Platné znění

Vyhláška, kterou se stanoví analytické metody kontroly složení kosmetických prostředků

účinné od 1. 1. 2006
Mobilní fáze A (2.2)Mobilní fáze B (2.3)
Peroxodisíran sodný0,400,10
Peroxodisíran draselný0,400,02 + 0,05
Peroxodisíran amonný0,500,10 + 0,20
Bromičnan sodný0,400,20
Bromičnan draselný0,400,10 + 0,20
Peroxid vodíku0,800,80
  1. účinné od 1. 1. 2006B. KVALITATIVNÍ STANOVENÍ PEROXIDU BARNATÉHO
    1. účinné od 1. 1. 20061. PRINCIP

      účinné od 1. 1. 2006Peroxid barnatý se identifikuje na základě tvorby peroxidu vodíku po okyselení vzorku (A.4.2) a na základě přítomnosti barnatých iontů:

      1. účinné od 1. 1. 2006— v nepřítomnosti peroxodisíranů (A) přídavkem zředěné kyseliny sírové do části kyselého roztoku vzorku (B.4.1), čímž vznikne bílá sraženina síranu barnatého. Přítomnost barnatých iontů ve vzorku (B.4.1) se opět potvrdí papírovou chromatografií způsobem popsaným níže (B.5),
      2. účinné od 1. 1. 2006— ve vzorcích, ve kterých jsou peroxid barnatý a peroxodisírany přítomny současně (B.4.2), vyloužením zbytku z roztoku (B.4.2) v alkalickém prostředí; po rozpuštění taveniny (B.4.2.3) v kyselině chlorovodíkové se přítomnost barnatých iontů potvrdí papírovou chromatografií a/nebo vysrážením síranu barnatého.
    1. účinné od 1. 1. 20062. REAKČNÍ ČINIDLA
      1. účinné od 1. 1. 20062.1 Methanol
      2. účinné od 1. 1. 20062.2 Koncentrovaná kyselina chlorovodíková, 36% (m/m)
      3. účinné od 1. 1. 20062.3 Kyselina chlorovodíková, 6 mol/l
      4. účinné od 1. 1. 20062.4 Kyselina sírová, 8 mol/l
      5. účinné od 1. 1. 20062.5 Disodná sůl kyseliny rhodizonové
      6. účinné od 1. 1. 20062.6 Chlorid barnatý (BaCl2·2H2O)
      7. účinné od 1. 1. 20062.7 Bezvodý uhličitan sodný
      8. účinné od 1. 1. 20062.8 Vodný roztok chloridu barnatého, 1% (m/V)
      9. účinné od 1. 1. 20062.9 Mobilní fáze methanol – koncentrovaná kyselina chlorovodíková (koncentrace 36 %) – voda (80:10:10, V/V/V)
      10. účinné od 1. 1. 20062.10 Detekční činidlo, 0,1% (m/V) vodný roztok disodné soli kyseliny rhodizonové, připravuje se bezprostředně před použitím
    1. účinné od 1. 1. 20063. PŘÍSTROJE A POMŮCKY
      1. účinné od 1. 1. 20063.1 Mikropipeta na 5 μl
      2. účinné od 1. 1. 20063.2 Platinové kelímky
      3. účinné od 1. 1. 20063.3 Odměrné baňky na 100 ml
      4. účinné od 1. 1. 20063.4 Chromatografický papír Schleicher a Schull 2043 b nebo ekvivalentní. Papír se vyčistí tak, že se přes noc nechá vyvíjet v komoře pro sestupnou chromatografii (A.3.5), obsahující mobilní fáze, a poté se usuší.
      5. účinné od 1. 1. 20063.5 Skládaný filtrační papír
      6. účinné od 1. 1. 20063.6 Obvyklé zařízení pro provádění vzestupné papírové chromatografie
    1. účinné od 1. 1. 20064. PŘÍPRAVA VZORKU
      1. účinné od 1. 1. 20064.1 Prostředky, ve kterých nejsou přítomny peroxodisírany
        1. účinné od 1. 1. 20064.1.1 2 g prostředku se rozptýlí v 50 ml vody a pH suspenze se upraví přibližně na hodnotu 1 kyselinou chlorovodíkovou (B.2.3).
        2. účinné od 1. 1. 20064.1.2 Suspenze se pomocí vody převede do odměrné baňky na 100 ml, doplní se po rysku vodou a promíchá se. Tato suspenze se použije pro analýzu papírovou chromatografií popsanou v oddíle 5 a pro kvalitativní stanovení barya vysrážením síranu.
      1. účinné od 1. 1. 20064.2 Prostředky, ve kterých jsou přítomny peroxodisírany
        1. účinné od 1. 1. 20064.2.1 2 g prostředku se rozptýlí ve 100 ml vody a přefiltruje se.
        2. účinné od 1. 1. 20064.2.2 K vysušenému zbytku se přidá množství uhličitanu sodného odpovídající sedmi až desetinásobku hmotnosti zbytku (B.2.7), promíchá se a směs se půl hodiny taví v platinovém kelímku (B.3.2).
        3. účinné od 1. 1. 20064.2.3 Ochladí se na laboratorní teplotu, tavenina se rozpustí v 50 ml vody a přefiltruje se (B.3.5).
        4. účinné od 1. 1. 20064.2.4 Zbytek z taveniny se rozpustí v kyselině chlorovodíkové (B.2.3) a doplní se vodou na 100 ml. Tento roztok se použije pro analýzu papírovou chromatografií popsanou v oddíle 5 a pro kvalitativní stanovení barya vysrážením síranu.
    1. účinné od 1. 1. 20065. POSTUP
      1. účinné od 1. 1. 20065.1 Přiměřené množství mobilní fáze (B.2.9) se umístí do komory pro vzestupnou chromatografii a komora se sytí alespoň 15 hodin.
      2. účinné od 1. 1. 20065.2 Na chromatografický papír – předem upraveného tak, jak je popsáno v bodě B.3.4 – se nanese do tří startovních bodů 5 μl každého z roztoků připravených podle bodů B.4.1.2 a B.4.2.4 a standardní roztok B.2.8.
      3. účinné od 1. 1. 20065.3 Vzorek a referenční skvrny se vysuší na vzduchu. Chromatogram se vyvíjí, dokud čelo rozpouštědla nepostoupí o 30 cm.
      4. účinné od 1. 1. 20065.4 Chromatogram se vyjme z komory a usuší na vzduchu.
      5. účinné od 1. 1. 20065.5 Skvrny na chromatogramu se objeví po postříkání papíru detekčním činidlem B.2.10. V přítomnosti barya se na chromatogramu objeví červené skvrny s hodnotou Rf asi 0,10.
  1. účinné od 1. 1. 2006C. KVANTITATIVNÍ STANOVENÍ PEROXIDU VODÍKU
    1. účinné od 1. 1. 20061. PRINCIP

      účinné od 1. 1. 2006Jodometrické stanovení peroxidu vodíku je založeno na následující reakci:

      účinné od 1. 1. 2006H2O2 + 2H+ + 2I- → I2 + 2H2O

      účinné od 1. 1. 2006Tato konverze probíhá pomalu, může však být urychlena přidáním molybdenanu amonného. Vzniklý jod se stanoví titračně thiosíranem sodným a je mírou obsahu peroxidu vodíku.

    1. účinné od 1. 1. 20062. DEFINICE

      účinné od 1. 1. 2006Obsah peroxidu vodíku změřený níže popsaným způsobem se vyjádří v hmotnostních procentech výrobku (% m/m).

    1. účinné od 1. 1. 20063. POUŽITÉ CHEMIKÁLIE

      účinné od 1. 1. 2006Všechny použité chemikálie musí být čistoty p.a. nebo vyšší

      1. účinné od 1. 1. 20063.1 Kyselina sírová, 4 mol/l
      2. účinné od 1. 1. 20063.2 Jodid draselný
      3. účinné od 1. 1. 20063.3 Molybdenan amonný
      4. účinné od 1. 1. 20063.4 Thiosíran sodný, 0,2 mol/l
      5. účinné od 1. 1. 20063.5 Roztok jodidu draselného,10% (m/V), připravuje se bezprostředně před použitím
      6. účinné od 1. 1. 20063.6 Roztok molybdenanu amonného, 20% (m/V)
      7. účinné od 1. 1. 20063.7 Roztok škrobu, 1% (m/V)
    1. účinné od 1. 1. 20064. PŘÍSTROJE A POMŮCKY
      1. účinné od 1. 1. 20064.1 Kádinky na 100 ml
      2. účinné od 1. 1. 20064.2 Byreta na 50 ml
      3. účinné od 1. 1. 20064.3 Odměrné baňky na 250 ml
      4. účinné od 1. 1. 20064.4 Odměrné válce na 25 a 100 ml
      5. účinné od 1. 1. 20064.5 Nedělené pipety na 10 ml
      6. účinné od 1. 1. 20064.6 Erlenmeyerovy baňky na 250 ml
    1. účinné od 1. 1. 20065. POSTUP
      1. účinné od 1. 1. 20065.1 Do 100 ml kádinky se naváží asi 10 g (m gramů) vzorku přesně, obsahujícího asi 0,6 g peroxidu vodíku. Obsah se pomocí vody převede do odměrné baňky na 250 ml, doplní se po rysku vodou a promíchá se.
      2. účinné od 1. 1. 20065.2 10 ml roztoku vzorku (5.1) se odpipetuje do Erlenmeyerovy baňky na 250 ml (4.6) a postupně se přidá 100 ml 4 mol/l kyseliny sírové (3.1), 20 ml roztoku jodidu draselného (3.5) a tři kapky roztoku molybdenanu amonného (3.6).
      3. účinné od 1. 1. 20065.3 Vzniklý jod se okamžitě titruje 0,2 mol/l roztokem thiosíranu sodného (3.4) a těsně před dosažením bodu ekvivalence se přidá několik mililitrů roztoku škrobu (3.7) jako indikátoru. Zaznamená se spotřeba 0,2 mol/l roztoku thiosíranu sodného (3.4) v mililitrech (V).
      4. účinné od 1. 1. 20065.4 Způsobem popsaným v bodech 5.2 a 5.3 se provede slepý pokus, přičemž se nahradí 10 ml roztoku vzorku 10 ml vody. Zaznamená se spotřeba 0,1N roztoku thiosíranu sodného na slepý pokus (V0 v ml).
    1. účinné od 1. 1. 20066. VÝPOČET

      účinné od 1. 1. 2006Obsah peroxidu vodíku ve výrobku vyjádřený v hmotnostních procentech (% m/m) se vypočte pomocí následujícího vzorce:

      účinné od 1. 1. 2006

      účinné od 1. 1. 2006

      1. účinné od 1. 1. 2006ve kterém:
        účinné od 1. 1. 2006
        m= množství analyzovaného vzorku (5.1) v g,
        V0= spotřeba 0,2 mol/l roztoku thiosíranu sodného na slepý pokus (5.4) v mililitrech,
        V = spotřeba 0,2 mol/l roztoku thiosíranu sodného při titraci roztoku vzorku (5.3) v mililitrech.
    1. účinné od 1. 1. 20067. OPAKOVATELNOST

      účinné od 1. 1. 2006Pro výrobky obsahující asi 6 % (m/m) peroxidu vodíku nesmí rozdíl mezi výsledky dvou paralelních stanovení na stejném vzorku překročit absolutní hodnotu 0,2 %.

  1. účinné od 1. 1. 20069. KVALITATIVNÍ A SEMIKVANTITATIVNÍ STANOVENÍ URČITÝCH OXIDAČNÍCH BARVIV V BARVÁCH NA VLASY
    1. účinné od 1. 1. 20061. ROZSAH A OBLAST POUŽITÍ

      účinné od 1. 1. 2006Tato metoda je vhodná pro kvalitativní a semikvantitativní stanovení následujících látek v barvách na vlasy ve formě krému nebo kapaliny:

      účinné od 1. 1. 2006
      LátkySymbol
      Fenylendiaminy
      o-fenylendiamin(OPD)
      m-fenylendiamin(MPD)
      p-fenylendiamin(PPD)
      Methylfenylendiaminy
      4-methyl-1,2-fenylendiamin (toluen-3,4-diamin)(OTD)
      4-methyl-1,3-fenylendiamin (toluen-2,4-diamin)(MTD)
      2-methyl-1,4-fenylendiamin (toluen-2,5-diamin)(PTD)
      Diaminofenoly
      2,4-diaminofenol(DAP)
      Hydrochinon
      Benzen-1,4-diol(H)
      α-naftol(α-N)
      Pyrogallol
      Benzen-1,2,3-triol(P)
      Resorcinol
      Benzen-1,3-diol(R)
    1. účinné od 1. 1. 20062. PRINCIP

      účinné od 1. 1. 2006Oxidační barviva se extrahují z barev ve formě krému nebo kapaliny při pH 10 96% ethanolem a identifikují se jedno- nebo dvourozměrnou chromatografií na tenké vrstvě.

      účinné od 1. 1. 2006K semikvantitativnímu stanovení těchto látek se chromatogram vzorků porovná pomocí čtyř vyvíjecích systémů s chromatogramy referenčních látek vyvíjenými současně a za co nejpodobnějších podmínek.

    1. účinné od 1. 1. 20063. POUŽITÉ CHEMIKÁLIE

      účinné od 1. 1. 2006Všechny použité chemikálie musí být čistoty p.a. nebo vyšší

      1. účinné od 1. 1. 20063.1 Ethanol, bezvodý
      2. účinné od 1. 1. 20063.2 Aceton
      3. účinné od 1. 1. 20063.3 Ethanol, 96 % (V/V)
      4. účinné od 1. 1. 20063.4 Roztok amoniaku, 25 %
      5. účinné od 1. 1. 20063.5 L-(+)-askorbová kyselina
      6. účinné od 1. 1. 20063.6 Chloroform
      7. účinné od 1. 1. 20063.7 Cyklohexan
      8. účinné od 1. 1. 20063.8 Dusík, technický
      9. účinné od 1. 1. 20063.9 Toluen
      10. účinné od 1. 1. 20063.10 Benzen
      11. účinné od 1. 1. 20063.11 Butan-1-ol
      12. účinné od 1. 1. 20063.12 Butan-2-ol
      13. účinné od 1. 1. 20063.13 Kyselina fosforná, 50% roztok (V/V)
      14. účinné od 1. 1. 20063.14 Diazotační činidlo. Buď:
        1. účinné od 1. 1. 2006— 3-nitro-1-benzendiazonium-chlorbenzensulfonát (ve formě stabilní soli), jako např. v červeni 2 JN - Francolor,
        2. účinné od 1. 1. 2006— 2-chlor-4-nitro-1-benzendiazonium-naftalenbenzoát (ve formě stabilní soli), jako např. v činidle NNCD - referenční č. 74 150 FLUKA,

          účinné od 1. 1. 2006nebo ekvivalentní.

      1. účinné od 1. 1. 20063.15 Dusičnan stříbrný
      2. účinné od 1. 1. 20063.16 p-dimethylaminobenzaldehyd
      3. účinné od 1. 1. 20063.17 2,5-dimethylfenol
      4. účinné od 1. 1. 20063.18 Chlorid železitý, hexahydrát
      5. účinné od 1. 1. 20063.19 Kyselina chlorovodíková, 10% roztok (m/V)
      6. účinné od 1. 1. 20063.20 Standardy

        účinné od 1. 1. 2006Standardy jsou sloučeniny uvedené v oddíle 1 „Rozsah a oblast použití“. V případě aminosloučenin musí být standardní sloučenina buď ve formě hydrochloridu (mono nebo di), nebo jako volná báze.

      1. účinné od 1. 1. 20063.21 Standardní roztoky 0,5 % (m/V)

        účinné od 1. 1. 2006Připraví se 0,5% roztoky (m/V) standardů uvedených v bodě 3.20.

        účinné od 1. 1. 2006Naváží se 50 ± 1 mg standardu do odměrné baňky na 10 ml.

        účinné od 1. 1. 2006Přidá se 5 ml 96% ethanolu (3.3) a 250 ml kyseliny askorbové (3.5).

        účinné od 1. 1. 2006Roztok se alkalizuje přidáním roztoku amoniaku (3.4) na hodnotu pH 10 (zjišťuje se indikátorovým papírkem).

        účinné od 1. 1. 2006Doplní se na 10 ml 96 % ethanolem (3.3) a promíchá.

        účinné od 1. 1. 2006Roztoky je možno uchovávat po dobu jednoho týdne v chladu a temnu.

        účinné od 1. 1. 2006V některých případech může po přidání askorbové kyseliny a roztoku amoniaku vzniknout sraženina. Před dalším postupem je třeba ji nechat usadit.

      1. účinné od 1. 1. 20063.22 mobilní fáze
        1. účinné od 1. 1. 20063.22.1 Aceton ‒ chloroform ‒ toluen (35:25:40, V/V/V)
        2. účinné od 1. 1. 20063.22.2 Chloroform ‒ cyklohexan ‒ ethanol ‒ 25% roztok amoniaku (80:10:10:1, V/V/V/V)
        3. účinné od 1. 1. 20063.22.3 Benzen ‒ butan-2-ol ‒ voda (50:25:25, V/V/V). Důkladně se protřepe a po dekantaci při pokojové teplotě (20 až 25 °C) se k vyvíjení použije horní fáze.
        4. účinné od 1. 1. 20063.22.4 n-butanol ‒ chloroform ‒ činidlo M (7:70:23, V/V/V). Fáze se pečlivě dekantují při pokojové teplotě (20 až 25 °C) a použije se spodní fáze.

          účinné od 1. 1. 2006Příprava činidla M

          účinné od 1. 1. 2006
          Roztok amoniaku, 25 % (V/V)24 objemových jednotek
          Kyselina fosforná, 50 % (3.13)1 objemová jednotka
          Voda75 objemových jednotek
        5. účinné od 1. 1. 2006Poznámka:

          účinné od 1. 1. 2006Mobilní fáze obsahující amoniak je třeba bezprostředně před použitím dobře protřepat.

      1. účinné od 1. 1. 20063.23 Detekční činidla
        1. účinné od 1. 1. 20063.23.1 Diazotační činidlo

          účinné od 1. 1. 2006Připraví se 5% (m/V) vodný roztok zvoleného činidla (3.14). Tento roztok se musí připravit bezprostředně před použitím.

        1. účinné od 1. 1. 20063.23.2 Ehrlichovo činidlo

          účinné od 1. 1. 20062 g p-dimethylaminobenzaldehydu (3.16) se rozpustí ve 100 ml 10% vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové (m/V) (3.19).

        1. účinné od 1. 1. 20063.23.3 2,5-dimethylfenol – hexahydrát chloridu železitého

          účinné od 1. 1. 2006Roztok 1: Rozpustí se 1 g dimethylfenolu (3.17) ve 100 ml 96% ethanolu (3.3).

          účinné od 1. 1. 2006Roztok 2: Rozpustí se 4 g hexahydrátu chloridu železitého (3.18) ve 100 ml 96% ethanolu (3.3).

          účinné od 1. 1. 2006Při vyvolání chromatogramu se těmito roztoky provádí postřik samostatně, nejprve roztokem 1, poté roztokem 2.

        1. účinné od 1. 1. 20063.23.4 Amoniakální dusičnan stříbrný

          účinné od 1. 1. 200625% amoniak (3.4) se přidává k 5% (m/V) vodnému roztoku dusičnanu stříbrného (3.15), až se sraženina právě rozpustí. Toto reakční činidlo se připravuje bezprostředně před použitím. Nelze jej uchovávat.

    1. účinné od 1. 1. 20064. PŘÍSTROJE A POMŮCKY
      1. účinné od 1. 1. 20064.1 Obvyklé laboratorní vybavení pro chromatografii na tenké vrstvě.
        1. účinné od 1. 1. 20064.1.1 Plastový nebo skleněný kryt konstruovaný tak, aby chromatografickou desku během nanášení skvrn a sušení mohl obtékat dusík. Toto opatření je nezbytné vzhledem k náchylnosti určitých barviv k oxidaci.
        2. účinné od 1. 1. 20064.1.2 Mikrostříkačka na 10 μl, dělená po 0,2 μl, s jehlou s rovným koncem, nebo lépe dávkovač na 50 μl uchycený v držáku tak, aby deska mohla být udržována pod atmosférou dusíku.
        3. účinné od 1. 1. 20064.1.3 Hotové silikagelové desky, tloušťka 0,25 mm, rozměry 20 x 20 cm (Macherey and Nagel, Silica G-HR, na plastové podložce, nebo ekvivalentní).
      1. účinné od 1. 1. 20064.2 Odstředivka, 4000 ot./min.
      2. účinné od 1. 1. 20064.3 Centrifugační zkumavky na 10 ml se šroubovacími uzávěry potaženými PTFE nebo ekvivalentní.
    1. účinné od 1. 1. 20065. POSTUP
      1. účinné od 1. 1. 20065.1 Příprava vzorků k analýze

        účinné od 1. 1. 2006První 2 až 3 cm krému vytlačeného z tuby se odstraní.

        účinné od 1. 1. 2006Do centrifugační zkumavky (4.3) předem propláchnuté dusíkem se převede: 300 mg kyseliny askorbové se 3 g krému nebo 3 g homogenizované kapaliny.

        účinné od 1. 1. 2006Přidává se po kapkách 25 % amoniak (3.4) až pH dosáhne hodnoty 10. Doplní se na 10 ml 96 % ethanolem (3.3).

        účinné od 1. 1. 2006Homogenizuje se pod atmosférou dusíku (3.8), zazátkuje se a centrifuguje se po 10 minut při 4000 ot./min.

        účinné od 1. 1. 2006Použije se supernatant.

      1. účinné od 1. 1. 20065.2 Chromatografie
        1. účinné od 1. 1. 20065.2.1 Nanášení na desku

          účinné od 1. 1. 2006Pod atmosférou dusíku (3.8) se na chromatografickou desku (4.1.3) nanese po 1 μl každé shora uvedené referenční látky v devíti bodech vzdálených od sebe 1,5 cm podél linie vzdálené asi 1,5 cm od okraje desky.

          účinné od 1. 1. 2006Referenční látky se nanášejí v tomto uspořádání:

          účinné od 1. 1. 2006
          12345678 9
          RPHPPDDAPPTDOPDOTD MPD
          MTDα-N

          účinné od 1. 1. 2006Dále se v bodech 10 a 11 nanesou vždy 2 μl zkoumaných roztoků získaných podle bodu 5.1.

          účinné od 1. 1. 2006Deska se uchovává pod atmosférou dusíku (3.8) až do okamžiku, kdy je zahájeno vyvíjení chromatogramu.

        1. účinné od 1. 1. 20065.2.2 Vyvíjení

          účinné od 1. 1. 2006Deska se vloží do komory předem propláchnuté dusíkem (3.8) a nasycené jedním ze čtyř rozpouštědel (3.22) a nechá se vyvíjet při laboratorní teplotě (20 až 25 °C) ve tmě, dokud čelo rozpouštědla nedosáhne vzdálenosti asi 15 cm od startovací linie.

          účinné od 1. 1. 2006Deska se vyjme a usuší pod atmosférou dusíku (3.8) při laboratorní teplotě.

        1. účinné od 1. 1. 20065.2.3 Vyvolání

          účinné od 1. 1. 2006Deska se postříká odpovídajícím detekčním činidlem uvedeným v bodě 3.23.

        1. účinné od 1. 1. 20065.2.4 Kvalitativní stanovení

          účinné od 1. 1. 2006Porovnají se hodnoty Rf a barvy skvrn vzorku a chromatografovaných referenčních látek.

          účinné od 1. 1. 2006V tabulce 1 jsou uvedeny příklady hodnot Rf a barev skvrn pro jednotlivé látky v závislosti na použitém rozpouštědle a indikátoru.

          účinné od 1. 1. 2006Nejistý důkaz je někdy možno potvrdit metodou standardního přípravku.

        1. účinné od 1. 1. 20065.2.5 Semikvantitativní odhad

          účinné od 1. 1. 2006Intenzita skvrn jednotlivých látek identifikovaných v bodě 5.2.4 se porovnává vizuálně s odpovídajícím rozsahem koncentrací standardních látek.

          účinné od 1. 1. 2006Při nadměrně vysoké koncentraci jedné nebo více látek nalezených ve vzorku se extrakt vzorku zředí a měření se opakuje.

      účinné od 1. 1. 2006TABULKA 1

      účinné od 1. 1. 2006Hodnoty Rf a barvy získané bezprostředně po vyvolání

      účinné od 1. 1. 2006
      TABULKA 1 Hodnoty Rf a barvy získané bezprostředně po vyvolání
      Standard (3.20)Mobilní fázeMobilní fáze
      Hodnoty RfVýsledné barvy
      (3.22.1)(3.22.2)(3.22.3)(3.22.4)Diazo (3.23.1)Ehrlich (3.23.2)Dimethyl-fenol (3.23.3)AgNO3 (3.23.4)
      OPD0,620,600,300,57světle hnědá——světle hnědá
      MPD0,400,600,470,48fialově hnědá (*)žlutásvětle hnědásvětle hnědá
      PPD0,200,500,300,48hnědájasně červená (*)fialovášedá
      OTD0,600,600,530,60hnědá (*)světle oranžovásvětle hnědášedavě hnědá
      MTD0,400,670,450,60červenavě hnědá (*)žlutáhnědáčerná
      PTD0,330,650,370,70hnědáoranžováfialová (*)šedá
      DAP0,07—00,05hnědá (*)oranžováfialováhnědá
      H0,500,350,800,20—oranžováfialováčerná (*)
      α-N0,900,800,900,75oranžově hnědá—fialová (*)černá
      P0,37—0,670,05hnědávelmi světle fialovávelmi světle hnědáhnědá (*)
      R0,500,370,800,17oranžová (*)světle fialovávelmi světle hnědásvětle hnědá
    2. účinné od 1. 1. 2006Poznámka
      1. účinné od 1. 1. 20061. OPD se ukazuje pouze slabě; musí se použít rozpouštědlo (3.22.3), aby se jasně odlišil od OTD.
      2. účinné od 1. 1. 20062. (*) Označuje nejlépe vyvolané barvy.
    1. účinné od 1. 1. 20066. ZKOUŠKA DVOUROZMĚRNOU CHROMATOGRAFIÍ NA TENKÉ VRSTVĚ

      účinné od 1. 1. 2006Tato metoda dvourozměrné chromatografie vyžaduje použití dalších standardů a reakčních činidel.

      1. účinné od 1. 1. 20066.1 Další standardy a činidla
        1. účinné od 1. 1. 20066.1.1 β-naftol (β-N)
        2. účinné od 1. 1. 20066.1.2 2-aminofenol (OAP)
        3. účinné od 1. 1. 20066.1.3 3-aminofenol (MAP)
        4. účinné od 1. 1. 20066.1.4 4-aminofenol (PAP)
        5. účinné od 1. 1. 20066.1.5 2-nitro-1,4-fenylendiamin (2-NPPD)
        6. účinné od 1. 1. 20066.1.6 4-nitro-1,2-fenylendiamin (4-NOPD)

          účinné od 1. 1. 2006Připraví se 0,5 % (m/V) roztoky všech dalších standardů způsobem popsaným v bodě 3.21.

      1. účinné od 1. 1. 20066.2 Další mobilní fáze
        1. účinné od 1. 1. 20066.2.1 Ethylacetát – cyklohexan – 25 % roztok amoniaku (65:30:0,5, V/V/V)
      1. účinné od 1. 1. 20066.3 Další detekční systém

        účinné od 1. 1. 2006Do vyvíjecí komory pro chromatografii na tenké vrstvě se vloží skleněná nádobka, přidají se asi 2 g krystalického jodu a komora se uzavře odpovídajícím víkem.

      1. účinné od 1. 1. 20066.4 Chromatografie
        1. účinné od 1. 1. 20066.4.1 Podle obrázku 6 se na desce pro chromatografii na tenké vrstvě (4.1.3) vyznačí na straně s adsorbentem dvě linky.
        2. účinné od 1. 1. 20066.4.2 V dusíkové atmosféře (4.1.1) se nanese 1 až 4 μl extraktu (5.1) do základního bodu 1 (obr. 6), který leží asi 2 cm od obou okrajů. Množství extraktu závisí na intenzitě skvrn na chromatogramech podle bodu 5.2.
        3. účinné od 1. 1. 20066.4.3 Mezi body 2 a 3 (obr. 6) se nanesou oxidační barviva identifikovaná nebo pokládaná za identifikovaná podle bodu 5.2 (vzdálenost mezi body je 1,5 cm). Nanáší se 2 μl každého referenčního roztoku – kromě DAP, který je nutno nanést v objemu 6 μl. Nanášení se provádí v atmosféře dusíku (6.4.2).
        4. účinné od 1. 1. 20066.4.4 Postup podle bodu 6.4.3 se opakuje v základních bodech 4 a 5 (obr. 6) a deska se uchovává pod dusíkem až do zahájení vyvolávání chromatogramu (vzdálenost mezi body je 1,5 cm).
        5. účinné od 1. 1. 20066.4.5 Chromatografická komora se propláchne dusíkem (3.8) a umístí se do ní vhodné množství mobilní fáze 3.22.2. Deska (6.4.4) se vloží do komory a vyvíjí se ve tmě v prvním vyvíjecím směru (obr. 6).

          účinné od 1. 1. 2006Vyvíjí se, dokud čelo rozpouštědla nedosáhne linie vyznačené na desce (přibližně 13 cm).

        1. účinné od 1. 1. 20066.4.6 Deska se z komory vyjme a umístí do jiného chromatografické komory, předem propláchnuté dusíkem, aby se vyvíjecí rozpouštědlo odpařovalo alespoň 60 minut.
        2. účinné od 1. 1. 20066.4.7 Pomocí dělené zkumavky se do komory předem propláchnuté dusíkem (3.8) vnese vhodné množství mobilní fáze (6.2), do komory se vloží deska otočená o 90° (6.4.6) a chromatogram se vyvíjí ve druhém směru (opět ve tmě), dokud čelo rozpouštědla nedosáhne linie vyznačené na straně s adsorbentem. Deska se vyjme z komory a rozpouštědlo se nechá odpařit na vzduchu.
        3. účinné od 1. 1. 20066.4.8 Deska se na 10 minut umístí do chromatografické komory obsahující páry jodu (6.3) a dvourozměrný chromatogram se interpretuje s využitím hodnot Rf a barev současně chromatografovaných standardů (hodnoty Rf a barvy skvrn jsou uvedeny v tabulce II).
        4. účinné od 1. 1. 2006Poznámka

          účinné od 1. 1. 2006Nejlepšího vybarvení skvrn se dosáhne tehdy, ponechá-li se po vyvíjení chromatogram v atmosféře par jódu po dobu půl hodiny.

        1. účinné od 1. 1. 20066.4.9 Přítomnost oxidačních barviv nalezených podle bodu 6.4.8 je možno definitivně potvrdit opakováním postupu popsaného v bodech 6.4.1 až 6.4.8, kdy se v základním bodě 1 přes množství extraktu podle bodu 6.4.2 nanese 1 μl referenčních látek identifikovaných v bodu 6.4.8. Neobjeví-li se oproti chromatogramu získaného podle bodu 6.4.8 žádná jiná skvrna, je interpretace chromatogramu podle bodu 6.4.8 správná.

      účinné od 1. 1. 2006Tabulka II

      účinné od 1. 1. 2006Barvy skvrn standardů po chromatografii a vyvíjení parami jodu

      účinné od 1. 1. 2006
      TABULKA 1 Hodnoty Rf a barvy získané bezprostředně po vyvolání Tabulka II Barvy skvrn standardů po chromatografii a vyvíjení parami jodu
      StandardyBarvy po vyvíjení parami jodu
      Rbéžová
      Phnědá
      α-Nfialová
      β-Nsvětle hnědá
      Hfialově hnědá
      MPDžlutavě hnědá
      PPDfialově hnědá
      MTDtmavě hnědá
      PTDžlutavě hnědá
      DAPtmavě hnědá
      OAPoranžová
      MAPžlutavě hnědá
      PAPfialově hnědá
      2-NPPDhnědá
      4-NOPDoranžová
      účinné od 1. 1. 2006Obrázek

      účinné od 1. 1. 2006Obrázek 6

  1. účinné od 1. 1. 200610. KVALITATIVNÍ A KVANTITATIVNÍ STANOVENÍ DUSITANŮ
    1. účinné od 1. 1. 2006A. KVALITATIVNÍ STANOVENÍ
      1. účinné od 1. 1. 20061. ROZSAH A OBLAST POUŽITÍ

        účinné od 1. 1. 2006Tato metoda je vhodná ke kvalitativnímu stanovení dusitanů v kosmetických prostředcích, zejména v krémech a pastách.

      1. účinné od 1. 1. 20062. PRINCIP

        účinné od 1. 1. 2006Přítomnost dusitanu indikuje vznik zbarvených derivátů s 2-aminobenzaldehyd-fenylhydrazonem (Nitrin®).

      1. účinné od 1. 1. 20063. POUŽITÉ CHEMIKÁLIE

        účinné od 1. 1. 2006Všechny použité chemikálie musí být čistoty p.a. nebo vyšší

        1. účinné od 1. 1. 20063.1 Zředěná kyselina sírová: 2 ml koncentrované kyseliny sírové se zředí 11 ml destilované vody.
        2. účinné od 1. 1. 20063.2 Zředěná kyselina chlorovodíková: 1 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové se zředí 11 ml destilované vody.
        3. účinné od 1. 1. 20063.3 Methanol
        4. účinné od 1. 1. 20063.4 Roztok 2-aminobenzaldehyd-fenylhydrazonu (reakční činidlo Nitrin®) v methanolu

          účinné od 1. 1. 2006Naváží se 2,0 g Nitrinu® a převede se kvantitativně do odměrné baňky na 100 ml. Po kapkách se přidají 4 ml zředěné kyseliny chlorovodíkové (3.2) a protřepe se. Doplní se po rysku methanolem a míchá, dokud se roztok úplně nevyčeří. Roztok se uchovává v hnědé skleněné lahvi (4.3).

      1. účinné od 1. 1. 20064. PŘÍSTROJE A POMŮCKY
        1. účinné od 1. 1. 20064.1 Kádinky na 50 ml
        2. účinné od 1. 1. 20064.2 Odměrná baňka na 100 ml
        3. účinné od 1. 1. 20064.3 Hnědá skleněná láhev na 125 ml
        4. účinné od 1. 1. 20064.4 Skleněná deska, 10 x 10 cm
        5. účinné od 1. 1. 20064.5 Špachtle z plastu
        6. účinné od 1. 1. 20064.6 Filtrační papír, 10 x 10 cm
      1. účinné od 1. 1. 20065. POSTUP
        1. účinné od 1. 1. 20065.1 Část analyzovaného vzorku se rovnoměrně rozetře na skleněnou desku (4.4) tak, aby byl povrch pokryt vrstvou nejvýše 1 cm silnou.
        2. účinné od 1. 1. 20065.2 List filtračního papíru (4.6) se nasákne destilovanou vodou. Položí se na vzorek a přitiskne špachtlí z plastu (4.5).
        3. účinné od 1. 1. 20065.3 Počká se asi 1 minutu a do středu filtračního papíru se nanesou:
          1. účinné od 1. 1. 2006— 2 kapky zředěné kyseliny sírové (3.1),
          2. účinné od 1. 1. 2006— poté dvě kapky roztoku Nitrinu® (3.4).
        1. účinné od 1. 1. 20065.4 Po 5 až 10 sekundách se filtrační papír odstraní a prohlédne se proti dennímu světlu. Červenofialové zbarvení indikuje přítomnost dusitanů.

          účinné od 1. 1. 2006Je-li obsah dusitanů nízký, změní se červenofialové zbarvení během 5 až 15 sekund na žluté. Je-li přítomno velké množství dusitanů, dojde k této barevné změně až po 1 nebo 2 minutách.

      1. účinné od 1. 1. 20066. POZNÁMKA

        účinné od 1. 1. 2006Intenzita červenofialového zbarvení a doba, která uplyne před změnou na žlutou, naznačují obsah dusitanů ve vzorku.

    1. účinné od 1. 1. 2006B. KVANTITATIVNÍ STANOVENÍ
      1. účinné od 1. 1. 20061. ROZSAH A OBLAST POUŽITÍ

        účinné od 1. 1. 2006Metoda popisuje kvantitativní stanovení dusitanů v kosmetických prostředcích.

      1. účinné od 1. 1. 20062. DEFINICE

        účinné od 1. 1. 2006Obsah dusitanů ve vzorku, stanovený touto metodou, se vyjadřuje v hmotnostních procentech dusitanu sodného.

      1. účinné od 1. 1. 20063. PRINCIP

        účinné od 1. 1. 2006Po zředění vzorku vodou a vyčeření se nechá proběhnout reakce přítomných dusitanů se sulfanilamidem a N-1-naftylethylendiaminem a absorbance vzniklého zbarvení se měří při 538 nm.

      1. účinné od 1. 1. 20064. POUŽITÉ CHEMIKÁLIE

        účinné od 1. 1. 2006Všechny použité chemikálie musí být čistoty p.a. nebo vyšší

        1. účinné od 1. 1. 20064.1 Čeřidla: tato činidla nelze používat déle než jeden týden po přípravě.
          1. účinné od 1. 1. 20064.1.1 Carrezovo činidlo I:

            účinné od 1. 1. 2006106 g hexakyanoželeznatanu draselného K4Fe(CN)6∙3H2O se rozpustí v destilované vodě a zředí vodou na 1000 ml.

          1. účinné od 1. 1. 20064.1.2 Carrezovo činidlo II:

            účinné od 1. 1. 2006219,5 g octanu zinečnatého Zn(CH3COO)2∙2H2O a 30 ml ledové kyseliny octové se rozpustí v destilované vodě a zředí vodou na 1000 ml.

        1. účinné od 1. 1. 20064.2 Roztok dusitanu sodného:

          účinné od 1. 1. 20060,500 g dusitanu sodného se rozpustí v destilované vodě v odměrné baňce na 1000 ml a doplní se vodou po rysku. 10,0 ml tohoto zásobního standardního roztoku se zředí na 500 ml; 1 ml výsledného roztoku = 10 μg NaNO2.

        1. účinné od 1. 1. 20064.3 Roztok hydroxidu sodného, 1 mol/l
        2. účinné od 1. 1. 20064.4 Roztok sulfanilamid-hydrochloridu, 0,2%:

          účinné od 1. 1. 20062,0 g sulfanilamidu se za zahřívání rozpustí v 800 ml vody. Po ochlazení se za míchání přidá 100 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Zředí se vodou na 1000 ml.

        1. účinné od 1. 1. 20064.5 Kyselina chlorovodíková, 5 mol/l
        2. účinné od 1. 1. 20064.6 N-1-naftylové činidlo:

          účinné od 1. 1. 2006Tento roztok se musí připravit v den použití. Rozpustí se 0,1 g dihydrochloridu N-naftylethylendiaminu ve vodě a zředí se vodou na 100 ml.

      1. účinné od 1. 1. 20065. PŘÍSTROJE A POMŮCKY
        1. účinné od 1. 1. 20065.1 Analytické váhy
        2. účinné od 1. 1. 20065.2 Odměrné baňky na 100, 250, 500 a 1000 ml
        3. účinné od 1. 1. 20065.3 Nedělené nebo dělené pipety
        4. účinné od 1. 1. 20065.4 Odměrné válce na 100 ml
        5. účinné od 1. 1. 20065.5 Skládaný filtrační papír, bez dusitanů, průměr 15 cm
        6. účinné od 1. 1. 20065.6 Vodní lázeň
        7. účinné od 1. 1. 20065.7 Spektrofotometr a kyvety s optickou drahou 1 cm
        8. účinné od 1. 1. 20065.8 pH-metr
        9. účinné od 1. 1. 20065.9 Mikrobyreta na 10 ml
        10. účinné od 1. 1. 20065.10 Kádinky na 250 ml
      1. účinné od 1. 1. 20066. POSTUP
        1. účinné od 1. 1. 20066.1 S přesností na 0,1 mg se naváží asi 0,5 g (m gramů) homogenizovaného vzorku, kvantitativně se převede horkou destilovanou vodou do kádinky na 250 ml (5.10) a doplní horkou destilovanou vodou asi na 150 ml. Kádinka (5.10) se na půl hodiny vloží do vodní lázně (5.6) vyhřáté na 80 °C. Během této doby se obsah občas protřepe.
        2. účinné od 1. 1. 20066.2 Ochladí se na laboratorní teplotu a postupně se za míchání přidají 2 ml Carrezova činidla I (4.1.1) a 2 ml Carrezova činidla II (4.1.2).
        3. účinné od 1. 1. 20066.3 Přidává se 1 mol/l roztok hydroxidu sodného (4.3), dokud se pH neupraví na 8,3. (Použije se pH-metr (5.8)). Obsah se kvantitativně převede do odměrné baňky na 250 ml (5.2) a doplní destilovanou vodou po rysku.
        4. účinné od 1. 1. 20066.4 Obsah se promíchá a zfiltruje přes skládaný papírový filtr (5.5).
        5. účinné od 1. 1. 20066.5 Do odměrné baňky na 100 ml (5.2) se odpipetuje (5.3) odpovídající alikvotní část (V mililitrů) čirého filtrátu, avšak ne více než 25 ml, a doplní se destilovanou vodou na objem 60 ml.
        6. účinné od 1. 1. 20066.6 Po promíchání se přidá 10,0 ml roztoku sulfanilamid-hydrochloridu (4.4) a poté 6,0 ml 5 mol/l kyseliny chlorovodíkové (4.5). Promíchá se a ponechá stát 5 minut. Přidají se 2,0 ml N-1-naftylového činidla (4.6), promíchá se a ponechá stát 3 minuty. Zředí se vodou po rysku a promíchá.
        7. účinné od 1. 1. 20066.7 Připraví se slepý pokus opakováním operací popsaných v bodech 6.5 a 6.6 bez přídavku N-1-naftylového činidla (4.6).
        8. účinné od 1. 1. 20066.8 Změří se (5.7) absorbance roztoku připraveného podle bodu 6.6 při 538 nm proti roztoku ze slepého pokusu (6.7).
        9. účinné od 1. 1. 20066.9 Z kalibračního grafu (6.10) se odečte obsah dusitanu sodného v mikrogramech na 100 ml roztoku (m1 mikrogramů), odpovídající absorbanci změřené podle bodu 6.8.
        10. účinné od 1. 1. 20066.10 S využitím roztoku dusitanu sodného o koncentraci 10 μg/ml (4.2) se sestrojí kalibrační graf pro koncentrace 0, 20, 40, 60, 80 a 100 μg dusitanu sodného ve 100 ml.
      1. účinné od 1. 1. 20067. VÝPOČET

        účinné od 1. 1. 2006Obsah dusitanu sodného ve vzorku vyjádřený v hmotnostních procentech se vypočte pomocí následujícího vzorce:

        účinné od 1. 1. 2006

        1. účinné od 1. 1. 2006kde:
          účinné od 1. 1. 2006
          TABULKA 1 Hodnoty Rf a barvy získané bezprostředně po vyvolání Tabulka II Barvy skvrn standardů po chromatografii a vyvíjení parami jodu Obrázek 6
          m= hmotnost vzorku odebraného pro analýzu v g (6.1),
          m1= obsah dusitanu sodného v μg zjištěný podle bodu 6.9,
          V = počet mililitrů filtrátu použitého pro měření (6.5).
      1. účinné od 1. 1. 20068. OPAKOVATELNOST

        účinné od 1. 1. 2006Pro výrobky obsahující asi 0,2 % (m/m) dusitanu sodného nesmí rozdíl mezi výsledky dvou paralelních stanovení na stejném vzorku překročit absolutní hodnotu 0,005 %.

  1. účinné od 1. 1. 200611. KVANTITATIVNÍ STANOVENÍ RESORCINOLU V ŠAMPONECH A VLASOVÝCH LOTIONECH
    1. účinné od 1. 1. 20061. ROZSAH A OBLAST POUŽITÍ

      účinné od 1. 1. 2006V této metodě je specifikováno kvantitativní stanovení resorcinolu v šamponech a vlasových vodách plynovou chromatografií. Metoda je vhodná pro koncentrace od 0,1 až do 2,0 hmotnostních procent vzorku.

    1. účinné od 1. 1. 20062. DEFINICE

      účinné od 1. 1. 2006Obsah resorcinolu stanovený ve vzorku touto metodou se vyjadřuje v hmotnostních procentech.

    1. účinné od 1. 1. 20063. PRINCIP

      účinné od 1. 1. 2006Resorcinol a 3,5-dihydroxytoluen (5-methylresorcinol), přidávaný jako vnitřní standard, se ze vzorku oddělí chromatografií na tenké vrstvě. Obě sloučeniny se izolují seškrabáním jejich skvrn z horní vrstvy desky a extrakcí methanolem. Nakonec se vyextrahované sloučeniny vysuší, podrobí silylaci a stanoví se plynovou chromatografií.

    1. účinné od 1. 1. 20064. POUŽITÉ CHEMIKÁLIE

      účinné od 1. 1. 2006Všechny použité chemikálie musí být čistoty p.a. nebo vyšší

      1. účinné od 1. 1. 20064.1 Kyselina chlorovodíková, 25% (m/m)
      2. účinné od 1. 1. 20064.2 Methanol
      3. účinné od 1. 1. 20064.3 Ethanol, 96 % (V/V)
      4. účinné od 1. 1. 20064.4 Hotové silikagelové TLC desky (plastové nebo hliníkové) s fluorescenčním indikátorem. Desky se deaktivují následujícím postupem: silikagelová deska se nastříká vodou, dokud se povrch neleskne. Nastříkané desky se nechají schnout při laboratorní teplotě jednu až tři hodiny.
      5. účinné od 1. 1. 2006Poznámka

        účinné od 1. 1. 2006Bez deaktivace může docházet ke ztrátám resorcinolu v důsledku ireverzibilní adsorpce na silikagelu.

      1. účinné od 1. 1. 20064.5 Vyvíjecí rozpouštědlo: aceton – chloroform – kyselina octová (20:75:5, V/V/V).
      2. účinné od 1. 1. 20064.6 Standardní roztok resorcinolu: rozpustí se 400 mg resorcinolu ve 100 ml 96% ethanolu (4.3) (1 ml odpovídá 4000 μg resorcinolu).
      3. účinné od 1. 1. 20064.7 Roztok vnitřního standardu: rozpustí se 400 mg 3,5-dihydroxytoluenu (DHT) ve 100 ml 96% ethanolu (4.3) (1 ml odpovídá 4000 μg DHT).
      4. účinné od 1. 1. 20064.8 Směs standardů: v odměrné baňce na 100 ml se smíchá 10 ml roztoku 4.6 a 10 ml roztoku 4.7, doplní se po rysku 96% ethanolem (4.3) a promíchá (1 ml roztoku odpovídá 400 μg resorcinolu a 400 μg DHT).
      5. účinné od 1. 1. 20064.9 Silylační činidla:
        1. účinné od 1. 1. 20064.9.1 N,O-bis(trimethylsilyl)trifluoracetamid (BSTFA)
        2. účinné od 1. 1. 20064.9.2 Hexamethyldisilazan (HMDS)
        3. účinné od 1. 1. 20064.9.3 Chlortrimethylsilan (TMCS)
    1. účinné od 1. 1. 20065. PŘÍSTROJE A POMŮCKY
      1. účinné od 1. 1. 20065.1 Obvyklé vybavení pro chromatografii na tenké vrstvě a plynovou chromatografii
      2. účinné od 1. 1. 20065.2 Skleněné laboratorní nádobí
    1. účinné od 1. 1. 20066. POSTUP
      1. účinné od 1. 1. 20066.1 Příprava vzorku
        1. účinné od 1. 1. 20066.1.1 Do kádinky na 150 ml se přesně naváží zkušební vzorek (m gramů) prostředku, který obsahuje asi 20 až 50 mg resorcinolu.
        2. účinné od 1. 1. 20066.1.2 Okyselí se kyselinou chlorovodíkovou (4.1) do kyselé reakce (je potřeba přibližně 2 až 4 ml), přidá se 10 ml (40 mg DHT) roztoku vnitřního standardu (4.7) a promíchá se. Ethanolem (4.3) se převede do odměrné baňky na 100 ml, doplní se ethanolem po rysku a promíchá.
        3. účinné od 1. 1. 20066.1.3 250 μl roztoku (6.1.2) se nanese na deaktivovanou desku se silikagelem (4.4) jako nepřerušovaná linie o délce přibližně 8 cm. Je třeba dbát na to, aby linie byla co nejužší.
        4. účinné od 1. 1. 20066.1.4 Na stejnou desku se stejným způsobem (6.1.3) nanese 250 μl směsi standardů (4.8).
        5. účinné od 1. 1. 20066.1.5 Do dvou bodů startovací linie se nanese po 5 μl roztoků 4.6 a 4.7 k usnadnění lokalizace skvrn po vyvolání.
        6. účinné od 1. 1. 20066.1.6 Deska se vyvíjí v nenasycené komoře naplněné vyvíjecím rozpouštědlem (4.5), dokud čelo rozpouštědla nedosáhne vzdálenosti 12 cm od startovací linie; obvykle to trvá asi 45 minut. Deska se usuší na vzduchu a zóna resorcinolu/DHT se lokalizuje pod krátkovlnným UV světlem (254 nm). Obě tyto sloučeniny mají přibližně stejnou hodnotu Rf. Poloha pásů se vyznačí tužkou ve vzdálenosti 2 mm od vnějšího tmavého rozhraní pásů. Tyto zóny se z desky odstraní a adsorbenty každého pásu se shromáždí v lahvi na 10 ml.
        7. účinné od 1. 1. 20066.1.7 Adsorbent obsahující vzorek a adsorbent obsahující směs standardů se extrahují následujícím způsobem:

          účinné od 1. 1. 2006Přidají se 2 ml methanolu (4.2) a extrahuje se jednu hodinu za neustálého míchání. Směs se zfiltruje a extrakce se opakuje po dobu dalších 15 minut se 2 ml methanolu.

        1. účinné od 1. 1. 20066.1.8 Extrakty se spojí a rozpouštědlo se nechá přes noc odpařit ve vakuovém exsikátoru naplněném vhodným sušicím prostředkem. Nezahřívat.
        2. účinné od 1. 1. 20066.1.9 Odparky (6.1.8) se silylují způsobem popsaným v bodě 6.1.9.1 nebo 6.1.9.2.
          1. účinné od 1. 1. 20066.1.9.1 Mikrostříkačkou se přidá 200 μl BSTFA (4.9.1) a směs se nechá v uzavřené nádobě 12 hodin při pokojové teplotě.
          2. účinné od 1. 1. 20066.1.9.2 Mikrostříkačkou se postupně přidá 200 μl HMDS (4.9.2) a 100 μl TMCS (4.9.3), směs se zahřívá v uzavřené nádobě 30 minut na 60 °C. Směs se ochladí.
      1. účinné od 1. 1. 20066.2 Plynová chromatografie
        1. účinné od 1. 1. 20066.2.1 Chromatografické podmínky

          účinné od 1. 1. 2006Kolona musí poskytovat rozlišení R rovné nebo lepší než 1,5, kde:

          účinné od 1. 1. 2006

          1. účinné od 1. 1. 2006kde:
            účinné od 1. 1. 2006
            TABULKA 1 Hodnoty Rf a barvy získané bezprostředně po vyvolání Tabulka II Barvy skvrn standardů po chromatografii a vyvíjení parami jodu Obrázek 6
            r1 a r2= retenční časy dvou píků v min.,
            w1 a w2= šířky píků v polovině výšky píků v mm,
            d'= rychlost posuvu papíru v mm/min.

          účinné od 1. 1. 2006Následující kolona a podmínky pro plynovou chromatografii se ukázaly jako vhodné:

          1. účinné od 1. 1. 2006Materiál kolony: nerezová ocel
          2. účinné od 1. 1. 2006Délka 200 cm
          3. účinné od 1. 1. 2006Vnitřní průměr: ≈3 mm
          4. účinné od 1. 1. 2006Náplň: 10% OV-17 na Chromosorbu WAW, 100 až 120 mesh
          5. účinné od 1. 1. 2006Plamenový ionizační detektor
          6. účinné od 1. 1. 2006Teplotní režim:
          7. účinné od 1. 1. 2006Kolona: 185 °C (izotermální)
          8. účinné od 1. 1. 2006Detektor: 250 °C
          9. účinné od 1. 1. 2006Nástřik: 250 °C
          10. účinné od 1. 1. 2006Nosný plyn: dusík
          11. účinné od 1. 1. 2006Průtok: 45 ml/min

          účinné od 1. 1. 2006Průtoky vodíku a vzduchu se nastaví podle pokynů výrobce.

        1. účinné od 1. 1. 20066.2.2 Do plynového chromatografu se nastříkne 1 až 3 μl roztoků připravených podle bodu 6.1.9. Pro každý roztok (6.1.9) se provede pět nástřiků, změří se plochy píků, vypočte se průměr a poměr ploch píků: S = plocha píku resorcinolu/plocha píku DHT.
    1. účinné od 1. 1. 20067. VÝPOČET

      účinné od 1. 1. 2006Koncentrace resorcinolu ve vzorku, vyjádřená v hmotnostních procentech (% m/m), je dána vztahem:

      účinné od 1. 1. 2006

      účinné od 1. 1. 2006
      TABULKA 1 Hodnoty Rf a barvy získané bezprostředně po vyvolání Tabulka II Barvy skvrn standardů po chromatografii a vyvíjení parami jodu Obrázek 6
      M= hmotnost zkušebního vzorku v g (6.1.1),
      Svzorku= průměrná plocha píku (6.2.2) pro roztok vzorku,
      Sstandardní směsi = průměrná plocha píku (6.2.2) pro směs standardů.
    1. účinné od 1. 1. 20068. OPAKOVATELNOST

      účinné od 1. 1. 2006Pro výrobky obsahující asi 0,5 % (m/m) resorcinolu nesmí rozdíl mezi výsledky dvou paralelních stanovení na stejném vzorku překročit absolutní hodnotu 0,025 %.

  1. účinné od 1. 1. 200612. KVANTITATIVNÍ STANOVENÍ METHANOLU VZHLEDEM K ETHANOLU NEBO PROPAN-2-OLU
    1. účinné od 1. 1. 20061. ROZSAH A OBLAST POUŽITÍ

      účinné od 1. 1. 2006V metodě je popsána analýza methanolu ve všech typech kosmetických prostředků (včetně aerosolů) plynovou chromatografií.

      účinné od 1. 1. 2006Metodou je možno stanovit relativní hladiny od 0 do 10 %.

    1. účinné od 1. 1. 20062. DEFINICE

      účinné od 1. 1. 2006Obsah methanolu, stanovený podle této metody, se vyjadřuje v hmotnostních procentech methanolu vzhledem k ethanolu nebo propan-2-olu.

    1. účinné od 1. 1. 20063. PRINCIP

      účinné od 1. 1. 2006Stanovení se provádí plynovou chromatografií.

    1. účinné od 1. 1. 20064. POUŽITÉ CHEMIKÁLIE

      účinné od 1. 1. 2006Všechny použité chemikálie musí být čistoty p.a. nebo vyšší

      1. účinné od 1. 1. 20064.1 Methanol
      2. účinné od 1. 1. 20064.2 Absolutní ethanol
      3. účinné od 1. 1. 20064.3 Propan-2-ol
      4. účinné od 1. 1. 20064.4 Chloroform zbavený alkoholů promytím vodou
    1. účinné od 1. 1. 20065. PŘÍSTROJE A POMŮCKY
      1. účinné od 1. 1. 20065.1 Plynový chromatograf:
        1. účinné od 1. 1. 2006s tepelně vodivostním detektorem (katarometr) pro aerosolové vzorky,
        2. účinné od 1. 1. 2006s plamenovým ionizačním detektorem pro jiné než aerosolové vzorky.
      1. účinné od 1. 1. 20065.2 Odměrné baňky na 100 ml
      2. účinné od 1. 1. 20065.3 Pipety na 2 ml, 20 ml a 0 až 1 ml
      3. účinné od 1. 1. 20065.4 Mikrostříkačky na 0 až 100 μl a 0 až 5 μl

        účinné od 1. 1. 2006a (pouze pro aerosolové vzorky) speciální plynotěsná injekční stříkačka s posuvným ventilem (viz obrázek 5, kapitola „Příprava vzorků v laboratoři“).

    1. účinné od 1. 1. 20066. POSTUP
      1. účinné od 1. 1. 20066.1 Příprava vzorku
        1. účinné od 1. 1. 20066.1.1 Vzorky z prostředků v obalech na aerosoly se odebírají postupem podle kapitoly „Příprava vzorků v laboratoři“ a poté se analyzují plynovou chromatografií za podmínek popsaných v bodě 6.2.1.
        2. účinné od 1. 1. 20066.1.2 Vzorky jiných než aerosolových prostředků, odebíraných postupem podle výše uvedené kapitoly „Příprava vzorků v laboratoři“, se zředí vodou na koncentraci 1 až 2 % ethanolu či propan-2-olu a poté se analyzují plynovou chromatografií za podmínek popsaných v bodě 6.2.2.
      1. účinné od 1. 1. 20066.2 Plynová chromatografie
        1. účinné od 1. 1. 20066.2.1 Pro aerosolové vzorky se použije tepelně vodivostní detektor (katarometr).
          1. účinné od 1. 1. 20066.2.1.1 Náplní kolony je 10 % Hallcomid M18 na Chromosorbu WAW, 100 až 200 mesh.
          2. účinné od 1. 1. 20066.2.1.2 Kolona musí poskytovat rozlišení R rovné nebo lepší než 1,5, kde:

            účinné od 1. 1. 2006

            1. účinné od 1. 1. 2006kde:
              účinné od 1. 1. 2006
              TABULKA 1 Hodnoty Rf a barvy získané bezprostředně po vyvolání Tabulka II Barvy skvrn standardů po chromatografii a vyvíjení parami jodu Obrázek 6
              r1 a r2= retenční časy dvou píků v min.,
              w1 a w2= šířky píků v polovině výšky píků v mm,
              d'= rychlost posuvu papíru v mm/min.
          1. účinné od 1. 1. 20066.2.1.3 Tohoto rozlišení je možno dosáhnout za následujících podmínek:
            účinné od 1. 1. 2006
            TABULKA 1 Hodnoty Rf a barvy získané bezprostředně po vyvolání Tabulka II Barvy skvrn standardů po chromatografii a vyvíjení parami jodu Obrázek 6
            Materiál kolony:nerezová ocel
            Délka:3,5 metru
            Průměr:3 mm
            Proud můstkem katarometru:150 mA
            Nosný plyn:helium
            Tlak:2,5 bar
            Průtok:45 ml/min
            Teplotní režim:
            Nástřik:150 °C
            Detektor:150 °C
            Kolona:65 °C

            účinné od 1. 1. 2006Měření plochy píků je možno vylepšit elektronickou integrací.

        1. účinné od 1. 1. 20066.2.2 Jiné než aerosolové vzorky:
          1. účinné od 1. 1. 20066.2.2.1 Náplní kolony je Chromosorb 105 nebo Porapak QS; použije se plamenový ionizační detektor.
          2. účinné od 1. 1. 20066.2.2.2 Kolona musí dávat rozlišení R rovné nebo lepší než 1,5, kde:

            účinné od 1. 1. 2006

            účinné od 1. 1. 2006
            TABULKA 1 Hodnoty Rf a barvy získané bezprostředně po vyvolání Tabulka II Barvy skvrn standardů po chromatografii a vyvíjení parami jodu Obrázek 6
            r1 a r2= retenční časy dvou píků v min.
            w1 a w2 = šířky píků v polovině výšky píků v mm,
            d'= rychlost posuvu záznamu v mm/min.
          1. účinné od 1. 1. 20066.2.2.3 Tohoto rozlišení je možno dosáhnout za následujících podmínek:
            účinné od 1. 1. 2006
            TABULKA 1 Hodnoty Rf a barvy získané bezprostředně po vyvolání Tabulka II Barvy skvrn standardů po chromatografii a vyvíjení parami jodu Obrázek 6
            Materiál kolony:nerezová ocel
            Délka:2 metry
            Průměr:3 mm
            Citlivost elektrometru:8×10-10 A
            Plyny:
            Nosný plyn:dusík
            Tlak:2,1 bar
            Průtok:40 ml/min
            Pomocný plyn:vodík
            Tlak:1,5 bar
            Průtok:20 ml/min
            Teplotní režim:
            Nástřik:150 °C
            Detektor:230 °C
            Kolona:120 až 130 °C
    1. účinné od 1. 1. 20067. KALIBRAČNÍ GRAF