Příloha č. 6
účinné od 1. 1. 2001 k vyhlášce č. 471/2000 Sb.účinné od 1. 1. 2001STŘEDISKA PRO PŘENOS EMBRYÍ
účinné od 1. 1. 2001Technologické a hygienické postupy získávání, kultivace a uchovávání embryí, vaječných buněk a přenosu embryíúčinné od 1. 1. 2001Část I.
- účinné od 1. 1. 20011. Při získávání, kultivaci a uchovávání embryí se dodržují tyto zásady hygieny:
- účinné od 1. 1. 2001a) všechny nástroje a média, které přicházejí do styku s dárkyní, embryi a příjemkyní jsou sterilní a jsou uzpůsobeny tak, aby se omezila možnost sekundární kontaminace,
- účinné od 1. 1. 2001b) produkty živočišného původu používané do vyplachovacích, kultivačních a zmrazovacích médií pocházejí ze zdrojů, které nepředstavují riziko pro zdraví zvířat, nebo jsou před použitím ošetřeny takových způsobem, který toto riziko vylučuje,
- účinné od 1. 1. 2001c) kontejnery pro uložení a transport embryí jsou před každým naplněním dezinfikovány,
- účinné od 1. 1. 2001d) tekutý dusík nebyl předtím použit pro jiné produkty živočišného původu.
- účinné od 1. 1. 20012. Embrya se získávají zpravidla nechirurgickým výplachem děložních rohů dárkyně sedmý den po inseminaci. Výplach embryí se provádí v místě, které je možno snadno čistit.
- účinné od 1. 1. 20013. Embrya se izolují, hodnotí, promývají a zpracovávají v místnosti izolované od místa výplachu.
- účinné od 1. 1. 20014. Embrya se vyhledávají stereomikroskopem a vyhledaná embrya se přenášejí mikropipetou do manipulačního média.
- účinné od 1. 1. 20015. Embrya se hodnotí podle části II. této přílohy a poté se speciálně ošetřují
- účinné od 1. 1. 2001a) mechanickými, 10 x opakovanými oplachy v kultivačním mediu; mezi jednotlivými oplachy se vymění mikropipeta a pro embrya každé dárkyně jsou použita nová média,
- účinné od 1. 1. 2001b) metodou enzymatického ošetření, která je účinná při kontaminaci viry adherujícími na zonu pellucidu, jejíž součástí je krátkodobé vystavení embryí působení trypsinu.
- účinné od 1. 1. 20016. Embrya se uchovávají
- účinné od 1. 1. 2001a) krátkodobě tak, že
- účinné od 1. 1. 20011. po vyhledání, hodnocení a dekontaminaci se přemísťují do 2 cm3 kultivačního media,
- účinné od 1. 1. 20012. uchovávají se při pokojové teplotě,
- účinné od 1. 1. 20013. před přenosem se plní do označených pejet o průměru 2,4 mm,
- účinné od 1. 1. 2001b) dlouhodobě tak, že
- účinné od 1. 1. 20011. ve zmrazovacím médiu v pejetách se vkládají do zmrazovače,
- účinné od 1. 1. 20012. zmrazovací režim je dán použitým médiem,
- účinné od 1. 1. 20013. při dosažení teploty nejméně –30 °C se pejety přenesou do tekutého dusíku.
- účinné od 1. 1. 2001c) vitrifikací
- účinné od 1. 1. 2001a) krátkodobě tak, že
- účinné od 1. 1. 20017. Před rozmrazením se pejeta vyjme z tekutého dusíku, ponechá se na vzduchu asi 10 sekund a poté ponoří na 10 sekund do vodní lázně o teplotě 37 °C. Vymývání glycerinu se provádí ve 3 stupních pomocí sacharózy. Přenos je nutno provést ihned po rozmrazení a vymytí glycerinu. Při použití etylenglykolu je nutno provést přenos ihned po rozmrazení.
- účinné od 1. 1. 20018. Přenos embryí se provádí nechirurgicky speciální aparaturou, která umožňuje provést přenos hygienicky, lehce, atraumaticky. Při přenosu embryí se dodržují hygienické podmínky.
- účinné od 1. 1. 20019. Vaječné buňky se získávají z ovarií odporažených dárkyň „post mortem,, nebo metodou OPU punkcí ovariálních folikulů od žijících dárkyň. Vaječné buňky se používají v rámci programu in vitro produkce embryí. Embrya vyprodukovaná v podmínkách in vitro se hodnotí a uchovávají stejně jako embrya vzniklá in vivo.
účinné od 1. 1. 2001Postupy hodnocení kvality embryí a vaječných buněkúčinné od 1. 1. 2001Část II.
- účinné od 1. 1. 20011. Orientační posouzení kvality embryí se provádí mikroskopicky již při jejich vyhledávání. K dalšímu použití se určují pouze embrya, která odpovídají stupněm vývoje délce postovulačního období.
- účinné od 1. 1. 20012. Embrya se po zhodnocení zařadí do kvalitativních skupin. Morfologicky nejkvalitnější embrya jsou vhodná ke zmrazování, embrya se zastaveným vývojem a dalšími abnormalitami se vyřazují.
- účinné od 1. 1. 20013. Pejety se zmrazenými embryi nebo jejich zátky se popisují (pejety směrem od zavařeného konce), Při popisu se uvádí
- účinné od 1. 1. 2001a) číslo pejety, které se přenáší z deníku zmrazování embryí,
- účinné od 1. 1. 2001b) číslo přenosového týmu (veterinární registrační číslo),
- účinné od 1. 1. 2001c) značka plemene (alfabetické označení),
- účinné od 1. 1. 2001d) matka embrya, (devítimístné číslo ušní známky),
- účinné od 1. 1. 2001e) otec embrya, (značka registru a číslo registru),
- účinné od 1. 1. 2001f) den, měsíc, rok zmrazení, přičemž každý údaj je dvojmístný,
- účinné od 1. 1. 2001g) počet embryí v pejetě (v případě přímého přenosu se zmrazuje v pejetě vždy jen jedno embryo).
účinné od 1. 1. 2001Požadavky na technické a přístrojové vybavení střediska pro přenos embryíúčinné od 1. 1. 2001Část III.
| laboratoř | zdroje teplé vody, destilovaná voda, sterilizátor, chladnice a mraznice, vodní lázeň na medium, stereomikroskop se spodním osvětlením |
|---|---|
| zařízení pro čištění, sterilizaci a desinfekci | |
| místnost pro kontejnery se zmrazenými embryi | přepravní nádoby na dusík, polystyrénové nádoby na dusík a zmrazovače embryí |
| další pomůcky a zařízení potřebná pro výplach, hodnocení, uchovávání a přenos embryí | zejména vyplachovací FOLEYE a katetry, vyplachovací, manipulační, kultivační, zmrazovací a vymývací medium, pejety, přenosné aparatury s krytem, desinfekční prostředky |
účinné od 1. 1. 2001Druh záznamů o přenosu embryí a vaječných buněk a způsob jejich předávání osobě pověřené vedením ústřední evidenceúčinné od 1. 1. 2001Část IV.
- účinné od 1. 1. 20011. Osoba oprávněná k přenosu embryí vede záznamy
- účinné od 1. 1. 2001a) přenosových týmů,
- účinné od 1. 1. 2001b) dárkyň,
- účinné od 1. 1. 2001c) příjemkyň,
- účinné od 1. 1. 2001d) zmrazených embryí,
- účinné od 1. 1. 2001e) prodeje a vývozu embryí.
- účinné od 1. 1. 20012. Tyto záznamy předává osoba oprávněná k přenosu embryí osobě pověřené vedením ústřední evidence v rozsahu a v termínech stanovených touto osobou.