1 se před detekcí nejprve oxiduje derivatizačním činidlem v reakční smyčce postkolonové derivatizace.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 4.9. Stanovení obsahu vitaminu B2

      Účel, rozsah a princip

      Používají se dva postupy stanovení obsahu vitaminu B2 v premixech - postup fluorometrický a postup difúzní plotnový.

      Obsah vitaminu B2 se stanoví fluorometricky v mírně okyseleném prostředí na základě fluorescence při vlnové délce 440 nm nebo difúzním plotnovým postupem na základě stimulačního účinku na růst testovacího mikroorganismu Lactobacillus rhamnosus CCM 1825 (ATCC 7469).

      Opakovatelnost

      Pro metodu fluorometrickou nestanovena.

      Pro metodu difúzní plotnovou:

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí při obsahu vitaminu B2 500 000 mg/kg překročit hodnotu 40 500 mg/kg.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 4.10. Stanovení obsahu vitaminu B6

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu B6 v premixech.

      Vitamin B6 ve všech jeho formách se stanoví na základě stimulačního účinku na růst testovacího mikroorganismu kvasinky Saccharomyces carlsbergensis CCM 4228 (ATCC 9080) difúzním potnovým způsobem.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 4.11. Stanovení obsahu vitaminu K3

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu K3 v krmivech a premixech.

      Obsah vitaminu K3 se stanoví po extrakci vzorku chloroformem, následné hydrolýze amoniakem, metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na normální fázi s UV detekcí při 264 nm.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 2.9 mg/kg.

    1. 4.12. Stanovení obsahu vitaminu A

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu A v krmivech a premixech. Vitamin A zahrnuje all-trans retinol a jeho cis izomery, které se touto metodou stanoví. Obsah vitaminu A se vyjadřuje v mezinárodních jednotkách (IU) na kg. Mezinárodní jednotka odpovídá aktivitě 0,3 μg all-trans vitaminu A (alkohol) nebo 0,344 μg all-trans vitamin A (acetát) nebo 0,550 μg all-trans vitaminu A (palmitát). Mez stanovitelnosti je 2 000 IU vitaminu A/kg

      Vzorek se hydrolyzuje ethanolickým roztokem hydroxidu draselného a vitamin A se extrahuje petroletherem. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí v methanolu a pokud je to nutné, naředí se na vhodnou koncentraci. Obsah vitaminu A se stanoví metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie na reverzní fázi (RP-HPLC) s UV nebo fluorescenční detekcí. Chromatografické parametry jsou vybrány tak, aby nedocházelo k separaci all-trans vitaminu A (alkohol) a jeho cis izomerů.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 15% relat. z hodnoty vyššího výsledku.

      Reprodukovatelnost

      Je uvedena u metody.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 2000 m.j./kg

    1. 4.13. Stanovení obsahu vitaminu E

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vitaminu E v krmivech a premixech. Obsah vitaminu E se vyjadřuje jako mg DL-α-tokoferol acetátu na kg. 1 mg DL-α-tokoferol acetátu odpovídá 0,91 mg DL-α-tokoferolu (vitamin E). Mez stanovitelnosti je 2 mg vitaminu E/kg

      Vzorek se hydrolyzuje ethanolickým roztokem hydroxidu draselného a vitamin E se extrahuje petroletherem. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se rozpustí v methanolu a pokud je to nutné, naředí se na vhodnou koncentraci. Obsah vitaminu E se stanoví metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie na reverzní fázi (RP-HPLC) s UV nebo fluorescenční detekcí.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 15% relat. z vyššího výsledku.

      Reprodukovatelnost

      Je uvedena u metody.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti je 2 mg/kg.

  1. 5. Mikroprvky
    1. 5.1. Stanovení obsahu mědi, železa, manganu a zinku

      Postup stanovení obsahu mědi, železa, manganu a zinku je uveden v příloze č. 9, část 8.

    1. 5.2. Stanovení obsahu kobaltu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu kobaltu v krmivech.

      Stanovení je založeno na principu tvorby barevného komplexu kobaltu s 2-nitroso-1-naftolem, jehož absorbance se měří spektrofotometricky.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu kobaltu:
      do 5 mg/kg50 % relat.
      od 5 do 10 mg/kg2,5 mg/kg
      od 10 do 30 mg/kg25 % relat.
      od 30 do 50 mg/kg7,5 mg/kg
      nad 50 mg/kg15% relat.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 5.3. Stanovení obsahu selenu.

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení selenu v krmivech.

      Ve vzorku se po rozkladu kyselinou dusičnou v uzavřeném systému stanoví obsah selenu metodou atomové absorpční spektrometrie (AAS) s hydridovou technikou.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 5 % relat..

      Reprodukovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma výsledky zkoušek stejného vzorku prováděnými ve dvou laboratořích nesmí překročit 10 % relat.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 5.4. Stanovení obsahu jodu

      Účel, rozsah a princip

      Používají se dva zkušební postupy. Po mineralizaci vzorku za přídavku hydroxidu sodného jako fixativa při 520 °C se jodidy oxidují v alkalickém prostředí bromnanem a vzniklé jodičnany se stanovují metodou diferenční pulzní rozpouštěcí voltametrie. Postup je vhodný pro stanovení jodu v krmivech a premixech.

      Pro stanovení jodu v premixech se vzorek mineralizuje po přídavku hydroxidu sodného jako fixativa při 520 °C a jodidy se zoxidují manganistanem draselným na jodičnany. Po přidání jodidu draselného se uvolní jod, který se stanoví titrací thiosíranem sodným.

      Opakovatelnost

      1. Rozdíl mezi dvěma paralelními voltametrickými stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu jodu:
        od 0,5 do 5 mg/kg30 % relat.
        od 5 do 15 mg/kg1,5 mg/kg
        nad 15 mg/kg10 % relat.

      Opakovatelnost pro titrační metodu nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Mez stanovitelnosti pro voltametrickou metodu je 0,5 mg/kg. Pro titrační metodu mez stanovitelnosti nestanovena.

  1. 6. Vehikula a pojiva
    1. 6.1. Stanovení obsahu oxidu křemičitého

      Postup stanovení obsahu oxidu křemičitého je uveden v příloze č. 9, část 7.

    1. 6.2. Stanovení obsahu oxidu hlinitého

      Postup stanovení obsahu oxidu hlinitého je uveden v příloze č. 9, část 7.

  1. 7. Výpočty
    1. 7.1. Vyhodnocování a výpočet výsledků stanovení obsahu doplňkových látek pro difúzní plotnové postupy

      Účel, rozsah a princip

      Postup uvádí a specifikuje uzančně závazný způsob pro vyhodnocování a výpočet výsledků při stanovení obsahu doplňkových látek v krmivech a premixech pro difúzní plotnové postupy.

      Průměry inhibičních resp. stimulačních zón, vzniklých při stanovení doplňkových látek difusním plotnovým postupem, se měří pomocí odpichovátka s přesností nejméně na 0,1 mm. Ze souboru takto získaných hodnot se vypočítá aritmetický průměr pro každou koncentraci zkoušeného vzorku i standardu.

  1. 8. Antioxidanty
    1. 8.1. Stanovení obsahu ethoxyquinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení ethoxyquinu v krmivech.

      Ethoxyquin je ze vzorku extrahován methanolem a alikvotní podíl extraktu je po zředění vodou reextrahován do petroletheru a obsah ethoxyquinu je stanoven fluorometricky.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 8.2. Stanovení obsahu butylhydroxytoluenu, butylhydroxyanisolu a galátů
      Účel, rozsah a princip
      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu butylhydroxytoluenu, butylhydroxyanisolu a galátů v tucích.
      Vzorek se rozpustí v hexanu a butylhydroxytoluen, butylhydroxyanisol a galáty se extrahují acetonitrilem. Vlastní stanovení se provádí postupem vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) s použitím UV detekce při 280 nm.
      Opakovatelnost
      Nestanovena.
      Reprodukovatelnost
      Nestanovena.
      Mez stanovitelnosti
      Nestanovena.
  1. 9. Barviva
    1. 9.1. Stanovení obsahu kapsatinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení celkového obsahu barviva vyjádřeného jako kapsatin, převažujícího barviva papriky.

      Obsah kapsatinu se stanoví po extrakci vzorku benzenem způsobem podle Benedikta spektrofotometricky.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 9.2. Stanovení obsahu nativních a přidaných karotenoidů

      Účel, rozsah a princip

      Používají se dva postupy. Jeden specifikuje podmínky pro stanovení obsahů esterů kyseliny apo-karotinové, citranaxantinu a kantaxantinu, druhý specifikuje podmínky pro stanovení obsahu karoténů, veškerých xantofylů, luteinu a zeaxantinu.

      Vzorek se extrahuje rozpouštědlem, přečistí se postupem sloupcové chromatografie a obsah příslušného barviva se stanoví spektrofotometricky.

      Opakovatelnost

      Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 15 % relat.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

  1. 10. Konzervanty
    1. 10.1. Stanovení obsahu kyseliny mravenčí

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu kyseliny mravenčí v silážích.

      Kyselina mravenčí se stanovuje postupem podle Fuchse. Těkavé kyseliny, vydestilované ze vzorku se podrobí reakci s manganistanem draselným. Kyselina mravenčí je jako jediná oxidována v neutrálním nebo slabě alkalickém prostředí.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 10.2. Stanovení obsahu kysličníku siřičitého

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu kysličníku siřičitého v krmivech.

      Kysličník siřičitý se uvolní po okyselení vzorku krmiva proudem dusíku a jímá se do roztoku elektrolytu. Obsah kysličníku siřičitého se stanoví metodou diferenční pulzní polarografie.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

    1. 10.3. Stanovení obsahu formaldehydu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu formaldehydu v krmivech.

      Ze vzorku se po okyselení kyselinou fosforečnou izoluje formaldehyd destilací s vodní parou a formaldehyd se v destilátu stanoví po reakci s kyselinou chromotropovou fotometricky při 570 nm.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

  1. 11. Zchutňovadla
    1. 11.1. Stanovení obsahu sacharinu

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu sacharinu v krmivech.

      Sacharin se extrahuje z vodného roztoku krmiva chloroformem a jeho obsah se stanoví metodou diferenční pulzní polarografie.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

      Mez stanovitelnosti

      Nestanovena.

  1. 12. Mikrobiotika
    1. 12.1. Stanovení počtu zárodků bakterií kmene Streptococcus

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení počtu zárodků kmene Streptococcus skupiny D v krmivech a premixech.

      Stanovení počtu zárodků bakterií kmene Streptococcus se provádí na selektivních půdách podle Slanetze a Bartleye. Jako referenční půda se při stanovení používá další selektivní půda (např. KF agar) nebo u premixů vhodná neselektivní půda. Naočkované půdy jsou kultivovány při 37 °C ± 1 °C. Růst a počty kolonií se vyhodnocují po dvou a čtyřdenní kultivaci.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

    1. 12.2. Stanovení počtu zárodků bakterií kmene Bacillus

      Účel, rozsah a princip

      Postup specifikuje podmínky pro stanovení počtu zárodků kmene Bacillus v krmivech.

      Stanovení počtu zárodků bakterií kmene Bacillus se provádí anaerobní kultivací na krevním agaru při 37 °C. Počty kolonií, charakteristické pro dané mikroorganismy, se vyhodnocují po 18 - 24 hodinách.

      Opakovatelnost

      Nestanovena.

      Reprodukovatelnost

      Nestanovena.

Příloha č. 11

k vyhlášce č. 124/2001 Sb.

Laboratorní zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů

Seznam postupů fyzikálního zkoušení krmiv

Příloha č. 11 Laboratorní zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů Seznam postupů fyzikálního zkoušení krmiv
Název postupuOznačení postupu
1. Stanovení odrolu lisovaných krmivA
2. Stanovení zrnitostiA
3. Stanovení ferromagnetických příměsíA
  1. 1. Stanovení odrolu lisovaných krmiv

    Účel, rozsah a princip

    Postup specifikuje podmínky pro stanovení odrolu u granulovaných krmiv. Postup je použitelný pro všechny druhy krmiv a premixů. Odrol se stanoví vážkově jako sypký podíl po oddělení granulí na předepsaném sítu.

  1. 2. Stanovení zrnitosti

    Účel, rozsah a princip

    Postup specifikuje podmínky pro stanovení zrnitosti sypkých krmiv. Postup je použitelný pro všechny druhy krmiv a premixů. Zrnitost se stanoví vážkově jako hmotnostní podíly částic různých velikostí prosévací zkouškou konečného vzorku na předepsaných sítech.

  1. 3. Stanovení ferromagnetických příměsí

    Účel, rozsah a princip

    Postup specifikuje podmínky pro stanovení ferromagnetických příměsí. Postup je použitelný pro všechny druhy krmiv a premixů. Ferromagnetické příměsi se stanoví vážkově na základě svých magnetických vlastností po separaci ze vzorku krmiva magnetem.

Příloha č. 12

k vyhlášce č. 124/2001 Sb.

Laboratorní zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů

Seznam postupů smyslového zkoušení krmiv

Příloha č. 12 Laboratorní zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů Seznam postupů smyslového zkoušení krmiv
Název postupu ;Označení postupu
1. Posuzování barvy, struktury a konzistenceA
2. Posuzování pachuA
  1. 1. Posuzování barvy, struktury a konzistence

    Princip

    Posuzují se a stanoví odchylky od barvy typické pro dané krmivo, u struktury a konzistence kvalita opracování krmných surovin, případné porušení původního stavu krmiva, u lisovaných krmiv velikost granulí.

  1. 2. Posuzování pachu

    Princip

    Posuzuje se druh a intenzita pachu v původním stavu a po zahřátí a odchylky od pachu, který je pro dané krmivo typický.

Příloha č. 13

k vyhlášce č. 124/2001 Sb.

Laboratorní zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů

Seznam postupů speciálního zkoušení krmiv

Příloha č. 13 Laboratorní zkoušení krmiv, doplňkových látek a premixů Seznam postupů speciálního zkoušení krmiv
Název postupuOznačení postupu
1. Mikroskopie krmivA
2. Stanovení škůdců v obilovinách, luštěninách a olejnináchA
3. Stanovení škůdců v krmných směsíchA
4. Stanovení snětivosti pšeniceA
5. Stanovení druhové čistoty, nečistot a škodlivých nečistot u obilovin, luštěnin a olejninA
6. Mikroskopická identifikace a určování složek živočišného původu
  1. 1. Mikroskopie krmiv

    Slouží k identifikaci jednotlivých druhů krmiv a k určení přítomnosti semen a plodů, uvedených jako nežádoucí látky ve vyhlášce Ministerstva zemědělství č.194/1996 Sb., ve znění pozdějších předpisů, kterou se provádí zákon o krmivech. Buněčné struktury se posuzují mikroskopicky porovnáním s preparáty připravenými z jednotlivých druhů krmiv, zbavených všech cizích příměsí.

  1. 2. Stanovení škůdců v obilovinách, luštěninách a olejninách

    Princip

    Živí škůdci se zjišťují po prosátí vzorku v propadu, popř. v podílu na sítě buď pouhým okem, popř. pomocí lupy nebo stereoskopickým mikroskopem. Seznam škůdců je uveden v příloze č.2 vyhlášky Ministerstva zemědělství č. 194/1996 Sb., ve znění pozdějších předpisů, kterou se provádí zákon o krmivech.

  1. 3. Stanovení škůdců v krmných směsích

    Princip

    Živí škůdci se zjišťují po prosátí vzorku v propadu, popř. v podílu na sítě buď pouhým okem, popř. pomocí lupy nebo stereoskopickým mikroskopem. Seznam škůdců je uveden v příloze č. 2 vyhlášky Ministerstva zemědělství č. 194/1996 Sb., ve znění pozdějších předpisů, kterou se provádí zákon o krmivech.

  1. 4. Stanovení snětivosti pšenice

    Princip

    Za snětivou se považuje pšenice, která obsahuje zrna napadená snětí, snětivé kuličky, případně vykazuje pach po sněti. Konečný vzorek se vysype na světlou podložku a smyslově se posuzuje zamazání zrn sporami sněti, výskyt snětivých kuliček a pachu po sněti. Jestliže vzorek vykazuje kterýkoliv z uvedených znaků, označí se pšenice za snětivou.

  1. 5. Stanovení druhové čistoty, nečistot a škodlivých nečistot u obilovin, luštěnin a olejnin

    Princip

    Mechanicky nebo ručně se z poměrné části konečného vzorku oddělí nečistoty a škodlivé nečistoty se vyjadřují jako % podíl.

  1. 6. Mikroskopická identifikace a určování složek živočišného původu

    Princip

    Representativní a vhodně upravený vzorek se použije pro identifikaci. Komponenty živočišného původu jsou identifikovány na základě typických, mikroskopicky rozlišitelných charakteristik (např. svalová vlákna a jiné masité části, chrupavky, kosti, rohy, chlupy, štětiny, krev, peří, vaječné skořápky, rybí kosti, šupiny). Identifikace musí být provedena v prosívaných frakcích i v koncentrovaném sedimentu.

Příloha č. 14

k vyhlášce č. 124/2001 Sb.

Zkoušení homogenity

  1. 1. Homogenita premixů a krmiv s použitím premixů

    Zkoušení homogenity se uskutečňuje pomocí doplňkové látky nebo přidané aminokyseliny, dávkované do premixu nebo do krmiv s použitím premixu. Tato doplňková látka nebo aminokyselina musí být stanovitelná metodami zkoušení, které jsou uvedené v přílohách č. 7 až 10. Homogenita se zkouší v rámci jedné partie.