zrušený předpis

II. Půdy doporučené pro důkaz Mycoplasma synoviae.

  1. a) Tekutá půda
    infuze z hovězího srdce (1)90,0 ml
    esenciální vitaminy (2)0,025 ml
    roztok glukosy monohydrátu (500 g/l)2,0 ml
    prasečí sérum (inaktivované 30 min při 56 °C)12,0 ml
    roztok β-nikotinamid-adeninu dinukleotidu (10 g/l)1,0 ml
    roztok cysteiniumchloridu (10 g/l)1,0 ml
    roztok červeně fenolové (0,6 g/l)5,0 ml
    roztok penicilinu (20 000 m.j./ml)0,25 ml

    Smíchají se roztoky β-nikotinamid-adeninu dinukleotidu a cystemiumchloridu a za 10 mm se přidají k ostatním složkám.

    pH se upraví na 7,8.

  1. b) Pevná půda
    infuze z hovězího srdce (1)90,0 ml
    ionagar (3)1,4 g
    pH se upraví tak, aby bylo 7,8, sterilizuje se v autoklávu a pak se přidají:
    esenciální vitaminy (2)0,025 ml
    roztok glukosy monohydrátu (500 g/l)2,0 ml
    prasečí sérum (nezahřáté)12,0 ml
    roztok B-nicotinamid-adeninu dinukleotidu (10 g/l)1,0 ml
    roztok cysteiniumchloridu (10 g/l)1,0 ml
    roztok červeně fenolové (0,6 g/l)5,0 ml
    roztok penicilinu (20 000 m.j./ml)0,25 ml

III. Půdy doporučené pro důkaz neaviárních mykoplazmat.

  1. a) Tekutá půda
    tlumivý solný roztok podle Hankse (modifikovaný) (4)800 ml
    destilovaná voda67 ml
    infuze ze srdce a mozku (5)135 ml
    PPLO tekutá půda (6)248 ml
    roztok kvasničného výtažku (170 g/l)60 ml
    bacitracin250 mg
    meticilin250 mg
    roztok červeně fenolové (5 g/l)4,5 ml
    roztok octanu thallného (56 g/l)3 ml
    koňské sérum165 ml
    prasečí sérum165 ml
    pH se upraví na 7,4 až 7,45.
  1. b) Pevná půda
    Tlumivý solný roztok podle Hankse (modifikovaný) (4)200 ml
    DEAE - dextran200 mg
    ionagar (3)15,65 g

    Dobře se promíchá a sterilizuje v autoklávu. Ochladí se na 100 °C a přidá se do 1740 ml tekuté půdy popsané výše.

(1) Infuze z hovězího srdce

hovězí srdce (pro přípravu infuze)500 g
pepton10 g
chlorid sodný5 g
destilovaná voda do1000 ml
Sterilizuje se v autoklávu.

(2) Esenciální vitaminy

biotin100 mg
pantotenan vápenatý100 mg
choliniumchlorid100 mg
kyselina listová100 mg
i-inositol200 mg
nikotinamid100 mg
pyridoxoliumchlorid100 mg
riboflavin10 mg
thiaminiumchlorid100 mg
destilovaná voda do1000 ml

(3) Ionagar

Velmi čistý agar používaný pro mikrobiologii a imunologii se připravuje výměnou iontů, čímž vzniká produkt mající vyšší čistotu, čirost a pevnost gelu.

Obsahuje přibližně:

voda12,2 %
popel1,5 %
popel nerozpustný v kyselině0,2 %
chloridy0
fosforečnany (jako P2O5)0,3 %
celkový dusík0,3 %
měď8 μg/g
železo170 μg/g
vápník0,28 %
hořčík0,32 %

(4) Tlumivý solný roztok podle Hankse (modifikovaný)

chlorid sodný60,4 g
chlorid draselný0,32 g
síran hořečnatý heptahydrát0,08 g
chlorid hořečnatý hexahydrát0,08 g
chlorid vápenatý bezvodý0,112 g
hydrogenfosforečnan sodný dihydrát0,0596 g
dihydrogenfosforečnan draselný, bezvodý0,048 g
destilovaná voda do800 ml

(5) Infuze ze srdce a mozku

infuze z telecího mozku200 g
infuze z hovězího srdce250 g
pepton (enzymaticky připravený)10 g
glukosa2 g
chlorid sodný5 g
hydrogenfosforečnan sodný, bezvodý2,5 g
destilovaná voda do1000 ml

(6) PPLO tekutá půda

infuze z hovězího srdce50 g
pepton10 g
chlorid sodný5 g
destilovaná voda do1000 ml