Český lékopis 1997

účinné od 1. 2. 1998Iontově selektivní elektrody mohou být elektrody s krystalickou či nekrystalickou membránou nebo s vhodnou tuhou matricí (např. skleněné elektrody) nebo elektrody s nabitými (pozitivně či negativně) či nenabitými pohyblivými nosiči náboje či tzv. senzitivované elektrody (enzym-substrát elektrody, plynové indikační elektrody). Srovnávací elektrodou je zpravidla argentchloridová nebo kalomelová elektroda, případně se solným můstkem naplněným vhodným neinterferujícím roztokem.

účinné od 1. 2. 1998Postup měření. Měření se provádí při konstantní teplotě ±0,5 °C, přičemž se bere v úvahu změna směrnice části kalibrační křivky elektrody s teplotou (viz tab. 2.2.36-1). Upraví se iontová síla a případně i pH roztoku, který má být analyzován použitím tlumivých roztoků popsaných v článku, a elektroda se uvede do rovnovážného stavu ponořením do analyzovaného roztoku za pomalého a rovnoměrného míchání, dokud se měřená hodnota neustálí.

účinné od 1. 2. 1998Je-li elektrodový systém často používán, kontroluje se pravidelně opakovatelnost a stabilita odezvy a linearita kalibrační křivky či výpočtový algoritmus v koncentračním rozmezí zkoušeného roztoku. Není-li systém používán často, provede se tato zkouška před každou sérií měření. Odezva elektrody může být považována za lineární, pokud je směrnice S kalibrační křivky přibližně rovna k/z_i na jednotku pC_i.

1. účinné od 1. 2. 1998Metoda I - Přímá kalibrace

   účinné od 1. 2. 1998Změří se alespoň třikrát za sebou potenciál nejméně tří porovnávacích roztoků pokrývajících očekávanou koncentraci ve zkoušeném roztoku. Vypočte se kalibrační křivka nebo se vynese do grafu střední hodnota získaného potenciálu E proti koncentraci stanovovaného iontu vyjádřené jako -log C_i nebo pC_i.

   účinné od 1. 2. 1998Připraví se zkoušený roztok, jak je předepsáno v článku. Změří se třikrát příslušný potenciál a z jeho průměrné hodnoty se určí pomocí kalibrační křivky koncentrace stanovovaného iontu.

1. účinné od 1. 2. 1998Metoda II - Vícenásobný standardní přídavek

   účinné od 1. 2. 1998Připraví se zkoušený roztok, jak je předepsáno v článku. Změří se rovnovážný potenciál E_T tohoto roztoku o objemu V_T, který obsahuje neznámou koncentraci _TC stanovovaného iontu. Provedou se alespoň tři následné přídavky porovnávacího roztoku o koncentraci C_s, která leží uvnitř lineární části kalibrační křivky, a o objemu V_s, který je zanedbatelný ve srovnání s V_T (V_s ≤ 0,01 V_T). Po každém přídavku se změří potenciál a vypočítá se potenciální rozdíl ΔE mezi tímto změřeným potenciálem a E_T.

   účinné od 1. 2. 1998Mezi ΔE a koncentrací stanovovaného iontu platí vztah:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998nebo

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998v němž značí:

   1. účinné od 1. 2. 1998V_T - objem zkoušeného roztoku,
   2. účinné od 1. 2. 1998C_T - koncentraci stanovovaného iontu ve zkoušeném roztoku,
   3. účinné od 1. 2. 1998V_s - přidaný objem porovnávacího roztoku,
   4. účinné od 1. 2. 1998C_s - koncentraci stanovovaného iontu v porovnávacím roztoku,
   5. účinné od 1. 2. 1998S - směrnici kalibrační křivky elektrody. Směrnice se stanovuje experimentálně při konstantní teplotě měřením rozdílu mezi potenciály získanými pomocí dvou porovnávacích roztoků, jejichž koncentrace se liší desetkrát a leží v oblasti, kde je kalibrační křivka lineární.

   účinné od 1. 2. 1998Vynese se do grafu závislost (osa pořadnic - y) proti V_s(osa úseček - x) a extrapoluje se získaná závislost (přímka), aby protnula osu x. V tomto průsečíku je koncentrace C_T stanovovaného iontu ve zkoušeném roztoku dána rovnicí:

   účinné od 1. 2. 1998

1. účinné od 1. 2. 1998Metoda III - Jeden standardní přídavek

   účinné od 1. 2. 1998K objemu V_T zkoušeného roztoku připraveného tak, jak je předepsáno v článku, se přidá objem V_s porovnávacího roztoku obsahujícího takové množství stanovovaného iontu, o němž je známo, že poskytuje odezvu v lineární části kalibrační křivky. Za stejných podmínek se připraví slepá zkouška. Změří se alespoň třikrát potenciály zkoušeného roztoku a slepé zkoušky před a po přidání porovnávacího roztoku. Vypočte se koncentrace C_Tstanovovaného iontu pomocí následující rovnice a provede se nezbytná korekce na slepou zkoušku:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998v níž značí:

   1. účinné od 1. 2. 1998V_T - objem zkoušeného roztoku nebo slepé zkoušky,
   2. účinné od 1. 2. 1998C_T - koncentraci stanovovaného iontu ve zkoušeném roztoku,
   3. účinné od 1. 2. 1998V_s - přidaný objem porovnávacího roztoku,
   4. účinné od 1. 2. 1998C_s - koncentraci stanovovaného iontu v porovnávacím roztoku,
   5. účinné od 1. 2. 1998ΔE - rozdíl mezi průměrnými hodnotami potenciálů měřenými před a po přidání V_s,
   6. účinné od 1. 2. 1998S - směrnici kalibrační křivky elektrody stanovenou experimentálně při konstantní teplotě proměřením rozdílu mezi potenciály získanými pomocí dvou porovnávacích roztoků, jejichž koncentrace se liší desetkrát a které jsou v koncentračním rozmezí, v němž je kalibrační závislost lineární.

1. účinné od 1. 2. 19982.2.37 Rentgenová fluorescenční spektrometrie³)

   účinné od 1. 2. 1998Rentgenová (vlnově disperzní) fluorescenční spektrometrie je metoda, která používá měření intenzity fluorescenčního záření emitovaného prvky s atomovým číslem mezi 11 a 92 excitovanými primárním rentgenovým zářením. Intenzita fluorescence emitovaná daným prvkem závisí na koncentraci tohoto prvku ve vzorku a také na absorpci dopadajícího a fluorescenčního záření matricí vzorku. Při stopových koncentracích, kde je kalibrační křivka lineární, intenzita fluorescenčního záření emitovaného prvkem v dané matrici při dané vlnové délce je úměrná koncentraci tohoto prvku a nepřímo úměrná hmotnostnímu absorpčnímu koeficientu matrice při této vlnové délce.

   účinné od 1. 2. 1998Postup stanovení. Seřízení a použití přístroje se provádí podle pokynů uvedených výrobcem. Tekuté vzorky se umístí přímo do přístroje, pevné vzorky se nejprve slisují do tablet, někdy po smíchání s vhodným pojivem.

   účinné od 1. 2. 1998Ke stanovení koncentrace prvku ve vzorku je nezbytné změřit četnost impulzů (po odečtení pozadí), produkovaných jednou nebo několika standardními látkami obsahujícími známá množství tohoto prvku v dané matrici, a vypočítat nebo změřit hmotnostní absorpční koeficient matrice analyzovaného vzorku.

   účinné od 1. 2. 1998Kalibrace. Z kalibračního roztoku nebo řady naředěných roztoků analyzovaného prvku v různých matricích se stanoví směrnice kalibrační křivky b₀ z následujícího vztahu:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998v němž značí:

   1. účinné od 1. 2. 1998μ_M - absorpční koeficient matrice M, vypočítaný nebo změřený,
   2. účinné od 1. 2. 1998 - četnost impulzů po odečtení pozadí (dále jen četnost impulzů),
   3. účinné od 1. 2. 1998C - koncentrace stanovovaného prvku ve standardní látce.

   účinné od 1. 2. 1998Hmotnostní absorpční koeficient matrice vzorku. Jestliže je empirický vzorec analyzovaného vzorku známý, vypočítá se jeho hmotnostní absorpční koeficient ze známého prvkového složení a tabelovaných hmotnostních absorpčních koeficientů prvků. Není-li prvkové složení známé, stanoví se hmotnostní absorpční koeficient matrice vzorku změřením intenzity rozptýleného rentgenového záření I_U (Comptonův rozptyl) z následujícího vztahu:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998v němž značí:

   1. účinné od 1. 2. 1998μ_MP - hmotnostní absorpční koeficient vzorku,
   2. účinné od 1. 2. 1998I_U - intenzitu rozptýleného rentgenového záření.

   účinné od 1. 2. 1998Stanovení četnosti impulzů stanovovaného prvku ve vzorku. Vypočítá se četnost impulzů stanovovaného prvku ze změřené intenzity fluorescenční linie a intenzity linie (linií) pozadí.

   účinné od 1. 2. 1998Výpočet stopového obsahu. Jestliže koncentrace prvku se nachází v lineární části kalibrační křivky, může být vypočítána s použitím následujícího vztahu:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998v němž značí:

   1. účinné od 1. 2. 1998f - faktor zředění.

1. účinné od 1. 2. 19982.2.38 Měrná elektrická vodivost

   účinné od 1. 2. 1998Měrná elektrická vodivost (konduktivita), dále jen měrná vodivost roztoku (к), je definována jako převrácená hodnota měrného odporu (rezistivity) (ρ), který je definován jako podíl intenzity elektrického pole a proudové hustoty. Elektrický odpor (rezistance) R (Ω) vodiče o průřezu S (cm²) a délce l (cm) je vyjádřen vztahem:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998Mezinárodní jednotkou (SI) měrné vodivosti je siemens na metr (S.m^-1); obvykle se měrná vodivost roztoku vyjadřuje v S.cm^-1, mS.cm^-1 nebo μS.cm^-1. Jednotkou měrného odporu je Ω.m, obvykle se užívá Ω.cm. Pokud není uvedeno jinak, je referenční teplota pro měření měrné vodivosti a měrného odporu 20 °C.

   účinné od 1. 2. 1998Zařízení. Používaný přístroj (konduktometr nebo přístroj na měření odporu - ohmmetr) měří odpor kapaliny mezi elektrodami vodivostní sondy ponořené do měřené kapaliny. Přístroj je vybaven zařízením na kompenzaci teploty nebo přesným teploměrem. Aby nedocházelo k polarizaci elektrod vodivostní sondy, používá se při měření měrné vodivosti kapalin střídavý elektrický proud.

   účinné od 1. 2. 1998Vodivostní sonda je tvořena dvěma paralelními platinovými elektrodami vzdálenými od sebe l a pokrytými platinovou černí, z nichž každá má plochu povrchu S. Elektrody jsou chráněny skleněnou trubicí, která umožňuje dobrou výměnu mezi roztokem a elektrodami.

   účinné od 1. 2. 1998Konstanta vodivostní sondy (K) je dána v cm^-1 podle následujícího vzorce:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998v němž značí:

   1. účinné od 1. 2. 1998α - bezrozměrný číselný koeficient charakteristický pro konstrukci vodivostní sondy.

   účinné od 1. 2. 1998Zkoumadla. Připraví se tři standardní roztoky chloridu draselného R obsahující 0,7455 g, 0,0764 g a 0,0149 g chloridu draselného R na 1000 g roztoku s použitím vody prosté oxidu uhličitého R připravené z vody destilované R, jejíž měrný odpor nepřesahuje 2 μS.cm^-1.

   účinné od 1. 2. 1998Měrný odpor a měrná vodivost těchto tří roztoků při 20 °C je uvedena v tabulce 2.2.38-1.

   účinné od 1. 2. 1998Tab. 2.2.38-1 Měrný odpor a měrná vodivost standardních roztoků chloridu draselného při 20 °C

   účinné od 1. 2. 1998

   Tab. 2.2.38-1 Měrný odpor a měrná vodivost standardních roztoků chloridu draselného při 20 °C

   Koncentrace v g/1000,0 g roztoku	Měrná vodivost μS.cm-1	Měrný odpor Ω.cm
   0,7455	1330	752
   0,0746	133,0	7519
   0,0149	26,6	37594

   účinné od 1. 2. 1998Pokud stanovení nemůže být provedeno při 20 °C, použije se ke korekci měrné elektrické vodivosti roztoků chloridu draselného uvedených v předcházející tabulce následující vzorec, který je platný pouze pro teploty v rozsahu (20 ± 5) °C:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998v němž značí:

   1. účinné od 1. 2. 1998T - teplotu měření předepsanou v článku,
   2. účinné od 1. 2. 1998κ_T - měrnou vodivost roztoku KC1 při teplotě T,
   3. účinné od 1. 2. 1998κ₂₀ - měrnou vodivost roztoku KC1 při 20 °C.

   účinné od 1. 2. 1998Stanovení konstanty vodivostní sondy

   účinné od 1. 2. 1998Vybere se vodivostní sonda, která je vhodná pro měření měrné vodivosti zkoušeného roztoku. Čím je vyšší očekávaná hodnota měrné vodivosti, tím je třeba použít vodivostní sondy o vyšší konstantě (nízké ρ), aby změřená hodnota R byla co největší pro použitý přístroj. Běžně používané vodivostní sondy mají konstanty řádově 0,1 cm^-1, 1 cm^-1 a 10 cm^-1. Použije se standardní roztok chloridu draselného R, který je vhodný pro měření. Sonda se opláchne několikrát vodou prostou oxidu uhličitého R, která byla připravena z vody destilované R, a nejméně dvakrát standardním roztokem chloridu draselného použitým ke stanovení konstanty vodivostní sondy. Změří se elektrická vodivost (konduktance) nebo elektrický odpor (rezistance) vodivostní sondy při (20 ± 0,1) °C nebo při teplotě předepsané v článku. Konstanta K (v cm^-1) je dána vztahem:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998v nichž značí:

   1. účinné od 1. 2. 1998K_KCl - tabulkovou měrnou vodivost použitého standardního roztoku chloridu draselného R (μS.cm^-1)
   2. účinné od 1. 2. 1998G_KCl - elektrickou vodivost použitého standardního roztoku chloridu draselného R změřenou za stejných podmínek jako u zkoušeného vzorku (μS),
   3. účinné od 1. 2. 1998R_KCl - odpor standardního roztoku chloridu draselného R (MΩ).

   účinné od 1. 2. 1998Změřená konstanta K vodivostní sondy se může lišit o 5 % od dané hodnoty.

2. účinné od 1. 2. 1998Poznámka: K některým konduktometrům je dodávána pouze jedna vodivostní sonda. Její konstanta (K) se stanoví za použití standardního roztoku chloridu draselného R, který je vhodný pro vlastní měření.

účinné od 1. 2. 1998Stanovení měrné vodivostí vody nebo zkoušeného roztoku

účinné od 1. 2. 1998Po kalibraci přístroje jedním ze standardních roztoků se opláchne vodivostní sonda několikrát vodou prostou oxidu uhličitého R připravenou z vody destilované R a nejméně dvakrát zkoušenou vodou nebo zkoušeným roztokem při (20 ± 0,1) °C nebo při teplotě předepsané v článku. Provedou se postupná měření, jak je předepsáno v článku.

1. účinné od 1. 2. 19982.2.39 Stanovení distribuce molekulových hmotností v dextranu

   účinné od 1. 2. 1998Distribuce (zastoupení) jednotlivých molekulových hmotností v dextranu se stanoví metodou vylučovací chromatografie (2.2.30).

   účinné od 1. 2. 1998Zkoušený roztok. 0,200 g zkoušené látky se rozpustí v mobilní fázi a zředí se jí na 10 ml.

   účinné od 1. 2. 1998Značkovací roztok. 5 mg glukosy R a 2 mg dextranu V₀ CRL se rozpustí v 1 ml mobilní fáze.

   účinné od 1. 2. 1998Kalibrační roztoky. Odděleně se rozpustí vždy v 1 ml mobilní fáze 15 mg kalibračního dextranu 4 CRL, 15 mg kalibračního dextranu 10 CRL, 20 mg kalibračního dextranu 40 CRL, 20 mg kalibračního dextranu 70 CRL a 20 mg kalibračního dextranu 250 CRL.

   účinné od 1. 2. 1998Roztok pro test způsobilosti systému. Rozpustí se buď 20 mg testovacího dextranu 40 CRL (pro dextran 40), nebo 20 mg testovacího dextranu 60/70 CRL (pro dextran 60 a dextran 70) v 1 ml mobilní fáze.

   účinné od 1. 2. 1998Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

   1. účinné od 1. 2. 1998- kolony délky 0,3 m a vnitřního průměru 10 mm, naplněné agarosou síťovanou pro chromatografii R, nebo do série spojených kolon délky 0,3 m a vnitřního průměru 10 mm naplněných gelem hydroxylovaného polyetheru pro chromatografii R,
   2. účinné od 1. 2. 1998- mobilní fáze připravené ze 7 g síranu sodného bezvodého R a 1 g chlorbutanolu R v 1 l vody R při průtokové rychlosti 0,5 ml/min až 1,0 ml/min udržované v konstantním rozmezí ±1 %/h,
   3. účinné od 1. 2. 1998- diferenčního refraktometru jako detektoru,
   4. účinné od 1. 2. 1998- dávkovacího zařízení se smyčkou 100 μl až 200 μl.

   účinné od 1. 2. 1998Teplota systému se udržuje konstantní (±0,1 °C).

   účinné od 1. 2. 1998Kalibrace chromatografického systému. Nastříkne se opakovaně zvolený objem značkovacího roztoku. Chromatogram ukáže dva píky, z nichž první odpovídá dextranu V₀ CRL a druhý glukose R. Z elučního objemu píku dextranu V₀ se počítá volný objem V₀ a z elučního objemu píku glukosy se spočítá celkový objem V_i.

   účinné od 1. 2. 1998Nastříkne se zvolený objem každého z kalibračních roztoků. Zakreslí se pečlivě základní linie všech chromatogramů. Každý chromatogram se rozdělí na ρ (nejméně šedesát) stejně velkých vertikálních úseků (odpovídajících stejným elučním objemům). V každém úseku i odpovídajícím elučnímu objemu V_i se změří výška linie chromatogramu y nad základní linií a vypočítá se distribuční koeficient K_i za použití výrazu:

   účinné od 1. 2. 1998

   1. účinné od 1. 2. 1998v němž značí:
      1. účinné od 1. 2. 1998V₀ - volný objem kolony stanovený pomocí píku dextranu V₀ CRL na chromatogramu značkovacího roztoku,
      2. účinné od 1. 2. 1998V_t - celkový objem kolony stanovený pomocí píku glukosy R na chromatogramů značkovacího roztoku,
      3. účinné od 1. 2. 1998V_i - eluční objem úseku i na chromatogramu jednotlivých kalibračních roztoků.

   účinné od 1. 2. 1998Provede se kalibrace za použití některé z následujících metod.

   účinné od 1. 2. 1998Kalibrace grafická. S použitím výrazu (1) se vypočítá pro každý kalibrační dextran CRL distribuční koeficient K_max odpovídající maximální výšce linie chromatogramů. Hodnoty se vynesou do grafu na semilogaritmický papír (na osu x) proti deklarované molekulové hmotnosti odpovídající maximální výšce linie chromatogramu (M_max) každého z kalibračních dextranů a glukosy. Získanými body se proloží první kalibrační křivka, přičemž se extrapoluje z bodu K_max vypočítaného pro kalibrační dextran 250 CRL k nejnižší vypočítané hodnotě K získané pro tento CRL (viz obr. 2.2.39-1). S využitím této první kalibrační křivky se pro každý chromatogram transformují všechny hodnoty K_i na odpovídající molekulové hmotnosti M_i, čímž se získá distribuce molekulových hmotností. Pro každý kalibrační dextran se pomocí rovnice (3) uvedené níže vypočítá průměrná molekulová hmotnost M_w Jestliže se vypočítané hodnoty M_w neliší o více než 5 % od hodnot deklarovaných pro každý kalibrační dextran a průměrný rozdíl je v rozmezí ±3 %, kalibrační křivka může být použita pro stanovení distribuce molekulových hmotností. V opačném případě se výše popsaný postup opakuje, až se vypočítané a deklarované hodnoty M_w neliší o více než 5 %.

   účinné od 1. 2. 1998Kalibrace výpočtem křivky. Z rovnic (2) a (3) uvedených níže se použitím vhodné metody⁴) vypočítají hodnoty pro b₁, b₂, b₃, b₄ a b₅ tak, aby se hodnoty M_w pro kalibrační dextrany lišily nejvýše o 5 % od hodnot deklarovaných a M_w glukosy činila 180 ± 2:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998kde značí:

   1. účinné od 1. 2. 1998p - počet úseků dělících chromatogramy,
   2. účinné od 1. 2. 1998y_i - výšku chromatografické linie nad základní linií v úseku i,
   3. účinné od 1. 2. 1998M_i - molekulovou hmotnost v úseku i.

   účinné od 1. 2. 1998Zkouška způsobilosti systému. Nastříkne se zvolený objem roztoku pro zkoušku způsobilosti systému.

   účinné od 1. 2. 1998Průměrná molekulová hmotnost testovacího dextranů CRL. Vypočítá se průměrná molekulová hmotnost M_w způsobem popsaným v odstavci "Kalibrace chromatografického systému" za použití buď kalibrační křivky, nebo hodnot b₁, b₂, b₃, b₄ a b₅, získaných výše uvedeným způsobem. Zkoušku lze hodnotit pouze v případě, že M_w je:

   1. účinné od 1. 2. 1998- 41 000 až 47 000 (testovací dextran 40 CRL),
   2. účinné od 1. 2. 1998- 67 000 až 75 000 (testovací dextran 60/70 CRL).
   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998Obr. 2.2.39-1 Příklad kalibrační křivky

   účinné od 1. 2. 1998Tečkovaná čára odpovídá extrapolované části křivky. Vodorovné přímky ve spodní části obrázku znázorňují šířku a polohu chromatografické linie každého z kalibračních dextranů.

   účinné od 1. 2. 1998Průměrná molekulová hmotnost 10% vysoké frakce dextranu. Pro 10% vysokou frakci dextranů eluovanou v úseku chromatogramu n se vypočítá M_w podle vzorce:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998kde n je dáno výrazy:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998v nichž značí:

   1. účinné od 1. 2. 1998p - počet úseků dělících chromatogram,
   2. účinné od 1. 2. 1998y_i - výšku linie chromatogramu nad základní linií v úseku i,
   3. účinné od 1. 2. 1998M_i - molekulovou hmotnost v úseku i.

   účinné od 1. 2. 1998Zkoušku lze hodnotit pouze v případě, že M_w je:

   1. účinné od 1. 2. 1998- 110 000 až 130 000 (testovací dextran 40 CRL),
   2. účinné od 1. 2. 1998- 190 000 až 230 000 (testovací dextran 60/70 CRL).

   účinné od 1. 2. 1998Průměrná molekulová hmotnost 10% nízké frakce dextranu. Pro 10% nízkou frakci dextranu eluovanou v úseku m a před ním se vypočítá M_w podle vzorce:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998kde m je dáno výrazy:

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998

   účinné od 1. 2. 1998v nichž značí:

   1. účinné od 1. 2. 1998p - počet úseků dělících chromatogramy,
   2. účinné od 1. 2. 1998y_i - výšku linie chromatogramu nad základní linií v úseku i,
   3. účinné od 1. 2. 1998M_i - molekulovou hmotnost v úseku i.
   1. účinné od 1. 2. 1998Zkoušku lze hodnotit pouze v případě, že M_w 10% nízké frakce dextranu je:
      1. účinné od 1. 2. 1998- 6000 až 8500 (testovací dextran 40 CRL),
      2. účinné od 1. 2. 1998- 7000 až 11 000 (testovací dextran 60/70 CRL).

   účinné od 1. 2. 1998Distribuce molekulových hmotností zkoušeného dextranu. Nastříkne se zvolený objem zkoušeného roztoku a vypočítají se M_w pro celkovou distribuci molekulových hmotností, M_w pro 10% vysokou frakci dextranu a M_w pro 10% nízkou frakci dextranu způsobem popsaným v odstavci "Zkouška způsobilosti systému".

1. účinné od 1. 2. 19982.2.40 Spektrometrie v blízké infračervené oblasti

   účinné od 1. 2. 1998Spektrometrie v blízké infračervené oblasti je metoda, která se uplatňuje zejména při identifikaci organických látek. Přestože jsou spektra omezena na pásy kombinačních vibrací a overtonů fundamentálních vibrací C-H, N-H, O-H a S-H, mají obvykle vysokou informační hodnotu. Spektra však jsou závislá na mnoha parametrech, jako jsou velikost částic, polymorfismus, zbytková rozpouštědla, vlhkost ap., které nemohou být vždy kontrolovány. Proto není obvykle možné přímo porovnat spektrum zkoušené látky s referenčním spektrem a je nutno provést vhodné, validované matematické zpracování naměřených dat.

   účinné od 1. 2. 1998Přístroje. Spektrometry pro měření spekter v blízké infračervené oblasti mají tyto části:

   1. účinné od 1. 2. 1998- filtr, mřížku nebo interferometr vhodné pro měření v oblasti elektromagnetického záření přibližně 780 nm až 2500 nm (12821 cm^-1 až 4000 cm^-1),
   2. účinné od 1. 2. 1998- zařízení na sběr a měření intenzity prošlého nebo odraženého záření (transmise nebo reflexe), jako jsou integrační koule, sonda s optickým vláknem ap., ve spojení s vhodným detektorem,
   3. účinné od 1. 2. 1998- prostředky pro matematické zpracování naměřených spektrálních dat.

   účinné od 1. 2. 1998Příprava vzorku

   účinné od 1. 2. 1998Pro transmisní měření. Tato metoda se používá převážně pro měření kapalin, zředěných nebo nezředěných, a pro roztoky pevných látek.

   účinné od 1. 2. 1998Vzorky se měří buď v kyvetě vhodné tloušťky (obvykle 0,5 mm až 4 mm) propustné v blízké infračervené oblasti, nebo po ponoření vhodné sondy s optickým vláknem, která umožňuje změření spektra v oblasti odpovídající specifikacím přístroje.

   účinné od 1. 2. 1998Při měření spekter kapalin v blízké infračervené oblasti je třeba brát v úvahu vliv teploty a ostatní možné fyzikální vlivy vyvolávající změny ve spektrech.

   účinné od 1. 2. 1998Ve všech případech je třeba provést kompenzaci rušivých vlivů pozadí způsobem, který odpovídá optickému uspořádání přístroje, např. se odečte referenční spektrum vzduchu (u kapalin) nebo rozpouštědla (u roztoků) od spektra zkoušené látky.

   účinné od 1. 2. 1998Pro měření difuzním odrazem. Tato metoda se používá převážně pro měření pevných látek.

   účinné od 1. 2. 1998Vzorky se měří ve vhodném zařízení. Při měřeních s optickou sondou je nutno zajistit konstantní polohu sondy během měření spekter a maximální možnou reprodukovatelnost podmínek měření pro jednotlivé vzorky.

   účinné od 1. 2. 1998Ve všech případech je třeba provést kompenzaci rušivých vlivů pozadí způsobem, který odpovídá optickému uspořádání přístroje, např. je třeba odečíst referenční spektrum vnitřního nebo vnějšího reflexního standardu od spektra zkoušené látky.

   účinné od 1. 2. 1998Rovněž je nutno věnovat pozornost vlivu velikosti částic, dále stavu hydratace nebo solvatace.

   účinné od 1. 2. 1998Pro měření transflektance. Používá se převážně pro měření kapalin, zředěných nebo nezředěných, a pro pevné látky v roztoku nebo v suspenzi.

   účinné od 1. 2. 1998Vzorek se měří v kyvetě, do které se ve vhodné koncentraci vpraví inertní látky neabsorbující v blízké infračervené oblasti (např. kovové částice nebo oxid titaničitý). Měření se provádí způsobem popsaným v odstavcích "Pro transmisní měření" a "Pro měření difuzním odrazem".

   účinné od 1. 2. 1998Kontrola správné funkce přístroje

   účinné od 1. 2. 1998Přístroj nutno používat podle pokynů výrobce a v pravidelných intervalech provádět předepsaná ověřování.

   účinné od 1. 2. 1998Ověření stupnice vlnových délek (neprovádí se u přístrojů s filtrem). Pro ověření použité stupnice vlnových délek (obvykle v rozsahu 780 nm až 2500 nm) se použije vhodný standard (nebo několik standardů), který má charakteristická maxima v oblasti vlnových délek, v níž se provádí měření, např. polystyren nebo oxidy vzácných zemin.

   účinné od 1. 2. 1998Ověření reprodukovatelnosti měření vlnových délek (neprovádí se u přístrojů s filtrem). Pro ověření reprodukovatelnosti vlnových délek se použije vhodný standard (nebo několik standardů), např. polystyren nebo oxidy vzácných zemin. Směrodatná odchylka vlnových délek odpovídá specifikaci přístroje.

   účinné od 1. 2. 1998Ověření opakovatelností odezvy detektoru. Pro ověření opakovatelnosti odezvy detektoru se použije vhodný standard (nebo několik standardů), např. reflexní termoplastické pryskyřice, k nimž byly přidány saze. Směrodatná odchylka maxima odezvy musí odpovídat specifikaci přístroje.

   účinné od 1. 2. 1998Ověření fotometrického šumu. Pro měření šumu se použije vhodný reflexní standard, např. bílá keramická destička nebo termoplastické pryskyřice. Změří se v rozsahu spektra 100% linie tohoto standardu dle návodu výrobce a vypočte se šum buď jako mezivrcholová hodnota signálu, nebo jako směrodatná odchylka odezev pro danou vlnovou délku. Hodnota šumu musí odpovídat specifikaci přístroje.

   účinné od 1. 2. 1998Vytvoření knihovny referenčních spektrálních dat

   účinné od 1. 2. 1998Zaznamenají se spektra vhodného počtu šarží substance ověřených způsobem předepsaným v článku a vykazujících změny typické pro zkoušenou látku (např. výrobce, velikost částic ap.). Sada spekter představuje informaci, která definuje hranici podobnosti pro danou látku a je vstupním údajem do spektrální databáze používané pro identifikaci této látky. Počet látek v databázi závisí na dané aplikaci.

   účinné od 1. 2. 1998Soubor spekter uložených v databázi může mít různou formu v závislosti na matematickém zpracování použitém při identifikaci spektra. Mohou to být:

   1. účinné od 1. 2. 1998- jednotlivá spektra reprezentující substanci,
   2. účinné od 1. 2. 1998- průměrná spektra každé substance s popisem variability.

   účinné od 1. 2. 1998Během validačního procesuje nutno ověřit schopnost databáze selektivně identifikovat danou látku, a naopak vyloučit ostatní látky v databázi. Tato selektivita musí být pravidelně ověřována, aby bylo zajištěno trvání platnosti databáze; to je obzvláště důležité v případech, kdy dojde k nějakým větším změnám, např. ke změně dodavatele nebo výrobního procesu zkoušené látky.

   účinné od 1. 2. 1998Databáze je pak platná pouze pro měření na přístroji, na kterém byla vytvořena, a použije-li se pro měření na jiném přístroji, je nutno ověřit, zda přenesená databáze zůstává platná.

   účinné od 1. 2. 1998Postup stanovení. Vzorek zkoušené látky se připraví stejným způsobem jako pro vytvoření databáze. Spektrum vzorku i referenční spektra změřená v log (1/T) nebo log (1/R) je někdy výhodnější porovnávat po matematické úpravě, např. lze použít druhou derivaci spekter nebo korekci na násobný rozptyl.

   účinné od 1. 2. 1998Porovnání takovýchto spekter a knihovny referenčních spekter vyžaduje užití vhodné chemometrické klasifikační techniky.

1. účinné od 1. 2. 19982.3 Zkoušky totožnosti
   1. účinné od 1. 2. 19982.3.1 Zkoušky totožnosti iontů a skupin

      účinné od 1. 2. 1998Acetyl

      účinné od 1. 2. 1998Do zkumavky délky asi 180 mm a vnějšího průměru 18 mm se přenese asi 15 mg nebo předepsané množství zkoušené látky a 0,15 ml kyseliny fosforečné R. Zkumavka se uzavře zátkou, kterou prochází malá zkumavka délky asi 100 mm a vnějšího průměru 10 mm obsahující vodu R, která působí jako chladič. Na povrch malé zkumavky se zavěsí kapka dusičnanu lanthanitého RS. Kromě látek těžko hydrolyzovatelných se aparatura postaví do vodní lázně na 5 min, potom se vyjme malá zkumavka a kapka se smíchá na kapkovací desce s 0,05 ml jodu 0,01 mol/l RS. K okraji směsi se přidá 0,05 ml amoniaku zředěného RS2; po 1 min až 2 min vznikne na styku dvou kapek modré zbarvení, které zesílí a po krátkém čase zmizí.

      účinné od 1. 2. 1998U látek těžko hydrolyzovatelných se směs pomalu zahřívá k varu nad otevřeným plamenem a potom se postupuje stejně, jak je uvedeno výše.

      účinné od 1. 2. 1998Alkaloidy

      účinné od 1. 2. 1998Několik mg nebo předepsané množství zkoušené látky se rozpustí v 5 ml vody R a přidává se kyselina chlorovodíková zředěná RS do vzniku kyselé reakce (2.2.4). Potom se přidá 1 ml jodobismutitanu draselného RS; ihned vznikne oranžová nebo oranžově červená sraženina.

      účinné od 1. 2. 1998Aminy, primární aromatické

      účinné od 1. 2. 1998Předepsaný roztok se okyselí kyselinou chlorovodíkovou zředěnou RS a přidá se 0,2 ml dusitanu sodného RS. Po 1 min až 2 min se přidá 1 ml 2-naftolu RS; vznikne intenzivní oranžové až červené zbarvení, případně sraženina stejné barvy.

      účinné od 1. 2. 1998Amoniové soli

      účinné od 1. 2. 1998K předepsanému roztoku se přidá 0,2 g oxidu hořečnatého R. Směs se probublává proudem vzduchu, který ústí k povrchu směsi obsahující 1 ml kyseliny chlorovodíkové 0,1 mol/l RS a 0,05 ml červeně methylové RS; zbarvení indikátoru se změní na žluté. Přidá se 1 ml čerstvě připraveného roztoku hexanitrokobaltitanu sodného R (100 g/l); vznikne žlutá sraženina.

      účinné od 1. 2. 1998Amoniové soli a soli těkavých bází

      účinné od 1. 2. 1998Asi 20 mg zkoušené látky se rozpustí ve 2 ml vody R nebo se použijí 2 ml předepsaného roztoku. Přidají se 2 ml hydroxidu sodného zředěného RS. Zahříváním se z roztoku uvolňují páry, které mohou být identifikovatelné svým pachem a zásaditou reakcí (2.2.4).

      účinné od 1. 2. 1998Antimon

      účinné od 1. 2. 1998Asi 10 mg zkoušené látky se rozpustí mírným zahříváním v 10 ml roztoku obsahujícího 0,5 g vínanu draselno-sodného R a nechá se ochladit. K 2 ml tohoto roztoku nebo ke 2 ml předepsaného roztoku se po kapkách přidá sulfid sodný RS; vznikne oranžově červená sraženina rozpustná v hydroxidu sodném zředěném RS.

      účinné od 1. 2. 1998Arsen

      účinné od 1. 2. 19985 ml předepsaného roztoku se zahřívá na vodní lázni se stejným objemem zkoumadla fosfornanového R; vznikne hnědá sraženina.

      účinné od 1. 2. 1998Barbituráty nesubstituované na dusíku

      účinné od 1. 2. 1998Asi 5 mg zkoušené látky se rozpustí ve 3 ml methanolu R, přidá se 0,1 ml roztoku obsahujícího dusičnan kobaltnatý R (100 g/l) a chlorid vápenatý R (100 g/l). Promíchá se a za protřepávání se přidá 0,1 ml hydroxidu sodného zředěného RS; vznikne fialově modré zbarvení a sraženina.

      účinné od 1. 2. 1998Benzoany

      1. účinné od 1. 2. 1998a) K 1 ml předepsaného roztoku zkoušené látky se přidá 0,5 ml chloridu železitého RS1; vznikne sytě žlutá sraženina rozpustná v etheru R.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) Jestliže není předepsáno jinak, převede se 0,2 g zkoušené látky do zkumavky, navlhčí se 0,2 ml až 0,3 ml kyseliny sírové R a mírně se zahřívá spodní část zkumavky; na vnitřní straně zkumavky se usazuje bílý sublimát.
      3. účinné od 1. 2. 1998c) 0,5 g zkoušené látky se rozpustí v 10 ml vody R nebo se použije 10 ml předepsaného roztoku. Přidá se 0,5 ml kyseliny chlorovodíkové R; tvoří se sraženina, která po krystalizaci z vody R a vysušení ve vakuu taje při 120 °C až 124 °C (2.2.14).

      účinné od 1. 2. 1998Bismut

      1. účinné od 1. 2. 1998a) K 0,5 g zkoušené látky se přidá 10 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS nebo se použije 10 ml předepsaného roztoku. Směs se zahřívá 1 min k varu, nechá se ochladit a v případě potřeby se zfiltruje. K 1 ml takto získaného roztoku se přidá 20 ml vody R; vznikne bílá nebo slabě žlutá sraženina, která po přidání 0,05 ml až 0,1 ml sulfidu sodného RS se barví hnědě.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) K asi 45 mg zkoušené látky se přidá 10 ml kyseliny dusičné zředěné RS nebo se použije 10 ml předepsaného roztoku a 1 min se vaří. Nechá se ochladit a v případě potřeby se zfiltruje. K 5 ml takto získaného roztoku se přidají 2 ml roztoku thiomočoviny R (100 g/l); vznikne žlutavě oranžové zbarvení nebo oranžová sraženina. Přidají se 4 ml roztoku fluoridu sodného R (25 g/l); po dobu 30 min se roztok neodbarví.

      účinné od 1. 2. 1998Bromidy

      1. účinné od 1. 2. 1998a) Množství zkoušené látky odpovídající asi 3 mg bromidů (Br-) se rozpustí ve 2 ml vody R nebo se použijí 2 ml předepsaného roztoku. Okyselí se kyselinou dusičnou zředěnou RS, přidá se 0,4 ml dusičnanu stříbrného RS1 a po protřepání se nechá stát; vznikne tvarohovitá, světle žlutá sraženina. Po odstřeďování se sraženina rychle promyje třikrát 1 ml vody R za chránění před přímým světlem. Supernatantní tekutina nemusí být úplně čirá. Sraženina se suspenduje do 2 ml vody R a přidá se 1,5 ml amoniaku 17,5% RS; sraženina se těžce rozpouští.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) Množství zkoušené látky odpovídající asi 5 mg bromidů (Br-) nebo její předepsané množství se převede do malé zkumavky. Přidá se 0,25 ml vody R, asi 75 mg oxidu olovičitého R, 0,25 ml kyseliny octové R a mírně se protřepe. Horní vnitřní část zkumavky se vysuší kouskem filtračního papíru a směs se ponechá 5 min v klidu. Špička proužku filtračního papíru vhodné velikosti se impregnuje namočením do fuchsinu RS a vloží se ihned do zkumavky. Počínaje špičkou vznikne do 10 s fialové zbarvení dobře rozlišitelné od červeného zbarvení fuchsinu, které může být viditelné na horní části papírového proužku.

      účinné od 1. 2. 1998Citronany

      účinné od 1. 2. 1998Množství zkoušené látky obsahující asi 50 mg kyseliny citrónové se rozpustí v 5 ml vody A nebo se použije 5 ml předepsaného roztoku. Přidá se 0,5 ml kyseliny sírové R a 1 ml manganistanu draselného RS a zahřívá se tak dlouho, dokud barva manganistanu draselného nezmizí. Přidá se 0,5 ml roztoku nitroprussidu sodného R (100 g/l) v kyselině sírové zředěné RS a 4 g kyseliny amidosírové R. Alkalizuje se po kapkách amoniakem 26% R tak dlouho, až se kyselina amidosírová rozpustí. Přidá se nadbytek amoniaku; vzniká fialové zbarvení, které se mění na fialově modré.

      účinné od 1. 2. 1998Draslík

      1. účinné od 1. 2. 1998a) 0,1 g zkoušené látky se rozpustí ve 2 ml vody R nebo se použijí 2 ml předepsaného roztoku. Přidá se 1 ml uhličitanu sodného RS a zahřívá se. Ani po zahřátí, ani po přidání 0,05 ml sulfidu sodného RS k ještě horkému roztoku nevznikne sraženina. Po ochlazení v ledové vodě se přidají 2 ml roztoku kyseliny vinné R (150 g/l) a nechá se stát; vznikne bílá krystalická sraženina.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) 40 mg zkoušené látky se rozpustí v 1 ml vody R nebo se použije 1 ml předepsaného roztoku. Přidá se 1 ml kyseliny octové zředěné RS a 1 ml čerstvě připraveného roztoku hexanitrokobaltitanu sodného R (100 g/l); ihned vzniká žlutá nebo oranžově žlutá sraženina.

      účinné od 1. 2. 1998Dusičnany

      účinné od 1. 2. 1998Ke směsi 0,1 ml nitrobenzenu R a 0,2 ml kyseliny sírové R se přidá množství zkoušené upráškované látky odpovídající asi 1 mg dusičnanů (NO₃^-) nebo její předepsané množství. Po 5minutovém stání se ochladí ledovou vodou a pomalu, za neustálého míchání se přidá 5 ml vody R, potom 5 ml hydroxidu sodného koncentrovaného RS. Po přidání 5 ml acetonu R se protřepe a nechá stát; horní vrstva se zbarví tmavě fialově.

      účinné od 1. 2. 1998Estery

      účinné od 1. 2. 1998K asi 30 mg zkoušené látky nebo k jejímu předepsanému množství se přidá 0,5 ml roztoku hydroxylamoniumchloridu R (70 g/l) v methanolu R a 0,5 ml roztoku hydroxidu draselného R (100 g/l) v lihu 96% R. Zahřívá se k varu, po ochlazení se okyselí kyselinou chlorovodíkovou zředěnou RS a přidá se 0,2 ml desetkrát zředěného chloridu železitého RS1; vznikne modravě červené nebo červené zbarvení.

      účinné od 1. 2. 1998Fosforečnany (orthofosforečnany)

      1. účinné od 1. 2. 1998a) 5 ml předepsaného roztoku se v případě potřeby neutralizuje a přidá se 5 ml dusičnanu stříbrného RS1; vznikne žlutá sraženina, jejíž barva se varem nezmění. Sraženina se rozpustí po přidání amoniaku 17,5% R.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) 1,0 ml předepsaného roztoku se smíchá s 2 ml zkoumadla molybdenan-vanadičného R; vzniká žluté zbarvení.

      účinné od 1. 2. 1998Hliník

      účinné od 1. 2. 1998Asi 15 mg zkoušené látky se rozpustí ve 2 ml vody R nebo se použijí 2 ml předepsaného roztoku. Přidá se asi 0,5 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS a asi 0,5 ml zkoumadla thioacetamidového R; sraženina nevznikne. Potom se přidává po kapkách hydroxid sodný zředěný RS; tvoří se bílá gelovitá sraženina, která se dalším přidáváním hydroxidu sodného zředěného RS rozpouští. Postupně se přidává chlorid amonný RS; znovu se tvoří bílá gelovitá sraženina.

      účinné od 1. 2. 1998Hořčík

      účinné od 1. 2. 1998Asi 15 mg zkoušené látky se rozpustí ve 2 ml vody R nebo se použijí 2 ml předepsaného roztoku a přidá se 1 ml amoniaku zředěného RS1. Tvoří se bílá sraženina, která se rozpustí po přidání 1 ml chloridu amonného RS. Přidá se 1 ml hydrogenfosforečnanu sodného RS; tvoří se bílá krystalická sraženina.

      účinné od 1. 2. 1998Chloridy

      1. účinné od 1. 2. 1998a) Zkoušená látka obsahující asi 2 mg chloridů (Cl ^-) se rozpustí ve 2 ml vody R nebo se použijí 2 ml předepsaného roztoku a okyselí se kyselinou dusičnou zředěnou RS. Přidá se 0,4 ml dusičnanu stříbrného RS1, protřepe se a nechá stát; vylučuje se tvarohovitá bílá sraženina. Odstřeďuje se a sraženina se rychle promyje třikrát 1 ml vody R za chránění před přímým světlem. Supenatantní tekutina nemusí být úplně čirá. Sraženina se suspenduje ve 2 ml vody R a přidá se 1,5 ml amoniaku 17,5% RS; sraženina se velmi snadno rozpustí, kromě velkých částic, které se rozpouštějí pomaleji.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) Ke zkoušené látce obsahující asi 15 mg chloridů (Cl ^-) nebo k jejímu předepsanému množství se přidá do zkumavky 0,2 g dichromanu draselného R a 1 ml kyseliny sírové R. Proužek filtračního papíru impregnovaný 0,1 ml difenylkarbazidu RS se barví nad otevřenou zkumavkou fialově červeně. Impregnovaný papír nesmí přijít do styku s dichromanem draselným.

      účinné od 1. 2. 1998Jodidy

      1. účinné od 1. 2. 1998a) Množství zkoušené látky obsahující asi 4 mg jodidů (I^-) se rozpustí ve 2 ml vody R nebo se použijí 2 ml předepsaného roztoku, okyselí se kyselinou dusičnou zředěnou RS, přidá se 0,4 ml dusičnanu stříbrného RS1, protřepe se a nechá stát. Vznikne tvarohovitá, světle žlutá sraženina. Odstřeďuje se, sraženina se rychle promyje třikrát 1 ml vody R za chránění před přímým světlem. Supernatantní tekutina nemusí být úplně čirá. Sraženina se suspenduje ve 2 ml vody R, přidá se 1,5 ml amoniaku 17,5% RS; sraženina se nerozpustí.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) K 0,2 ml roztoku zkoušené látky obsahující asi 5 mg jodidů (I ^-) v 1 ml nebo k 0,2 ml předepsaného roztoku se přidá 0,5 ml kyseliny sírové zředěné RS, 0,1 ml dichromanu draselného RS, 2 ml vody R a 2 ml chloroformu R. Několik sekund se třepe, potom se nechá stát; chloroformová vrstva se barví fialově nebo fialově červeně.

      účinné od 1. 2. 1998Křemičitany

      účinné od 1. 2. 1998Předepsané množství zkoušené látky se v olověném nebo platinovém kelímku pomocí měděného drátku smíchá s asi 10 mg fluoridu sodného R a s několika kapkami kyseliny sírové R na řídkou kaši. Přikryje se průhlednou plastovou deskou, na jejíž spodní straně visí kapka vody R. Mírně se zahřívá a za krátký čas se vytvoří kolem kapky vody R bílý prstenec.

      účinné od 1. 2. 1998Mléčnany

      účinné od 1. 2. 1998Množství zkoušené látky obsahující asi 5 mg kyseliny mléčné se rozpustí v 5 ml vody R nebo se použije 5 ml předepsaného roztoku, přidá se 1 ml bromové vody R a 0,5 ml kyseliny sírové zředěné RS. Zahřívá se na vodní lázni do odbarvení a opatrně se míchá skleněnou tyčinkou. Přidají se 4 g síranu amonného R a promíchá se. Po kapkách a bez míchání se přidá 0,2 ml roztoku nitroprussidu sodného R (100 g/l) v kyselině sírové zředěné RS, potom se bez míchání přidá 1 ml amoniaku 26% RS a nechá se 30 min stát; na rozhraní dvou kapalin se objeví tmavozelený prstenec.

      účinné od 1. 2. 1998Octany

      1. účinné od 1. 2. 1998a) Zkoušená látka se zahřívá se stejným množstvím kyseliny šťavelové R. Uvolňují se páry s charakteristickým pachem kyseliny octové, které dávají kyselou reakci (2.2.4).
      2. účinné od 1. 2. 1998b) Asi 30 mg zkoušené látky se rozpustí ve 3 ml vody R nebo se použijí 3 ml předepsaného roztoku. Přidá se postupně 0,25 ml dusičnanu lanthanitého RS, 0,1 ml jodu 0,1 mol/l RS, 0,05 ml amoniaku zředěného RS2 a zahřívá se opatrně k varu; během několika minut vznikne modrá sraženina nebo tmavě modré zbarvení.

      účinné od 1. 2. 1998Olovo

      1. účinné od 1. 2. 1998a) 0,1 g zkoušené látky se rozpustí v 1 ml kyseliny octové R nebo se použije 1 ml předepsaného roztoku a přidají se 2 ml chromanu draselného RS; tvoří se žlutá sraženina, která se rozpustí po přidání 2 ml hydroxidu sodného koncentrovaného RS.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) 50 mg zkoušené látky se rozpustí v 1 ml kyseliny octové R nebo se použije 1 ml předepsaného roztoku, přidá se 10 ml vody R a 0,2 ml jodidu draselného RS; tvoří se žlutá sraženina, která se zahříváním k varu po dobu 1 min až 2 min rozpustí. Po ochlazení se sraženina tvoří znovu v podobě lesklých žlutých destiček.

      účinné od 1. 2. 1998Rtuť

      1. účinné od 1. 2. 1998a) 0,1 ml roztoku zkoušené látky se kápne na oškrabaný, lesklý měděný plíšek. Tvoří se tmavě šedá skvrna, která třením zjasní. Plíšek se vysuší a zahřívá ve zkumavce; skvrna zmizí.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) K předepsanému roztoku se přidá hydroxid sodný zředěný RS do silně alkalické reakce (2.2.4); tvoří se hustá žlutá sraženina (soli rtuťnaté).

      účinné od 1. 2. 1998Salicylany

      1. účinné od 1. 2. 1998a) K 1 ml předepsaného roztoku se přidá 0,5 ml chloridu železitého RS1; vznikne fialové zbarvení, které se přidáním 0,1 ml kyseliny octové R nezmění.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) 0,5 g zkoušené látky se rozpustí v 10 ml vody R nebo se použije 10 ml předepsaného roztoku a přidá se 0,5 ml kyseliny chlorovodíkové R. Vzniklá sraženina po překrystalizování z horké vody R a vysušení ve vakuu taje při 156 °C až 161 °C (2.2.14).

      účinné od 1. 2. 1998Sírany

      1. účinné od 1. 2. 1998a) Asi 45 mg zkoušené látky se rozpustí v 5 ml vody R nebo se použije 5 ml předepsaného roztoku. Přidá se 1 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS a 1 ml chloridu barnatého RS1; vznikne bílá sraženina.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) K suspenzi získané zkouškou a) se přidá 0,05 ml jodu 0,1 mol/l RS. Suspenze zůstává žlutá (rozdíl od siřičitanů a hydrogensiřičitanů), ale odbarvuje se, jestliže se po kapkách přidává chlorid cínatý RS (rozdíl od jodičnanů). Směs se povaří; barevná sraženina nevzniká (rozdíl od selenanů a wolframanů).

      účinné od 1. 2. 1998Sodík

      1. účinné od 1. 2. 1998a) Asi 0,1 g zkoušené látky se rozpustí ve 2 ml vody R nebo se použijí 2 ml předepsaného roztoku. Přidají se 2 ml roztoku uhličitanu draselného R (150 g/l) a zahřívá se k varu. Sraženina se netvoří. Přidají se 4 ml hexahydroxoantimoničnanu draselného RS a zahřívá se k varu. Ochladí se v ledové vodě a dle potřeby se tře vnitřní stěna zkumavky tyčinkou; tvoří se hustá bílá sraženina.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) Množství zkoušené látky obsahující asi 2 mg sodíku (Na ⁺) se rozpustí v 0,5 ml vody R nebo se použije 0,5 ml předepsaného roztoku, přidá se 1,5 ml zkoumadla methoxyfenyloctového R a 30 min se chladí v ledové vodě. Tvoří se objemná bílá krystalická sraženina, která se nerozpustí ve vodě R při 20 °C ani po pětiminutovém míchání. Přidá se 1,0 ml amoniaku zředěného RS1; sraženina se rozpustí a ani po přidání 1 ml uhličitanu amonného RS znovu nevznikne.

      účinné od 1. 2. 1998Stříbro

      účinné od 1. 2. 1998Asi 10 mg zkoušené látky se rozpustí v 10 ml vody R nebo se použije 10 ml předepsaného roztoku a přidá se 0,3 ml kyseliny chlorovodíkové RS; vzniká tvarohovitá bílá sraženina, která se rozpustí po přidání 3 ml amoniaku zředěného RS1.

      účinné od 1. 2. 1998Uhličitany a kyselé uhličitany

      účinné od 1. 2. 1998K suspenzi 0,1 g zkoušené látky ve 2 ml vody R nebo k 2 ml předepsaného roztoku se přidají 3 ml kyseliny octové zředěné RS. Zkumavka se rychle uzavře provrtanou zátkou, ve které je skleněná trubička ohnutá dvakrát do pravého úhlu. Roztok šumí, vyvíjí se plyn bez barvy a pachu. Po mírném nahřátí se plyn zavádí do 5 ml hydroxidu barnatého RS; tvoří se bílá sraženina, která se rozpouští po přidání nadbytku kyseliny chlorovodíkové RS.

      účinné od 1. 2. 1998Vápník

      1. účinné od 1. 2. 1998a) K 0,2 ml neutrálního roztoku zkoušené látky obsahujícího asi 0,2 mg vápníku (Ca²⁺) v 1 ml nebo k 0,2 ml předepsaného roztoku se přidá 0,5 ml glyoxalbishydroxyanilu R (2 g/l) v lihu 96% R, 0,2 ml hydroxidu sodného zředěného RS a 0,2 ml uhličitanu sodného RS. Protřepe se s 1 ml až 2 ml chloroformu R a přidá se 1 ml až 2 ml vody R; chloroformová vrstva se zbarví červeně.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) Asi 20 mg zkoušené látky nebo její předepsané množství se rozpustí v 5 ml kyseliny octové R a přidá se 0,5 ml hexakyanoželeznatanu draselného RS; roztok zůstane čirý. Po přidání asi 50 mg chloridu amonného R vzniká bílá krystalická sraženina.

      účinné od 1. 2. 1998Vínany

      1. účinné od 1. 2. 1998a) Asi 15 mg zkoušené látky se rozpustí v 5 ml vody R nebo se použije 5 ml předepsaného roztoku. Přidá se 0,05 ml roztoku síranu železnatého R (10 g/l) a 0,05 ml peroxidu vodíku RS; vznikne nestálé žluté zabarvení. Po vymizení zabarvení se po kapkách přidává hydroxid sodný zředěný RS; vznikne intenzivní modré zbarvení.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) K 0,1 ml roztoku zkoušené látky obsahujícího asi 15 mg kyseliny vinné v 1 ml nebo k 0,1 ml předepsaného roztoku se přidá 0,1 ml roztoku bromidu draselného R (100 g/l), 0,10 ml roztoku resorcinolu R (20 g/l) a 3 ml kyseliny sírové R. Zahřívá se na vodní lázni 5 min až 10 min; vznikne tmavě modré zbarvení. Nechá se ochladit a roztok se naleje do vody R; zbarvení se změní na červené.

      účinné od 1. 2. 1998Xanthiny

      účinné od 1. 2. 1998K několika mg zkoušené látky nebo k jejímu předepsanému množství se přidá 0,1 ml peroxidu vodíku koncentrovaného R a 0,3 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS. Odpařuje se na vodní lázni do sucha, až se objeví žlutavě červený zbytek. Přidá se 0,1 ml amoniaku zředěného RS2; zbarvení zbytku se změní na fialově červené.

      účinné od 1. 2. 1998Zinek

      účinné od 1. 2. 19980,1 g zkoušené látky se rozpustí v 5 ml vody R nebo se použije 5 ml předepsaného roztoku. Přidá se 0,2 ml hydroxidu sodného koncentrovaného RS; vznikne bílá sraženina, která se po přidání dalších 2 ml hydroxidu sodného koncentrovaného RS rozpustí. Přidá se 10 ml chloridu amonného RS; roztok zůstává čirý. Přidá se 0,1 ml sulfidu sodného RS; tvoří se vločkovitá bílá sraženina.

      účinné od 1. 2. 1998Železo

      1. účinné od 1. 2. 1998a) Množství zkoušené látky obsahující asi 10 mg železa (Fe²⁺) se rozpustí vl ml vody R nebo se použije 1 ml předepsaného roztoku. Přidá se 1 ml roztoku hexakyanoželezitanu draselného RS; tvoří se modrá sraženina, která se nerozpouští v kyselině chlorovodíkové zředěné RS.
      2. účinné od 1. 2. 1998b) Množství zkoušené látky obsahující asi 1 mg železa (Fe³⁺) se rozpustí ve 30 ml vody R. Ke 3 ml tohoto roztoku nebo ke 3 ml předepsaného roztoku se přidá 1 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS a 1 ml thiokyanatanu draselného RS; roztok se zbarví červeně. Z roztoku se oddělí dvě části, každá obsahuje 1 ml. K první části takto získaného roztoku se přidá 5 ml isoamylalkoholu R nebo etheru R, protřepe se a nechá se stát; organická vrstva se zbarví růžově. K druhé části roztoku se přidají 2 ml chloridu rtuťnatého RS; červené zbarvení zmizí.
      3. účinné od 1. 2. 1998c) Množství zkoušené látky obsahující nejméně 1 mg železa (Fe³⁺) se rozpustí v 1 ml vody R nebo se použije 1 ml předepsaného roztoku. Přidá se 1 ml hexakyanoželeznatanu draselného RS; tvoří se modrá sraženina, která se přidáním 5 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS nerozpouští.
   1. účinné od 1. 2. 19982.3.2 Totožnost mastných olejů tenkovrstvou chromatografií

      účinné od 1. 2. 1998Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití vhodného oktadecylsilanizovaného silikagelu pro vysokoúčinnou tenkovrstvou chromatografii.

      účinné od 1. 2. 1998Zkoušený roztok. Není-li předepsáno jinak, rozpustí se asi 20 mg (1 kapka) mastného oleje ve 3 ml dichlormethanu R.

      účinné od 1. 2. 1998Porovnávací roztok. Rozpustí se asi 20 mg (1 kapka) oleje kukuřičného R ve 3 ml dichlormethanu R.

      účinné od 1. 2. 1998Na vrstvu se nanese po 1 μl každého roztoku a vyvíjí se dvakrát etherem R po dráze 0,5 cm. Pak se vyvíjí dvakrát směsí objemových dílů dichlormethanu R, kyseliny octové ledové R a acetonu R (20 + 40 + 50) po dráze 8 cm. Vrstva se vysuší volně na vzduchu, postříká se roztokem kyseliny fosfomolybdenové R (100 g/l) v lihu 96% R, zahřívá se 3 min při 120 °C a pozoruje se v denním světle.

      účinné od 1. 2. 1998Na chromatogramu jsou charakteristické skvrny odpovídající obrázku 2.3.2-1.

      účinné od 1. 2. 1998

      účinné od 1. 2. 1998Obr. 2.3.2-1 Charakteristické chromatogramy k určení totožnosti mastných olejů

      účinné od 1. 2. 1998

      Tab. 2.2.38-1 Měrný odpor a měrná vodivost standardních roztoků chloridu draselného při 20 °C Stanovení konstanty vodivostní sondy Stanovení měrné vodivostí vody nebo zkoušeného roztoku Příprava vzorku Kontrola správné funkce přístroje Vytvoření knihovny referenčních spektrálních dat Acetyl Alkaloidy Aminy, primární aromatické Amoniové soli Amoniové soli a soli těkavých bází Antimon Arsen Barbituráty nesubstituované na dusíku Benzoany Bismut Bromidy Citronany Draslík Dusičnany Estery Fosforečnany (orthofosforečnany) Hliník Hořčík Chloridy Jodidy Křemičitany Mléčnany Octany Olovo Rtuť Salicylany Sírany Sodík Stříbro Uhličitany a kyselé uhličitany Vápník Vínany Xanthiny Zinek Železo

      1.	Maydis oleum	2.	Arachidis oleum	3.	Cacao oleum
      4.	Sesami oleum	5.	Lini oleum	6.	Amygdalae oleum
      7.	Olivae oleum	8.	Rapae oleum	9.	Rapae oleum (sine acido erucico)
      10.	Sojae oleum	11.	Helianthi oleum

   1. účinné od 1. 2. 19982.3.3 Totožnost fenothiazinových derivátů tenkovrstvou chromatografií

      účinné od 1. 2. 1998Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití vrstvy křemeliny G R impregnované následovně.

      účinné od 1. 2. 1998Deska s vrstvou se postaví v uzavřené chromatografické komoře do potřebného množství směsi obsahující fenoxyethanol R 10 % (V/V) a makrogol 300 R (50 g/l) v acetonu R tak, aby vrstva byla ponořena asi 5 mm pod povrch směsi. Když impregnační směs dosáhne nejméně 17 cm od spodního okraje vrstvy, deska s vrstvou se vyjme a ihned se použije. Vyvíjení chromatogramů při zkoušce se provede ve stejném směru jako impregnace.

      účinné od 1. 2. 1998Zkoušený roztok. 20 mg zkoušené látky se rozpustí v chloroformu R a zředí se jím na 10 ml. Porovnávací roztok. 20 mg odpovídající referenční látky (CRL) se rozpustí v chloroformu R a zředí se jím na 10 ml.

      účinné od 1. 2. 1998Na vrstvu se nanesou 2 μl každého roztoku a vyvíjí se ve tmě po dráze 15 cm směsí objemových dílů etheru petrolejového R a diethylaminu R (50 +1) nasycenou fenoxyethanolem R (tj. 3 ml až 4 ml fenoxyethanolu R se přidají k výše uvedené směsi rozpouštědel, protřepe se a po oddělení se použije horní vrstva, i když je zakalená). Po vyjmutí z komory se vrstva vystaví na několik minut působení ultrafialového světla při 365 nm a potom se hodnotí.

      účinné od 1. 2. 1998Skvrna na chromatogramů zkoušeného roztoku se shoduje polohou, fluorescencí a velikostí se skvrnou na chromatogramů porovnávacího roztoku. Vrstva se postříká roztokem kyseliny sírové R 10% (V/V) v lihu 96% R. Skvrna na chromatogramů zkoušeného roztoku se shoduje zbarvením se skvrnou na chromatogramů porovnávacího roztoku. Zbarvení skvrn je stálé po dobu nejméně 20 min.

   1. účinné od 1. 2. 19982.3.4 Pach

      účinné od 1. 2. 19980,5 g až 2,0 g zkoušené látky se rozetřou v tenké vrstvě na hodinové sklíčko o průměru 6 cm až 8 cm. Po 15 min se určí pach nebo se ověří jeho nepřítomnost.

1. účinné od 1. 2. 19982.4 Limitní zkoušky
   1. účinné od 1. 2. 19982.4.1 Amonium

      účinné od 1. 2. 1998Jestliže není předepsáno jinak, použije se metoda A.

      účinné od 1. 2. 1998Metoda A

      účinné od 1. 2. 1998Předepsané množství zkoušené látky se ve zkumavce rozpustí ve 14 ml vody R, je-li potřeba, upraví se pH roztoku do alkalické reakce přidáním hydroxidu sodného zředěného RS a zředí se vodou R na 15 ml. K roztoku se přidá 0,3 ml tetrajodortuťnatanu draselného zásaditého RS. Současně se připraví porovnávací roztok za použití 10 ml základního roztoku amonia (1 μg NH₄/ml), 5 ml vody R a 0,3 ml tetrajodortuťnatanu draselného zásaditého RS. Zkumavky se uzavřou.

      účinné od 1. 2. 1998Po 5 min se zkoušený roztok nezbarví intenzivněji žlutě než současně připravený porovnávací roztok.

      účinné od 1. 2. 1998Metoda B

      účinné od 1. 2. 1998Předepsané množství jemně upráškované zkoušené látky se ve vhodné 25ml skleněné nádobce s polyethylenovým uzávěrem rozpustí nebo suspenduje v 1 ml vody R a přidá se 0,30 g oxidu hořečnatého těžkého R. Pod uzávěr se umístí papír se síranem manganatým a dusičnanem stříbrným R velikosti 5 mm² navlhčený několika kapkami vody R a ihned se uzavře. Opatrně se promíchá krouživým pohybem tak, aby tekutina nevystříkla, a nechá se 30 min stát při 40 °C.

      účinné od 1. 2. 1998Jestliže se papír se síranem manganatým a dusičnanem stříbrným R zbarví šedě, není toto zbarvení intenzivnější než zbarvení papíru se síranem manganatým a dusičnanem stříbrným R u porovnávacího roztoku připraveného současně stejným způsobem za použití předepsaného objemu základního roztoku amonia (1 μg NH₄/ml), 1 ml vody R a 0,30 g oxidu hořečnatého těžkého R.

   1. účinné od 1. 2. 19982.4.2 Arsen

      účinné od 1. 2. 1998Metoda A

      účinné od 1. 2. 1998Přístroj na stanovení arsenu, viz obr. 2.4.2-1, se skládá ze 100ml kuželové baňky se zabroušenou skleněnou zátkou, kterou prochází skleněná trubice délky 200 mm a vnitřního průměru 5 mm. Spodní část této trubice je zúžena na vnitřní průměr 1,0 mm a 15 mm od jejího konce je otvor, který je umístěn nejméně 3 mm pod spodním okrajem zátky a má průměr 2 mm až 3 mm. Horní část této trubice je zakončena dokonale rovnou plochou kolmou k ose. K této části je přiložena 30 mm dlouhá skleněná trubice o stejném průměru a se stejně upraveným zakončením. Obě části jsou k sobě přitisknuty pomocí dvou spirálových pružin. Ve spodní trubici je vloženo 50 mg až 60 mg vaty s octanem olovnatým R nebo 50 mg až 60 mg stočeného proužku papíru s octanem olovnatým R, který je umístěn na malé vatové zátce. Do prostoru mezi skleněnými trubicemi se vloží kolečko nebo čtvereček papíru s bromidem rtuťnatým R tak, aby byl zakryt otvor trubice (15 mm x 15 mm).

      účinné od 1. 2. 1998Předepsané množství zkoušené látky se v kuželové baňce rozpustí ve 25 ml vody R nebo se předepsané množství roztoku zředí vodou R na 25 ml. Přidá se 15 ml kyseliny chlorovodíkové R 0,1 ml chloridu cínatého RS a 5 ml jodidu draselného RS. Po 15min stání se přidá 5 g zinku aktivovaného R, ihned se spojí obě části přístroje a kuželová baňka se ponoří do vodní lázně o teplotě, která umožňuje udržovat stejnoměrný vývoj plynu.

      účinné od 1. 2. 1998Stejným způsobem se připraví porovnávací roztok za použití 1 ml základního roztoku arsenu (1 ug As/ml) zředěného vodou R na 25 ml.

      účinné od 1. 2. 1998Nejdříve po dvou hodinách se porovnají skvrny zkoušeného roztoku a porovnávacího roztoku vzniklé na papíru s bromidem rtuťnatým R. Skvrna zkoušeného roztoku není intenzivněji zbarvena než skvrna porovnávacího roztoku.

      účinné od 1. 2. 1998Metoda B

      účinné od 1. 2. 1998Do zkumavky se 4 ml kyseliny chlorovodíkové R a asi 5 mg jodidu draselného R se přidá předepsané množství zkoušené látky a 3 ml zkoumadla fosfornanového R. Směs se zahřívá 15 min na vodní lázni za občasného protřepání. Stejným způsobem se připraví porovnávací roztok za použití 0,5 ml základního roztoku arsenu (10 μg As/ml).

      účinné od 1. 2. 1998Po zahřátí na vodní lázni není zbarvení zkoušeného roztoku intenzivnější než zbarvení porovnávacího roztoku.

      účinné od 1. 2. 1998

      účinné od 1. 2. 1998Obr. 2.4.2-1 Přístroj pro limitní zkoušku A na arsen

      účinné od 1. 2. 1998Rozměry v milimetrech

   1. účinné od 1. 2. 19982.4.3 Vápník

      účinné od 1. 2. 1998Všechny roztoky použité v této zkoušce se připravují z vody destilované R.

      účinné od 1. 2. 1998K 0,2 ml základního roztoku vápníku (100 μg Ca/ml) v lihu se přidá 1 ml šťavelanu amonného RS. Po 1 min se přidá směs 1 ml kyseliny octové zředěné RS a 15 ml roztoku obsahujícího předepsané množství zkoušené látky a protřepe se.

      účinné od 1. 2. 1998Současně se stejným způsobem připraví porovnávací roztok za použití směsi 10 ml základního roztoku vápníku (10 μg Ca/ml), 1 ml kyseliny octové zředěné RS a 5 ml vody destilované R.

      účinné od 1. 2. 1998Po 15 min se zkoušený roztok nezakalí intenzivněji než porovnávací roztok.

   1. účinné od 1. 2. 19982.4.4 Chloridy

      účinné od 1. 2. 1998K 15 ml zkoušeného roztoku se přidá 1 ml kyseliny dusičné zředěné RS a směs se najednou přelije do zkumavky obsahující 1 ml dusičnanu stříbrného RS2.

      účinné od 1. 2. 1998Stejným způsobem se připraví porovnávací roztok za použití 10 ml základního roztoku chloridů (5 μg Cl/ml) a 5 ml vody R. Roztoky se nechají stát za chránění před světlem.

      účinné od 1. 2. 1998Po 5 min zkoušený roztok neopalizuje nebo se nezakalí intenzivněji než porovnávací roztok. Opalescence nebo zákal se pozoruje ze strany proti černému matnému pozadí.

   1. účinné od 1. 2. 19982.4.5 Fluoridy

      účinné od 1. 2. 1998Do vnitřní zkumavky přístroje na stanovení fluoridů, viz obrázek 2.4.5-1, se vpraví předepsané množství zkoušené látky, 0,1 g kyselinou promytého písku R a 20 ml směsi složené ze stejných objemových dílů kyseliny sírové R a vody R. Pak se zahřeje vnější zkumavka obsahující tetrachlorethan R k varu (146 °C) a při této teplotě se udržuje.

      účinné od 1. 2. 1998

      účinné od 1. 2. 1998Obr. 2.4.5-1 Přístroj pro limitní zkoušku na fluoridy

      účinné od 1. 2. 1998Rozměry v milimetrech

      účinné od 1. 2. 1998Zahřívá se vyvíječ páry, destiluje se a destilát se zachytává ve 100ml odměrné baňce obsahující 0,3 ml hydroxidu sodného 0,1 mol/l RS a 0,1 ml fenolftaleinu RS. Během destilace se ve vnitřní zkumavce udržuje konstantní objem (20 ml) a zajistí se v případě potřeby přídavkem hydroxidu sodného 0,1 mol/l VS, aby destilát zůstal alkalický. Destilát se zředí vodou R na 100 ml (zkoušený roztok).

      účinné od 1. 2. 1998Stejným způsobem se připraví porovnávací roztok za použití 5 ml základního roztoku fluoridů (10 μg F/ml) místo zkoušené látky. Do dvou skleněných odměrných válců se zabroušenou skleněnou zátkou se vpraví po 20 ml zkoušeného a porovnávacího roztoku a po 5 ml zkoumadla aminomethylalizarindioctového R.

      účinné od 1. 2. 1998Po 20 min se zkoušený roztok nezbarví intenzivněji modře (původní zbarvení je červené) než porovnávací roztok.

   1. účinné od 1. 2. 19982.4.6 Hořčík

      účinné od 1. 2. 1998K 10 ml předepsaného roztoku se přidá 0,1 g tetraboritanu sodného R. Jestliže je třeba, upraví se pH roztoku na 8,8 až 9,2 kyselinou chlorovodíkovou zředěnou RS nebo hydroxidem sodným zředěným RS. Potom se roztok převede do dělicí nálevky a vytřepává se postupně dvakrát vždy po dobu 1 min 5 ml roztoku hydroxychinolinu R (1 g/l) v chloroformu R a nechá se oddělit. Po oddělení se organická vrstva odstraní a k vodné vrstvě se přidá 0,4 ml butylaminu R a 0,1 ml triethanolaminu R. Jestliže je třeba, upraví se pH roztoku na 10,5 až 11,5, pak se přidají 4 ml roztoku hydroxychinolinu R (1 g/l) v chloroformu R, opět se vytřepává po dobu 1 min a nechá se oddělit. K hodnocení se použije spodní vrstva.

      účinné od 1. 2. 1998Současně se stejným způsobem připraví porovnávací roztok za použití 1 ml základního roztoku hořčíku (10 /μg Mg/ml) a 9,0 ml vody R.

      účinné od 1. 2. 1998Zkoušený roztok se nezbarví intenzivněji než porovnávací roztok.

   1. účinné od 1. 2. 19982.4.7 Hořčík a kovy alkalických zemin

      účinné od 1. 2. 1998Ke 200 ml vody R se přidá 0,1 g hydroxylamoniumchloridu R, 10 ml tlumivého roztoku s chloridem amonným o pH 10,0,1 ml síranu zinečnatého 0,1 mol/l VS a asi 15 mg černi eriochromové T s chloridem sodným R. Zahřeje se asi na 40 °C a titruje se edetanem disodným 0,01 mol/l VS z fialového do jasně modrého zbarvení. Pak se přidá předepsané množství zkoušené látky rozpuštěné ve 100 ml vody R nebo předepsané množství zkoušeného roztoku. Jestliže se zbarvení roztoku po přidání zkoušené látky změnilo zpět na fialové, titruje se dále edetanem disodným 0,01 mol/l VS opět do modrého zbarvení.

      účinné od 1. 2. 1998Spotřeba roztoku edetanu disodného 0,01 mol/l PS při druhé titraci není vyšší, než je předepsáno.

   1. účinné od 1. 2. 19982.4.8 Těžké kovy

      účinné od 1. 2. 1998Metoda A

      účinné od 1. 2. 1998Ke 12 ml předepsaného vodného roztoku se přidají 2 ml tlumivého roztoku o pH 3,5 a 1,2 ml zkoumadla thioacetamidového R a směs se ihned promíchá (zkoušený roztok). Stejným způsobem se připraví porovnávací roztok za použití 10 ml základního roztoku olova (1 μg nebo 2 μg Pb/ml), jak je předepsáno, a přidají se 2 ml zkoušeného roztoku. Současně se připraví kontrolní roztok za použití 10 ml vody R a 2 ml zkoušeného roztoku. V porovnání s kontrolním roztokem vykazuje porovnávací roztok slabě hnědé zbarvení.

      účinné od 1. 2. 1998Po 2 min hnědé zbarvení zkoušeného roztoku není intenzivnější než zbarvení porovnávacího roztoku.

      účinné od 1. 2. 1998Metoda B

      účinné od 1. 2. 1998Zkoušená látka se rozpustí v organickém rozpouštědle obsahujícím minimální procento vody (např. dioxan obsahující 15 % vody nebo aceton obsahující 15 % vody).

      účinné od 1. 2. 1998Ke 12 ml předepsaného roztoku se přidají 2 ml tlumivého roztoku o pH 3,5. Promíchá se a přidá se 1,2 ml zkoumadla thioacetamidového a směs se ihned promíchá (zkoušený roztok). Stejným způsobem se připraví porovnávací roztok za použití 10 ml roztoku olova (1 μg nebo 2 μg Pb/ml), jak je předepsáno, a 2 ml zkoušeného roztoku. Roztok olova (1 μg nebo 2 μg Pb/ml) se připraví zředěním základního roztoku olova (100 μg Pb/ml) rozpouštědlem použitým pro zkoušenou látku.

      účinné od 1. 2. 1998Současně se připraví kontrolní roztok smícháním 10 ml použitého rozpouštědla a 2 ml zkoušeného roztoku. V porovnání s kontrolním roztokem vykazuje porovnávací roztok slabě hnědé zbarvení.

      účinné od 1. 2. 1998Po 2 min není hnědé zbarvení zkoušeného roztoku intenzivnější než zbarvení porovnávacího roztoku.

      účinné od 1. 2. 1998Metoda C

      účinné od 1. 2. 1998Předepsané množství zkoušené látky (nejvýše 2 g) se převede do křemenného kelímku se 4 ml roztoku síranu horečnatého R (250 g/l) v kyselině sírové zředěné RS. Směs se promíchá tenkou skleněnou tyčinkou a opatrně se zahřívá, až se směs roztaví. Jestliže je směs tekutina, šetrně se odpaří do sucha na vodní lázni. Za stoupající teploty se zahřívá a spaluje tak dlouho, až je zbytek bílý nebo pouze slabě šedý. Spalování se provádí při teplotě nepřevyšující 800 °C. Po vychladnutí se zbytek zvlhčí několika kapkami kyseliny sírové zředěné RS, odpaří se, znovu se spálí a nechá vychladnout. Doba spalování nesmí přesáhnout 2 hod. Zbytek se převede dvakrát 5 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS do zkumavky. Přidá se 0,1 ml fenolftaleinu RS a amoniak 26% R do vzniku růžového zbarvení. Po ochlazení se přidá kyselina octová ledová R do odbarvení a ještě navíc 0,5 ml. Je-li potřeba, zfíltruje se a filtr se promyje. Zředí se vodou R na 20 ml. Ke 12 ml takto získaného roztoku se přidají 2 ml tlumivého roztoku o pH 3,5 a směs se promíchá. Přidá se 1,2 ml zkoumadla thioacetamidového R a ihned se promíchá (zkoušený roztok).

      účinné od 1. 2. 1998Současně se připraví porovnávací roztok za použití 4 ml roztoku síranu hořečnatého R (250 g/l) v kyselině sírové zředěné RS a předepsaného objemu základního roztoku olova (10 μg Pb/ml). Stejným způsobem, jako je předepsáno u zkoušeného roztoku, se spálí, rozpustí v kyselině chlorovodíkové, přidá se roztok amoniaku, kyselina octová a zředí se vodou R na 20 ml. K 10 ml tohoto roztoku se přidají 2 ml zkoušeného roztoku, 2 ml tlumivého roztoku o pH 3,5 a promíchá se. Přidá se 1,2 ml zkoumadla thioacetamidového R a ihned se promíchá.

      účinné od 1. 2. 1998Současně se připraví kontrolní roztok smícháním 10 ml vody R a 2 ml zkoušeného roztoku. V porovnání s kontrolním roztokem vykazuje porovnávací roztok slabě hnědé zbarvení.

      účinné od 1. 2. 1998Po 2 min není hnědé zbarvení zkoušeného roztoku intenzivnější než zbarvení porovnávacího roztoku.

      účinné od 1. 2. 1998Metoda D

      účinné od 1. 2. 1998Do křemenného kelímku se naváží předepsané množství zkoušené látky a smíchá se s 0,5 g oxidu horečnatého R1. Žíhá se do slabě červeného žáru, až vznikne homogenní bílá nebo šedobílá hmota. Pokud ještě po 30 min spalování zůstává směs barevná, nechá se vychladnout, promíchá se tenkou skleněnou tyčinkou a spalování se opakuje. Je-li nutné, postup se opakuje. Dále se žíhá asi 1 h při 800 °C. Zbytek se převede dvakrát 5 ml směsi stejných objemových dílů kyseliny chlorovodíkové RS a vody R do zkumavky. Přidá se 0,1 ml fenolftaleinu R a roztok amoniaku 26% R do růžového zbarvení. Po ochlazení se přidá kyselina octová ledová R do odbarvení a ještě 0,5 ml navíc. Je-li potřeba, zfiltruje se a filtr se promyje. Zředí se vodou R na 20 ml. Ke 12 ml takto získaného roztoku se přidají 2 ml tlumivého roztoku o pH 3,5 a promíchá se. Přidá se 1,2 ml zkoumadla thioacetamidového R a ihned se promíchá (zkoušený roztok).

      účinné od 1. 2. 1998Porovnávací roztok se připraví následujícím postupem. K 0,5 g oxidu horečnatého R1 se přidá předepsané množství základního roztoku olova (10 μg Pb/ml) a vysuší se při 100 °C až 105 °C v sušárně. Stejným způsobem, jako je předepsáno u zkoušeného roztoku, se spálí, přidá se kyselina chlorovodíková, roztok amoniaku, kyselina octová a zředí se vodou R na 20 ml. K 10 ml tohoto roztoku se přidají 2 ml zkoušeného roztoku, 2 ml tlumivého roztoku o pH 3,5 a promíchá se. Přidá se 1,2 ml zkoumadla thioacetamidového R a ihned se promíchá.

      účinné od 1. 2. 1998Současně se připraví kontrolní roztok smícháním 10 ml vody R a 2 ml zkoušeného roztoku. V porovnání s kontrolním roztokem vykazuje porovnávací roztok slabě hnědé zbarvení.

      účinné od 1. 2. 1998Po 2 min není hnědé zbarvení zkoušeného roztoku intenzivnější než zbarvení porovnávacího roztoku.

      účinné od 1. 2. 1998Metoda E

      účinné od 1. 2. 1998Předepsané množství zkoušené látky se rozpustí ve 30 ml vody R nebo v jiném předepsaném objemu. Filtrační zařízení se připraví z válce 50ml injekční stříkačky bez pístu připojením k nástavci, v němž na rovné ploše je membránový filtr (rozměr pórů 3 μm) a na něm předfiltr, viz obr. 2.4.8-1A.

      účinné od 1. 2. 1998Zkoušeným roztokem se naplní válec injekční stříkačky, vloží se píst a jeho stlačením se všechna tekutina zfiltruje. Po otevření podložky a odejmutí předfiltru se zkontroluje membránový filtr. Je-li znečištěn, vymění se za nový a postup se opakuje stejným způsobem.