Vyhláška Ministerstva zdravotnictví, kterou se mění vyhláška Ministerstva zdravotnictví č. 1/1998 Sb., kterou se stanoví požadavky na jakost, postup při přípravě, zkoušení, uchovávání a dávkování léčiv (Český lékopis 1997)

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. Připraví se roztok somatropinu CRL v tlumivém roztoku trometamolovém o pH 7,5 (0,05 mol/l) a zpracuje se současně stejným způsobem jako zkoušený roztok.

účinné od 1. 1. 2000Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).

účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

1. účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,25 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem oktylsilanizovaným pro chromatografii R(5 μm až 10 μm),
2. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze s průtokovou rychlostí 1 ml/min:
3. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze A - 1 ml kyseliny trifluoroctové R se zředí vodou R na 1000 ml,
4. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze B - ke 100 ml vody R se přidá 1 ml kyseliny trifluoroctové R a zředí se acetonitrilem pro chromatografii R na 1000 ml,
5. účinné od 1. 1. 2000- následujícího gradientu (je-li třeba, gradient nebo teplota kolony se nastaví tak, aby se dosáhlo požadovaného rozdělení produktů enzymatického štěpení):
   účinné od 1. 1. 2000

   Čas (min)	Mobilní fáze A % (V/V)	Mobilní fáze B % (V/V)
   0 - 20	100 → 80	0 → 20
   20 - 40	80 → 75	20 → 25
   40 - 65	75 → 50	25 → 50
   65 - 70	50 → 20	50 → 80
   70- 71	20 → 100	80 → 0
   71 - 85	100	0

1. účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 214 nm.

účinné od 1. 1. 2000Teplota kolony se udržuje na 30 °C.

účinné od 1. 1. 2000Kolona se nejméně 15 min ustaluje mobilní fází A. Provede se slepá zkouška za použití výše uvedeného gradientu.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 100 μl zkoušeného roztoku a 100 jal porovnávacího roztoku. Zkoušku lze hodnotit, jestliže chromatogramy obou roztoků kvalitativně odpovídají referenčnímu chromatogramu Ph. Eur. enzymaticky štěpeného somatropinu. Chromatografický profil zkoušeného roztoku odpovídá chromatogramu porovnávacího roztoku.

1. účinné od 1. 1. 2000D. Hodnotí se chromatogramy ze zkoušky Stanovení obsahu. Retenční čas hlavního píku na chromatogramu zkoušeného roztoku odpovídá retenčnímu času hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Příbuzné bílkoviny. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. Připraví se roztok zkoušeného výrobku v tlumivém roztoku trometamolovém o pH 7,5 (0,05 mol/l) tak, aby v mililitru obsahoval 2,0 mg somatropinu nebo méně, potom se podle toho upraví objem injekce.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. Připraví se roztok somatropinu CRL v tlumivém roztoku trometamolovém o pH 7,5 (0,05 mol/l) tak, aby v mililitru obsahoval 2,0 mg somatropinu.

účinné od 1. 1. 2000Roztok pro rozlišení (validační směs somatropinu a desamidosomatropinu). Připraví se roztok somatropinu CRL v tlumivém roztoku trometamolovém o pH 7,5 (0,05 mol/l) tak, aby v mililitru obsahoval 2,0 mg. Zfiltruje se přes sterilní filtr nebo se přidá azid sodný R do koncentrace 0,1 mg v mililitru roztoku a nechá se 24 h stát při pokojové teplotě.

účinné od 1. 1. 2000Roztoky se uchovávají při teplotě 2 °C až 8 °C a použijí se do 24 h Pokud se používá automatický dávkovač, je nutno jej udržovat při 2 °C až 8 °C.

účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

1. účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,25 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem butylsilanizovaným pro chromatografii R (velikost částic 5 μm a velikost pórů 30 nm), která je umístěna mezi pumpu a nástřikový ventil,
2. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze, která je směsí objemových dílů propanolu R a tlumivého roztoku trometamolového o pH 7,5 (0,05 mol/l) (29 + 71); průtoková rychlost je 0,5 ml/min,
3. účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 220 nm.

účinné od 1. 1. 2000Teplota kolony se udržuje na 45 °C.

účinné od 1. 1. 2000Před použitím se kolona promývá 200 ml až 500 ml 0,1 % (V/V) roztokem kyseliny trifluoroctové R v 50% (V/V) acetonitrilu R. Je-li třeba, promývání se opakuje do ustálení kolony.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl porovnávacího roztoku. Je-li třeba, upraví se koncentrace propanolu R v mobilní fázi tak, aby retenční čas hlavního píku byl asi 33 min.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl roztoku pro rozlišení. Na chromatogramu se objeví malý pík (desamidosomatropin) s relativním retenčním časem k hlavnímu píku asi 0,85. Zkoušku lze hodnotit, jestliže rozlišení mezi píky somatropinu a desamidosomatropinu je nejméně 1,0 a hodnota faktoru symetrie píku somatropinu je 0,9 až 1,8.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl zkoušeného roztoku. Na chromatogramu zkoušeného roztoku součet ploch všech píků, kromě hlavního píku, není větší než 6,0 % celkové plochy píků. Nepřihlíží se k pikům rozpouštědel.

účinné od 1. 1. 2000Dimer a příbuzné látky s vyšší molekulovou hmotností. Provede se vylučovací chromatografie (2.2.30), jak je popsána ve zkoušce Stanovení obsahu.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl zkoušeného roztoku. Na chromatogramu zkoušeného roztoku součet ploch píků s retenčním časem kratším, než je retenční čas hlavního píku, není větší než 4,0 % celkové plochy píků. Nepřihlíží se k pikům rozpouštědel.

účinné od 1. 1. 2000Distribuce izoforem. Provede se izoelektrická fokusace.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). Zkoušený roztok se zředí tlumivým roztokem fosforečnanovým o pH 7,0 (0,025 mol/l) tak, aby v mililitru obsahoval 2,0 mg somatropinu.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (b). K 0,1 ml zkoušeného roztoku (a) se přidá 1,9 ml tlumivého roztoku fosforečnanového o pH 7,0 (0,025 mol/l).

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). Připraví se roztok somatropinu CRL v tlumivém roztoku fosforečnanovém o pH 7,0 (0,025 mol/l) tak, aby v mililitru obsahoval 2,0 mg somatropinu.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). Použije se roztok pro kalibraci izoelektrického bodu o rozmezí pH 2,5 až 6,5, připravený podle návodu výrobce.

účinné od 1. 1. 2000Se zařízením se pracuje podle návodu výrobce. Izoelektrická fokusace se provádí na hotových deskách s vrstvou gelu o rozměrech 245 mm x 110 mm x 1 mm a pH v rozmezí 4,0 až 6,5. Na vrstvu gelu se nanese odděleně po 15 μl každého roztoku. Jako anodický roztok se použije roztok kyseliny glutamové R (14,7 g/l) v roztoku kyseliny fosforečné R (50 g H₃PO₄/I) a jako katodický roztok se použije roztok fialaninu R (89,1 g/l). Pracovní podmínky se nastaví na 2000 V a 25 mA. Fokusace se nechá probíhat 2,5 h při konstantním napětí a výkonu nepřevyšujícím 25 W. Potom se vrstva gelu ponoří na 30 min do roztoku obsahujícího kyselinu trichloroctovou R (115 g/l) a kyselinu sulfosalicylovou R (34,5 g/l) a pak na 5 min do směsi objemových dílů kyseliny octové R, ethanolu R a deionizované vody R (8 + 25 + 67) (odbarvovací roztok). Vrstva gelu se zbarví ponořením na 10 min do 60 °C teplého roztoku modři kyselé 83 R (1,15 g/l) v odbarvovacím roztoku a potom se ponoří do odbarvovacího roztoku do odstranění nadbytku barviva.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušku lze hodnotit, jestliže rozdělení zón na elektroforeogramu porovnávacího roztoku (b) odpovídá pokynům výrobce. Na elektroforeogramu porovnávacího roztoku (a) je viditelná hlavní zóna s izoelektrickým bodem při asi 5 a kyselejší menší zóna při asi 4,8. Na elektroforeogramu zkoušeného roztoku (a) žádná zóna, kromě hlavní zóny, nepřevyšuje svou intenzitou hlavní zónu na elektroforeogramu zkoušeného roztoku (b) (5 %).

účinné od 1. 1. 2000Sterilita (2.6.1). Pokud je látka určena k výrobě parenterálních přípravků bez dalšího vhodného sterilizačního postupu, vyhovuje zkoušce na sterilitu.

účinné od 1. 1. 2000Bakteriální endotoxiny (2.6.14). Pokud je látka určena k výrobě parenterálních přípravků bez dalšího vhodného postupu odstraňujícího bakteriální endotoxiny, vyhovuje zkoušce na bakteriální endotoxiny, obsahuje-li v miligramu nejvýše 5 m.j. endotoxinu.

účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu

účinné od 1. 1. 2000Provede se vylučovací chromatografie (2.2.30).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. Připraví se roztok zkoušeného roztoku v tlumivém roztoku fosforečnanovém o pH 7,0 (0,025 mol/l) tak, aby v mililitru obsahoval 1,0 mg somatropinu.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. Obsah lahvičky somatropinu CRL se zředí tlumivým roztokem fosforečnanovým o pH 7,0 (0,025 mol/l) na koncentraci 1,0 mg/ml.

účinné od 1. 1. 2000Roztok pro rozlišení. Lahvička somatropinu CRL se nechá v sušárně při 50 °C po dobu (obvykle 12 h až 24 h) dostačující k vytvoření 1 % až 5 % dimeru. Obsah lahvičky se zředí tlumivým roztokem fosforečnanovým o pH 7,0 (0,025 mol/l) na koncentraci 1,0 mg/ml.

účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

1. účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,30 m a vnitřního průměru 7,8 mm naplněné silikagelem hydrofilním pro chromatografii R jakosti vhodné pro dělení globulárních bílkovin v rozmezí molekulové hmotnosti 5000 až 150 000,
2. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze, kterou je zfiltrovaná a odplyněná směs objemových dílů 2-propanolu R a tlumivého roztoku fosforečnanového o pH 7,0 (0,063 mol/l) (3 + 97); průtoková rychlost je 0,6 ml/min,
3. účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 214 nm.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl roztoku pro rozlišení. Na získaném chromatogramu je retenční čas hlavního píku asi 12 min až 17 min a relativní retenční časy dimeru somatropinu a proteinů s vyšší molekulovou hmotností jsou 0,90 a 0,65, vztaženo k hlavnímu píku. Rozlišení dané poměrem výšky minima nad základní linií mezi píky monomeru a dimeru k výšce píku dimeru je nejvýše 0,4.

účinné od 1. 1. 2000Nastřikuje se 20 μl zkoušeného roztoku a 20 μl porovnávacího roztoku.

účinné od 1. 1. 2000Obsah somatropinu se vypočítá z ploch píků na chromatogramu zkoušeného roztoku a na chromatogramu porovnávacího roztoku a z deklarovaného obsahu látky C₉₉₀H₁₅₂₈N₂₆₂O₃₀₀S₇ v somatropinu CRL.

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000Ve vzduchotěsných obalech, při teplotě –20 °C. Je třeba vyhnout se opakovanému zmrazení a rozmražení roztoku. Je-li roztok sterilní, uchovává se ve sterilních vzduchotěsných zabezpečených obalech.

účinné od 1. 1. 2000Separandum.

účinné od 1. 1. 2000Označování

účinné od 1. 1. 2000V označení na obalu se uvede:

1. účinné od 1. 1. 2000- obsah somatropinu v miligramech v mililitru roztoku,
2. účinné od 1. 1. 2000- název a množství jakýchkoliv pomocných látek,
3. účinné od 1. 1. 2000- zda je roztok sterilní,
4. účinné od 1. 1. 2000- zda je roztok prostý bakteriálních endotoxinů.

účinné od 1. 1. 2000† Somatropinum

účinné od 1. 1. 2000Somatropin

účinné od 1. 1. 2000Je to bílkovina se strukturou (191 aminokyselinových zbytků) hlavní složky růstového hormonu produkovaného lidskou hypofýzou. Počítáno na bezvodou látku, obsahuje 91,0% až 105,0% somatropinu (C₉₉₀H₁₅₂₈N₂₆₂O₃₀₀S₇). Vyhovuje požadavkům článku Producta ab ADN recombinante.

účinné od 1. 1. 20001 mg bezvodého somatropinu (C₉₉₀H₁₅₂₈N₂₆₂O₃₀₀S₇) odpovídá 3,0 m.j. biologické účinnosti.

účinné od 1. 1. 2000Výroba

účinné od 1. 1. 2000Připravuje se metodou založenou na rekombinaci DNK (rDNK). Při vývoji přípravku se vhodnou validovanou metodou stanovení biologické účinnosti založenou na stimulaci růstu a schválenou oprávněnou autoritou prokáže, že výrobní postup dává látku, jejíž biologická účinnost je nejméně 2,5 m.j. v miligramu.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušená látka vyhovuje následujícím dodatečným požadavkům.

účinné od 1. 1. 2000Bílkoviny hostitelské buňky. Požadavek schválí oprávněná autorita.

účinné od 1. 1. 2000DNK hostitelské buňky a vektoru. Požadavek schválí oprávněná autorita.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Bílý nebo téměř bílý prášek.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

1. účinné od 1. 1. 2000A. Hodnotí se elektroforeogramy ze zkoušky Distribuce izoforem, viz Zkoušky na čistotu. Na elektroforeogramu zkoušeného roztoku (a) odpovídá hlavní zóna polohou hlavní zóně na elektroforeogramu porovnávacího roztoku (a).
2. účinné od 1. 1. 2000B. Hodnotí se chromatogramy ze zkoušky Příbuzné bílkoviny, viz Zkoušky na čistotu. Retenční čas hlavního píku na chromatogramu zkoušeného roztoku odpovídá retenčnímu času hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku.
3. účinné od 1. 1. 2000C. Provede se peptidové mapování.

   účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. Připraví se roztok zkoušené látky v tlumivém roztoku trometamolovém o pH7,5 (0,05 mol/l) tak, aby obsahoval 2,0 mg somatropinu v mililitru. Asi 1,0 ml takto připraveného roztoku se přenese do zkumavky z vhodného materiálu, např. polypropylenu. Připraví se čerstvý roztok trypsinu pro peptidové mapování R (1 mg/ml) v tlumivém roztoku trometamolovém o pH 7,5 (0,05 mol/l) a 30 μl tohoto roztoku se přidá k roztoku zkoušené látky. Zkumavka se uzavře a vloží se na 4 h do vodní lázně 37 °C teplé. Potom se zkumavka vyjme z vodní lázně a ihned se probíhající reakce přeruší, např. zmrazením. Je-li okamžitě použit automatický dávkovač, udržuje se teplota na 2 °C až 8 °C.

   účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. Současně se za stejných podmínek připraví porovnávací roztok s tím rozdílem, že se zkoušená látka nahradí somatropinem CRL.

   účinné od 1. 1. 2000Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).

   účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

   1. účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,25 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem oktylsilanizovaným pro chromatografii R (5 μm až 10 μm),
   2. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze s průtokovou rychlostí 1 ml/min:
   3. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze A - 1 ml kyseliny trifluoroctové R se zředí vodou R na 1000 ml,
   4. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze B - ke 100 ml vody R se přidá 1 ml kyseliny trifluoroctové R a zředí se acetonitrilem pro chromatografii R na 1000 ml,
   5. účinné od 1. 1. 2000- následujícího gradientu (je-li třeba, gradient nebo teplota kolony se nastaví tak, aby se dosáhlo požadovaného rozdělení produktů enzymatického štěpení):
      účinné od 1. 1. 2000

      Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Označování † Somatropinum Výroba Vlastnosti Zkoušky totožnosti

      Čas (min)	Mobilní fáze A % (V/V)	Mobilní fáze B % (V/V)
      0 - 20	100 → 80	0 → 20
      20 - 40	80 → 75	20 → 25
      40 - 65	75 → 50	25 → 50
      65 - 70	50→ 20	50 → 80
      70 - 71	20 → 100	80 → 0
      71 - 85	100	0

   1. účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 214 nm.

   účinné od 1. 1. 2000Teplota kolony se udržuje na 30 °C.

   účinné od 1. 1. 2000Kolona se nejméně 15 min ustaluje mobilní fází A. Provede se slepá zkouška za použití výše uvedeného gradientu.

   účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 100 μl zkoušeného roztoku a 100 μl porovnávacího roztoku. Zkoušku lze hodnotit, jestliže chromatogramy obou roztoků kvalitativně odpovídají referenčnímu chromatogramu Ph. Eur. enzymaticky štěpeného somatropinu. Chromatografický profil zkoušeného roztoku odpovídá chromatogramu porovnávacího roztoku.

1. účinné od 1. 1. 2000D. Hodnotí se chromatogramy ze zkoušky Stanovení obsahu. Retenční čas hlavního píku na chromatogramu zkoušeného roztoku odpovídá retenčnímu času hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Příbuzné bílkoviny. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. Připraví se roztok zkoušené látky v tlumivém roztoku trometamolovém o pH 7,5 (0,05 mol/l) tak, aby v mililitru obsahoval 2,0 mg somatropinu.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. Připraví se roztok somatropinu CRL v tlumivém roztoku trometamolovém o pH 7,5 (0,05 mol/l) tak, aby v mililitru obsahoval 2,0 mg somatropinu.

účinné od 1. 1. 2000Roztok pro rozlišení (validační směs somatropinu a desamidosomatropinu). Připraví se roztok somatropinu CRL v tlumivém roztoku trometamolovém o pH 7,5 (0,05 mol/l) tak, aby v mililitru obsahoval 2,0 mg. Zfiltruje se přes sterilní filtr nebo se přidá azid sodný R do koncentrace 0,1 mg v mililitru roztoku a nechá se 24 h stát při pokojové teplotě.

účinné od 1. 1. 2000Roztoky se uchovávají při teplotě 2 °C až 8 °C a použijí se do 24 h. Pokud se používá automatický dávkovač, je nutno jej udržovat při 2 °C až 8 °C.

účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

1. účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,25 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem butylsilanizovaným pro chromatografii R (velikost částic 5 pm a velikost pórů 30 nm), která se umístí mezi pumpu a nástřikový ventil,
2. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze, která je směsí objemových dílů propanolu R a tlumivého roztoku trometamolového o pH 7,5 (0,05 mol/l) (29 + 71); průtoková rychlost je 0,5 ml/min,
3. účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 220 nm.

účinné od 1. 1. 2000Teplota kolony se udržuje na 45 °C.

účinné od 1. 1. 2000Před použitím se kolona promývá 200 ml až 500 ml 0,1% (V/V) roztoku kyseliny trifluoroctové R v 50% (V/V) roztoku acetonitrilu R. Je-li třeba, promývání se opakuje do ustálení kolony.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 jíl porovnávacího roztoku. Je-li třeba, upraví se koncentrace propanolu R v mobilní fázi tak, aby retenční čas hlavního píku byl asi 33 min.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl roztoku pro rozlišení. Na chromatogramu se objeví malý pík (desamidosomatropin) s relativním retenčním časem k hlavnímu píku asi 0,85. Zkoušku lze hodnotit, jestliže rozlišení mezi píky somatropinu a desamidosomatropinu je nejméně 1,0 a hodnota faktoru symetrie píku somatropinu je 0,9 až 1,8.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl zkoušeného roztoku. Na chromatogramu zkoušeného roztoku součet ploch všech píků, kromě hlavního píku, není větší než 6,0 % celkové plochy píků. Nepřihlíží se k pikům rozpouštědel.

účinné od 1. 1. 2000Dimer a příbuzné látky s vyšší molekulovou hmotností. Provede se vylučovací chromatografie (2.2.30), jak je popsána ve zkoušce Stanovení obsahu.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl zkoušeného roztoku. Na chromatogramu zkoušeného roztoku součet ploch píků s retenčním časem kratším, než je retenční čas hlavního píku, není větší než 4,0 % celkové plochy píků. Nepřihlíží se k pikům rozpouštědel.

účinné od 1. 1. 2000Distribuce izoforem. Provede se izoelektrická fokusace.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). Připraví se roztok zkoušené látky v tlumivém roztoku fosforečnanovém o pH 7,0 (0,025 mol/l) tak, aby v mililitru obsahoval 2,0 mg somatropinu.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (b). K 0,1 ml zkoušeného roztoku (a) se přidá 1,9 ml tlumivého roztoku fosforečnanového o pH 7,0 (0,025 mol/l).

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). Připraví se roztok somatropinu CRL v tlumivém roztoku fosforečnanovém o pH 7,0 (0,025 mol/l) tak, aby v mililitru obsahoval 2,0 mg somatropinu.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). Použije se roztok pro kalibraci izoelektrického bodu o rozmezí pH 2,5 až 6,5, připravený podle návodu výrobce.

účinné od 1. 1. 2000Se zařízením se pracuje podle návodu výrobce. Izoelektrická fokusace se provádí na hotových deskách s vrstvou gelu o rozměrech 245 mm x 110 mm x 1 mm a pH v rozmezí 4,0 až 6,5. Na vrstvu gelu se nanese odděleně po 15 μl každého roztoku. Jako anodický roztok se použije roztok kyseliny glutamové R (14,7 g/l) v roztoku kyseliny fosforečné R (50 g H₃PO₄/I) a jako katodický roztok se použije roztok fialaninu R (89,1 g/l). Pracovní podmínky se nastaví na 2000 V a 25 mA. Fokusace se nechá probíhat 2,5 h při konstantním napětí a příkonu nepřevyšujícím 25 W. Potom se vrstva gelu ponoří na 30 min do roztoku obsahujícího kyselinu trichloroctovou R (115 g/l) a kyselinu sulfosalicylovou R (34,5 g/l) a pak na 5 min do směsi objemových dílů kyseliny octové R, ethanolu R a deionizované vody R (8 + 25 + 67) (odbarvovací roztok). Vrstva gelu se zbarví ponořením na 10 min do 60 °C teplého roztoku modři kyselé 83 R (1,15 g/l) v odbarvovacím roztoku a potom se ponoří do odbarvovacího roztoku do odstranění nadbytku barviva.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušku lze hodnotit, jestliže rozdělení zón na elektroforeogramu porovnávacího roztoku (b) odpovídá pokynům výrobce. Na elektroforeogramu porovnávacího roztoku (a) je viditelná hlavní zóna s izoelektrickým bodem asi 5 a kyselejší menší zóna při asi 4,8. Na elektroforeogramu zkoušeného roztoku (a) žádná zóna, kromě hlavní zóny, nepřevyšuje svou intenzitou hlavní zónu na elektroforeogramu zkoušeného roztoku (b) (5 %).

účinné od 1. 1. 2000Voda, mikrostanovení (2.5.32). Nejvýše 10,0 %.

účinné od 1. 1. 2000Sterilita (2.6.1). Pokud je látka určena k výrobě parenterálních přípravků bez dalšího vhodného sterilizačního postupu, vyhovuje zkoušce na sterilitu.

účinné od 1. 1. 2000Bakteriální endotoxiny (2.6.14). Pokud je látka určena k výrobě parenterálních přípravků bez dalšího vhodného postupu odstraňujícího bakteriální endotoxiny, vyhovuje zkoušce na bakteriální endotoxiny, obsahuje-li v miligramu nejvýše 5 m.j. endotoxinu.

účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu

účinné od 1. 1. 2000Provede se vylučovací chromatografie (2.2.30).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. Připraví se roztok zkoušené látky v tlumivém roztoku fosforečnanovém o pH 7,0 (0,025 mol/l) tak, aby v mililitru obsahoval 1,0 mg somatropinu.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok Obsah lahvičky somatropinu CRL se rozpustí v tlumivém roztoku fosforečnanovém o pH 7,0 (0,025 mol/l) a zředí se stejným rozpouštědlem na koncentraci 1,0 mg/ml.

účinné od 1. 1. 2000Roztok pro rozlišení. Lahvička somatropinu CRL se nechá v sušárně při 50 °C po dobu (obvykle 12 h až 24 h) dostačující k vytvoření 1 % až 5 % dimeru. Obsah lahvičky se rozpustí v tlumivém roztoku fosforečnanovém o pH 7,0 (0,025 mol/l) a zředí se stejným rozpouštědlem na koncentraci 1,0 mg/ml.

účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

1. účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,30 m a vnitřního průměru 7,8 mm naplněné silikagelem hydrofilním pro chromatografii R jakosti vhodné pro dělení globulárních bílkovin v rozmezí molekulové hmotnosti 5000 až 150 000,
2. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze, kterou je zfiltrovaná a odplyněná směs objemových dílů 2-propanolu R a tlumivé- ho roztoku fosforečnanového o pH 7,0 (0,063 mol/l) (3 + 97); průtoková rychlost je 0,6 ml/min,
3. účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 214 nm.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl roztoku pro rozlišení. Na získaném chromatogramu je retenční čas hlavního píku asi 12 min až 17 min a relativní retenční časy dimeru somatropinu a proteinů s vyšší molekulovou hmotností jsou 0,90 a 0,65, vztaženo k hlavnímu píku. Rozlišení dané poměrem výšky minima nad základní linií mezi píky monomeru a dimeru k výšce píku dimeru je nejvýše 0,4.

účinné od 1. 1. 2000Nastřikuje se 20 μl zkoušeného roztoku a 20 μl porovnávacího roztoku.

účinné od 1. 1. 2000Obsah somatropinu se vypočítá z ploch píku na chromatogramu zkoušeného roztoku a na chromatogramu porovnávacího roztoku a z deklarovaného obsahu látky C₉₉₀H₁₅₂₈N₂₆₂O₃₀₀S₇ v somatropinu CRL.

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000Ve vzduchotěsných obalech při teplotě 2 °C až 8 °C. Je-li látka sterilní, uchovává se ve sterilních vzduchotěsných zabezpečených obalech.

účinné od 1. 1. 2000Separandum.

účinné od 1. 1. 2000Označování

účinné od 1. 1. 2000V označení na obalu se uvede, zda je látka:

1. účinné od 1. 1. 2000- sterilní,
2. účinné od 1. 1. 2000- prostá bakteriálních endotoxinů.

účinné od 1. 1. 2000† Stannosi chloridum dihydricum

účinné od 1. 1. 2000Dihydrát chloridu cínatého

účinné od 1. 1. 2000Obsahuje 98,0 % až 101,0 % sloučeniny SnCl₂ . 2H₂O.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Bílý krystalický prášek nebo bezbarvé krystaly, zvětrávající na vzduchu. Je snadno rozpustný ve vodě (roztoky se stáním nebo ředěním kalí) a v lihu 96%. Rozpouští se ve zředěné kyselině chlorovodíkové.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

1. účinné od 1. 1. 2000A. K 1 ml roztoku S1, viz Zkoušky na čistotu, se přidá směs obsahující 5 ml vody R a 0,05 ml chloridu rtuťnatého RS; vznikne černošedá sraženina.
2. účinné od 1. 1. 2000B. 1,0 g se rozpustí ve 3,0 ml vody R a k mírně zakalenému roztoku se přidá 0,5 ml hydroxidu sodného zředěného RS; vznikne nažloutlá vločkovitá sraženina. Přidá se 6,5 ml vody R. K 1,0 ml předem protřepané suspenze se přidá 1,0 ml hydroxidu sodného koncentrovaného RS; sraženina se rozpustí a vzniklý roztok je čirý a bezbarvý.
3. účinné od 1. 1. 2000C. 10 mg se rozpustí ve 2 ml kyseliny dusičné zředěné RS. Roztok vyhovuje zkoušce (a) na chloridy (2.3.1).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Roztok S1. K 0,40 g se přidá 1 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS a zředí se vodou destilovanou R na 20 ml.

účinné od 1. 1. 2000Roztok S2. 1,0 g se rozpustí v kyselině chlorovodíkové zředěné RS, zředí se jí na 30 ml a zahřeje se k varu. Přidá se 30 ml thioacetamidu RS a 15 min se vaří (roztok A). 5 ml tohoto roztoku se zfiltruje a filtrát se zahřeje k varu. Přidá se 5 ml thioacetamidu RS a 15 min se vaří. Pokud se tvoří sraženina, přidá se ke směsi zbytek roztoku A (roztok A'). Přidá se 10 ml thioacetamidu RS a vaří se. Opakuje se série operací počínaje “5 ml tohoto roztoku...“, dokud již delší dobu po přidání 5 ml thioacetamidu RS k filtrátu získanému z 5 ml roztoku A (resp. roztoku A’, roztoku A“...) nevzniká sraženina. Jestliže sraženina nevznikla nebo již nevzniká, spojí se získaný roztok se zbytkem roztoku A (resp. roztoku A', roztoku A“...), zfiltruje se a sraženina se promyje 10 ml vody R. Filtrát se zahřívá tak dlouho, dokud unikající páry nepřestanou barvit navlhčený kousek papíru s octanem olovnatým R černošedě. Nechá se vychladnout a zředí se vodou R na 50 ml.

účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. 10,0 g se rozpustí v kyselině chlorovodíkové zředěné RS a zředí se jí na 20 ml. Roztok je čirý (2.2.1) a bezbarvý (2.2.2, Metoda II).

účinné od 1. 1. 2000Látky nesrážející se thioacetamidem. 25 ml roztoku S2 se odpaří do sucha avyžíhá se při 600 °C. Zbytek váží nejvýše 1 mg (0,2 %).

účinné od 1. 1. 2000Sírany (2.4.13). 15 ml roztoku S1 vyhovuje limitní zkoušce na sírany (500 μg/g).

účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy. 1,0 g se rozpustí ve 2 ml směsi objemových dílů kyseliny dusičné R a kyseliny chlorovodíkové R (1+3). Roztok se zahřívá na vodní lázni, dokud se nepřestanou vyvíjet páry oxidů dusíku. Zbytek se rozpustí ve vodě R a zředí se jí na 25 ml. K 5 ml tohoto roztoku se přidají 3 ml hydroxidu sodného koncentrovaného RS a 2 ml vody R. Zahřívá se do získání čirého roztoku, ochladí se a přidá se 0,5 ml zkoumadla thioacetamidového R. Zbarvení roztoku není po 2 min intenzivnější než zbarvení směsi obsahující 1,0 ml základního roztoku olova (10 jug Pb/ml), 6 ml vody R, 3 ml hydroxidu sodného koncentrovaného RS a 0,5 ml zkoumadla thioacetamidového R (50 μg/g).

účinné od 1. 1. 2000Železo (2.4.9). 5 ml roztoku S2 se zředí vodou R na 10 ml; roztok vyhovuje limitní zkoušce na železo (100 μg/g).

účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu

účinné od 1. 1. 20000,100 g se rozpustí v 1,5 ml kyseliny chlorovodíkové RS a zředí se vodou R na 50 ml. Přidá se 5 g vínanu draselno-sodného R, 10 g hydrogenuhličitanu sodného R a 1 ml škrobu RS a ihned se titruje jodem 0,05 mol/l VS. Provede se slepá zkouška.

účinné od 1. 1. 20001 ml jodu 0,05 mol/l VS odpovídá 11,28 mg SnCl₂ . 2H₂O.

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000Ve vzduchotěsných obalech.

účinné od 1. 1. 2000Separandum.

účinné od 1. 1. 2000Stearinum

účinné od 1. 1. 2000Stearin

účinné od 1. 1. 2000Synonymum. Acidum stearicum

účinné od 1. 1. 2000CAS 57-11-4

účinné od 1. 1. 2000Je to směs obsahující hlavně kyselinu stearovou (C₁₈H₃₆O₂, M_r 284,48) a palmitovou (C₁₆H₃₂O₂,M_r 256,43).

účinné od 1. 1. 2000Výroba

účinné od 1. 1. 2000Je-li stearin vyráběn z tkání savců nebo z jiných materiálů získaných z teplokrevných živočichů, musí tato zvířata splňovat požadavky oprávněné autority na zdravá zvířata určená pro humánní konzumaci. Kromě toho tkáně nemají obsahovat žádné riziko definované odpovídajícími mezinárodními předpisy, nebo kde je to vhodné, národními předpisy.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Bílé voskovité vločky, bílá tvrdá hmota, na omak mastná, lomu zrnitě krystalického, nebo bílý nebo nažloutle bílý prášek. Je prakticky nerozpustný ve vodě, dobře rozpustný v lihu 96% a etheru petrolejovém (50 °C až 70 °C).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: D.

účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, B a C, viz Obecné zásady (1.2).

1. účinné od 1. 1. 2000A. Teplota tání (2.2.14). 53 °C až 62 °C.
2. účinné od 1. 1. 2000B. Číslo kyselosti (2.5.1). 198 až 210; stanoví se s 0,50 g zkoušené látky.
3. účinné od 1. 1. 2000C. Směs ze zkoušky Tuk a parafiny, viz Zkoušky na čistotu, po ochlazení ztuhne v bílou hmotu.
4. účinné od 1. 1. 2000D. Zkouška Podíl mastných kyselin, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. 1,0 g se rozpustí v chloroformu R a zředí se jím na 20 ml. Roztok je čirý (2.2.1) a není intenzivněji zbarven než porovnávací barevný roztok Ž₅ (2.2.2, Metoda II).

účinné od 1. 1. 2000Teplota tuhnutí (2.2.18). Nejméně 53 °C.

účinné od 1. 1. 2000Číslo jodové (2.5.4). Nejvýše 3.

účinné od 1. 1. 2000Tuk a parafiny. K 1,0 g se přidá 30 ml roztoku obsahujícího 0,5 g uhličitanu sodného bezvodého R a zahřeje se k varu. Ještě horká směs neopalizuje intenzivněji než porovnávací suspenze II (2.2.1). Tato směs se použije ke zkoušce totožnosti C.

účinné od 1. 1. 2000Kyseliny rozpustné ve vodě. 0,5 g se 2 min třepe s 10 ml horké vody prosté oxidu uhličitého R a po ochlazení se zfiltruje. Filtrát se po přidání 0,1 ml fenolftaleinu RS a 0,05 ml hydroxidu sodného 0,1 mol/l VS zbarví červeně.

účinné od 1. 1. 2000Podíl mastných kyselin. Provede se plynová chromatografie (2.2.28).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 0,100 g se zahřívá pod zpětným chladičem s 5,0 ml roztoku fluoridu boritého R (140 g/l) v methanolu R 15 min nebo do úplného rozpuštění. Po ochlazení se směs převede do dělicí nálevky pomocí 10 ml hexanu R. Roztok se protřepe s10 ml vody R a 10 ml chloridu sodného nasyceného RS. Po oddělení fází se spodní fáze odstraní. Horní fáze se vysuší síranem sodným bezvodým R a zfiltruje se. Filtrát se použije jako zkoušený roztok.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. 25,0 mg methylpalmitatu R a 25,0 mg methylstearatu R se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 10,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

1. účinné od 1. 1. 2000- křemenné kolony délky 2 m a vnitřního průměru 4 mm naplněné křemelinou pro plynovou chromatografii R (např. Chromosorb W, 80/100 mesh) impregnovanou 10 % vhodného dimethylsilikonu pro plynovou chromatografii (např. SE-30®),
2. účinné od 1. 1. 2000- dusíku pro chromatografii R s průtokovou rychlostí 50 ml/min,
3. účinné od 1. 1. 2000- plamenoionizačního detektoru.

účinné od 1. 1. 2000Teplota kolony se udržuje na 215 °C, teplota vstřikovacího prostoru a detektoru na 260 °C. Nastříkne se odděleně po 1 μl až 2 μl porovnávacího roztoku a zkoušeného roztoku.

účinné od 1. 1. 2000Na chromatogramu zkoušeného roztoku se identifikují píky methylpalmitatu a methylstearatu pomocí chromatogramu porovnávacího roztoku (methylstearat má delší retenční čas než methylpalmitat).

účinné od 1. 1. 2000Součet ploch všech píků, kromě píku rozpouštědla, na chromatogramu zkoušeného roztoku je 100%. Podíl methylstearatu je nejméně 40,0% a celkové množství methylstearatu a methylpalmitatu je nejméně 90,0 %.

účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,0 g zkoušené látky.

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřeném obalu.

účinné od 1. 1. 2000Stearomacrogolum

účinné od 1. 1. 2000Stearomakrogol

účinné od 1. 1. 2000Synonymum. Macrogoli aetherum stearylicum

účinné od 1. 1. 2000CAS 9005-00-9

účinné od 1. 1. 2000Je to směs etherů získaná ethoxylací oktadekanolu (stearylalkoholu). Může obsahovat nějaké volné makrogoly a různá množství volného stearylalkoholu. Množství ethylenoxidu zreagovaného se stearylalkoholem je dvě ku dvaceti jednotkám na molekulu (nominální hodnota).

účinné od 1. 1. 2000Výroba

účinné od 1. 1. 2000Je-li stearomakrogol získáván z tkání savců nebo jiných materiálů teplokrevných zvířat, musí tato zvířata splňovat požadavky oprávněné autority, které se kladou na zvířata určená pro humánní konzumaci. Navíc tyto tkáně nesmí obsahovat specifický rizikový materiál, který je definován odpovídajícími mezinárodními, nebo kde je to vhodné, národními požadavky.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Bílá až žlutobílá voskovitá mastná hmota, tablety, mikrokuličky nebo vločky.

účinné od 1. 1. 2000Stearomakrogol se dvěma jednotkami ethylenoxidu na molekulu je prakticky nerozpustný ve vodě, rozpustný v lihu 96% po zahřátí a v dichlormethanu. Stearomakrogol s deseti jednotkami ethylenoxidu na molekulu je dobře rozpustný ve vodě a v lihu 96%. Stearomakrogol s dvaceti jednotkami ethylenoxidu na molekulu je dobře rozpustný ve vodě, v lihu 96% a v dichlormethanu.

účinné od 1. 1. 2000Po roztavení tuhne při asi 45 °C.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

1. účinné od 1. 1. 2000A. Zkouška Číslo hydroxylové, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
2. účinné od 1. 1. 2000B. Zkouška Číslo jodové, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
3. účinné od 1. 1. 2000C. Zkouška Číslo zmýdelnění, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
4. účinné od 1. 1. 2000D. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití desky s vrstvou silikagelu R.

   účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 10,0 g se rozpustí ve směsi objemových dílů vody R danethanoluR (1 + 9) a zředí se stejnou směsí na 75 ml. Přidá se 60 ml heptanu R a protřepává se 3 min. Tvorba pěny může být snížena přídavkem několika kapek lihu 96% R. Horní vrstva se filtruje přes síran sodný bezvodý R, filtr se promyje třikrát 10 ml heptanu R a spojené filtráty se odpaří do sucha. 50 mg vysušených heptanových extraktů se rozpustí v 10 ml methanoluR (roztok může opalizovat).

   účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. 25 mg stearylalkoholu CRL se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 25 ml.

   účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese odděleně po 20 μl obou roztoků a vyvíjí se ethylacetatem R po dráze 15 cm. Vrstva se usuší a postříká vanilinem v kyselině sírové (0,5 g vanilinu R se rozpustí v 50 ml lihu 96% R a zředí se kyselinou sírovou R na 100 ml). Vrstva se usuší na vzduchu, zahřívá se 15 min při asi 130 °C a ochladí se na vzduchu. Na chromatogramu zkoušeného roztoku je několik skvrn; jedna z nich odpovídá hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku.

1. účinné od 1. 1. 2000E. 0,1 g se rozpustí nebo disperguje v 5 ml lihu 96% R, přidají se 2 ml vody R, 10 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS, 10 ml chloridu barnatého RS1 a 10 ml roztoku kyseliny fosfomolybdenové R (100 g/l); vzniká sraženina.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. 5,0 g se rozpustí v lihu 96% R a zředí se jím na 50 ml. Roztok není zbarven intenzivněji než porovnávací barevný roztok HŽ₅ (2.2.2, Metoda II).

účinné od 1. 1. 2000Zásaditě reagující látky. 2,0 g se rozpustí v horké směsi 10 ml lihu 96% R a 10 ml vody R. Přidá se 0,1 ml modři bromthymolové RS1. Ke změně zbarvení indikátoru do žlutá se spotřebuje nejvýše 0,5 ml kyseliny chlorovodíkové 0,1 mol/l VS.

účinné od 1. 1. 2000Číslo kyselosti (2.5.1). Nejvýše 1,0; stanoví se s 5,0 g zkoušené látky.

účinné od 1. 1. 2000Hydroxylové číslo (2.5.3, Metoda A). Viz níže uvedená tabulka.

účinné od 1. 1. 2000Číslo jodové (2.5.4). Nejvýše 2,0.

účinné od 1. 1. 2000Číslo zmýdelnění (2.5.6). Nejvýše 3,0; stanoví se s 10,0 g zkoušené látky.

účinné od 1. 1. 2000Zbytkový ethylenoxid a dioxan (2.4.25). Nejvýše 1 μg/g zbytkového ethylenoxidu a nejvýše 10 μg/g zbytkového dioxanu. Při stanovení obsahu dioxanu se použije při výpočtu korekční faktor 1/5.

účinné od 1. 1. 2000Voda, semimikrostanovení (2.5.12). Nejvýše 3,0 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000Ve vzduchotěsných obalech.

účinné od 1. 1. 2000Označování

účinné od 1. 1. 2000V označení na obalu se uvede počet ethylenoxidových jednotek zreagováných se stearylalkoholem (nominální hodnota).

účinné od 1. 1. 2000§§ Sufentanili dihydrogenocitras

účinné od 1. 1. 2000Sufentaniliumdihydrogencitrat

účinné od 1. 1. 2000Synonymum. Sufentanili citras

účinné od 1. 1. 2000

účinné od 1. 1. 2000Je to 4-[(N-fenyl)propanamido]-4-methoxymethyl-1-[2-(2-thienyl)ethyl]piperidinium-dihydrogencitrat. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 99,0 % až 101,0 % sloučeniny C₂₈H₃₈N2O₉S.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Bílý nebo téměř bílý prášek. Je dobře rozpustný ve vodě a v lihu 96%, snadno rozpustný v methanolu.

účinné od 1. 1. 2000Taje při asi 140 °C, za rozkladu.

účinné od 1. 1. 2000Zkouška totožnosti

účinné od 1. 1. 2000Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky se shoduje s referenčním spektrem Ph. Eur. sufentaniliumdihydrogencitratu.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. 0,2 g se rozpustí ve vodě R a zředí se jí na 20 ml. Roztok je čirý (2.2.1) a bezbarvý (2.2.2, Metoda II).

účinné od 1. 1. 2000Příbuzné látky. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 0,100 g se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 10,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). Pro přípravu in šitu degradační sloučeniny (sufentanil nečistota E) se rozpustí 10 mg v 10,0 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS a 4 h se zahřívá na vodní lázni pod zpětným chladičem. Pak se zneutralizuje 10,0 ml hydroxidu sodného zředěného RS a odpaří se do sucha na vodní lázni. Po ochlazení se zbytek rozpustí v 10 ml methanolu R a zfiltruje se. Porovnávací roztok (b). 5,0 ml zkoušeného roztoku se zředí methanolem R na 100,0 ml. 1,0 ml tohoto roztoku se zředí methanolem R na 10,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

1. účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,1 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem oktadecylsilanizovaným pro chromatografii R (3 μm),
2. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze s průtokovou rychlostí 1,5 ml/min:
3. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze A - roztok uhličitanu amonného R (5 g/l) ve směsi objemových dílů tetrahydrofuranu R a vody R (10 + 90),
4. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze B - acetonitril R,
5. účinné od 1. 1. 2000- gradientového programu za použití následujících podmínek:
   účinné od 1. 1. 2000

   Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Označování † Somatropinum Výroba Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Označování † Stannosi chloridum dihydricum Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Stearinum Výroba Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Uchovávání Stearomacrogolum Výroba Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Uchovávání Označování §§ Sufentanili dihydrogenocitras Vlastnosti Zkouška totožnosti Zkoušky na čistotu

   Čas (min)	Mobilní fáze A % (V/V)	Mobilní fáze B % (V/V)	Poznámky
   0 - 15	90 → 40	10 → 60	lineární gradient izokraticky
   15 - 20	40	60	přepnutí na původní
   			podmínky
   20 - 25	90	10	začátek nového
   25 = 0	90	10	gradientu

1. účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 220 nm.

účinné od 1. 1. 2000Kolona se promývá do ustavení rovnováhy nejméně 30 min acetonitrilem R a pak nejméně 5 min mobilní fází o počátečním složení. Citlivost systému se nastaví tak, aby výška hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) při nástřiku 10 μl byla nejméně 50 % celé stupnice zapisovače.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 10 μl porovnávacího roztoku (a). Při zaznamenání chromatogramu za předepsaných podmínek jsou retenční časy: sufentanilu nečistoty E asi 12 min asufentanilu asi 13 min. Zkoušku lze hodnotit, jestliže rozlišení mezi píky sufentanilu a sufentanilu nečistoty E je nejméně 4,0. Pokud je to nutné, upraví se koncentrace acetonitrilu v mobilní fázi nebo program lineárního gradientu.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se odděleně 10 μl methanolu R jako slepá zkouška, 10 μl zkoušeného roztoku a 10 μl porovnávacího roztoku (b). Na chromatogramu zkoušeného roztoku: plocha žádného píku, kromě hlavního píku, není větší než plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,5 %); součet ploch všech píků, kromě hlavního píku, není větší než dvojnásobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (1,0%). Nepřihlíží se k žádnému píku získanému ve slepé zkoušce, k žádnému píku, jehož relativní retenční čas vztažený k hlavnímu píku je 0,05 nebo méně, a k žádnému píku s plochou menší než 0,lnásobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b).

účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 0,5 %; 1,000 g se suší ve vakuové sušárně při 60 °C.

účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu

účinné od 1. 1. 20000,400 g se rozpustí v 50 ml směsi objemových dílů kyseliny octové ledové R a 2-butano- nu R (1 + 7). Titruje se kyselinou chloristou 0,1 mol/l VS za použití 0,2 ml naftolbenzeinu RS jako indikátoru.

účinné od 1. 1. 20001 ml kyseliny chloristé 0,1 mol/l VS odpovídá 57,87 mg C₂₈H₃₈N₂O₉S.

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.

účinné od 1. 1. 2000Omamná látka.

účinné od 1. 1. 2000Nečistoty

účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000A. N-fenyl-N-(4-methoxymethyl-4-piperidyl)propanamid,
   účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000B. cis-4-[(N-fenyl) propionylamino]-4-methosymethyl-1-[2-(2-thieny)ethyl]piperidin-1-oxid,
   účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000C. {4-fenylamino-1-[2-(2-thienyl)ethyl]-4-piperidyl} methanol,
   účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000D. N-fenyl-{4-methoxymethyl-1-[2-(2-thienyl)ethyl]-4-piperidyl]}acetamid,
   účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000E. N-fenyl-{4-methoxymethyl-1-[2-(2-thienyl)ethyl]-4-piperidyl}amin,
   účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000F. N-fenyl-N-{4-methoxymethyl-1-[2-(3-thienyl)ethyl-4-piperidyl]}propionamid,

účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000G. 4-{[(N-fenyl)propionylamino]-1 -[2-(2-thienyl)ethyl]-4-piperidyl}methylpropionat,
   účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000H. N-fenyl-N-{4-methoxymethyl-1-[2-(2-thienyl)ethyl]-4-piperidyl}butyramid,
   účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000I. trans-4-[(N-fenyl)propylamino]-4-methoxymethyl-1-[2-(2-thienyl)ethyl]piperidin-1-oxid.

účinné od 1. 1. 2000Talcum

účinné od 1. 1. 2000Mastek

účinné od 1. 1. 2000Je to práškovaný vybraný přírodní hydratovaný křemičitan hořečnatý. Může obsahovat proměnlivá množství doprovodných minerálů, mezi kterými převažují chlority (hydrátované křemičitany hlinito-hořečnaté), magnézií (uhličitan hořečnatý), kalcit (uhličitan vápenatý) a dolomit (uhličitan vápenato-hořečnatý).

účinné od 1. 1. 2000Výroba

účinné od 1. 1. 2000Mastek získaný z ložisek známých obsahem azbestu není vhodný pro farmaceutické použití. Provede se zkouška na amfiboly a na serpentiny; výrobce je zodpovědný za prohlášení, že výrobek neobsahuje azbest. Přítomnost amfibolů a serpentinů se určí rentgenovou difrakcí nebo infračervenou spektrofotometru (viz A a B). Pokud jsou tyto látky detegovány, sledují se specifická morfologická kritéria azbestu vhodnou metodou optické mikroskopie, aby se zjistilo, zda se jedná o tremolitový azbest nebo chryzolit, jak je níže popsáno.

1. účinné od 1. 1. 2000A. Provede se absorpční spektrofotometrie v infračervené oblasti (2.2.24) v rozmezí 740 cm^-1 až 760 cm_-¹ za použití rozšířené stupnice; absorpční pás při (758 ±1) cm^-1 může ukazovat přítomnost tremolitu nebo chloritu. Pokud se absorpční pás objeví i po vyžíhání při 850 °C (nejméně 30 min), je přítomen tremolit. V rozmezí 600 cm^-1 až 650 cm^-1 za použití rozšířené stupnice může absorpční pás nebo prodleva ukazovat přítomnost serpentinů. Měří se tablety zkoušené látky připravené za použití bromidu draselného R.
2. účinné od 1. 1. 2000B. Provede se rentgenová difrakce za následujících podmínek:
   1. účinné od 1. 1. 2000- Cu Ka monochromatické 40 kV záření, 24 mA až 30 mA,
   2. účinné od 1. 1. 2000- vstupní štěrbina 1°,
   3. účinné od 1. 1. 2000- výstupní štěrbina 0,2°,
   4. účinné od 1. 1. 2000- rychlost goniometru: l/lO°20/min,
   5. účinné od 1. 1. 2000- snímací rozmezí: 10° až 13° 20 a 24° až 26° 20,
   6. účinné od 1. 1. 2000- vzorek není orientován.

   účinné od 1. 1. 2000Vzorek se umístí do držáku; přikryje se vyleštěným mikroskopickým sklíčkem a zaznamenají se difraktogramy.

   účinné od 1. 1. 2000Přítomnost amfibolů je dokázána difrakčním píkem při (10,5 ± 0,1)° 20 a přítomnost serpentinů je dokázána difrakčními píky při (24,3 ± 0,1)° 20 až (12,1 ± 0,1)° 20.

   účinné od 1. 1. 2000Pokud byla jednou z těchto metod prokázána přítomnost amfibolů a/nebo serpentinů, zkouší se dále vhodnou metodou optické mikroskopie charakter azbestu.

   účinné od 1. 1. 2000Přítomnost azbestu se prokáže za použití optické mikroskopie, pokud jsou splněna následující kritéria:

   1. účinné od 1. 1. 2000- poměr délky a šířky se pohybuje v rozmezí 20 : 1 až 100 : 1 nebo je vyšší u vláken delších než 5 μm,
   2. účinné od 1. 1. 2000- schopnost štěpení do velmi tenkých vláken, a pokud jsou splněna dvě nebo více z následujících čtyř kritérií:
   3. účinné od 1. 1. 2000- rovnoběžná vlákna se vyskytují ve svazcích,
   4. účinné od 1. 1. 2000- svazky vláken mají roztřepené konce,
   5. účinné od 1. 1. 2000- vlákna jsou ve formě tenkých jehliček,
   6. účinné od 1. 1. 2000- propletená jednotlivá vlákna a/nebo vlákna vykazují zakřivení.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Lehký homogenní bílý nebo téměř bílý prášek, mastný na dotek (neabrazivní). Je prakticky nerozpustný ve vodě, v lihu 96% a ve zředěných roztocích kyselin a alkalických hydroxidů.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: A.

účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: B a C, viz Obecné zásady (1.2).

1. účinné od 1. 1. 2000A. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) tablety zkoušené látky vykazuje absorpční pásy při (3677 ± 2) cm^-1, při (1018 ± 2) cm^-1 a při (669 ± 2) cm^-1. Tablety se připraví za použití bromidu draselného R.
2. účinné od 1. 1. 2000B. Směs obsahující 0,2 g uhličitanu sodného bezvodého R a 2,0 g uhličitanu draselného R se taví v platinovém kelímku. K roztavené hmotě se přidá 0,1 g zkoušené látky a zahřívá se do úplného roztavení směsi. Po ochlazení se roztavená hmota přenese s 50 ml horké vody R do odpařovací misky a přidává se kyselina chlorovodíková R, dokud směs nepřestane šumět. Pak se přidá 10 ml kyseliny chlorovodíkové R a odpaří se do sucha na vodní lázni. Po ochlazení se přidá 20 ml vody R, zahřeje se k varu a zfiltruje se (zbytek se použije ve zkoušce totožnosti C). K 5 ml filtrátu se přidá 1 ml amoniaku 17,5% RS a 1 ml chloridu amonného RS a zfiltruje se. K filtrátu se přidá 1 ml hydrogenfosforečnanu sodného RS; vznikne bílá krystalická sraženina.
3. účinné od 1. 1. 2000C. Zbytek získaný ve zkoušce totožnosti B vyhovuje zkoušce na křemičitany (2.3.1).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Roztok S1. 10,0 g se naváží do kuželové baňky opatřené zpětným chladičem, postupně se přidává 50 ml kyseliny chlorovodíkové 0,5 mol/l RS za stálého míchání a zahřívání na vodní lázni po dobu 30 min. Po ochlazení se směs přenese do kádinky a nerozpuštěná látka se nechá sedimentovat. Supernatantní tekutina se zfiltruje přes středně rychlý filtrační papír do 100ml odměrné baňky tak, aby co nejvíce nerozpuštěné látky zůstalo v kádince. Zbytek a kádinka se třikrát promyjí 10 ml horké vody R, pak se promyje filtr 15 ml horké vody R, filtrát se ochladí a zředí se stejným rozpouštědlem na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Roztok S2. 0,5 g se naváží do 100ml polytetrafluorethylenové misky, přidá se 5 ml kyseliny chlorovodíkové R, 5 ml kyseliny dusičné prosté olova R, 5 ml kyseliny chloristé R, opatrně se zamíchá, pak se přidá 35 ml kyseliny fluorovodíkové R a pomalu se odpařuje do sucha na horké desce. Ke zbytku se přidá 5 ml kyseliny chlorovodíkové R, přikryje se hodinovým sklíčkem, zahřeje se k varu a nechá se ochladit. Hodinové sklíčko i miska se vypláchnou vodou R do odměrné baňky obsahující 5 ml roztoku chloridu česného R (25,34 g/l), miska se znovu vypláchne vodou R a obsah baňky se zředí stejným rozpouštědlem na 50,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Hodnota pH (2.2.3). 7,0 až 9,0; měří se filtrát získaný ve zkoušce Látky rozpustné ve vodě. Hodnota se odečte 1 min po vložení elektrody.

účinné od 1. 1. 2000Látky rozpustné ve vodě. K 10,0 g se přidá 50 ml vody prosté oxidu uhličitého R, zahřeje se k varu a 30 min se vaří pod zpětným chladičem. Po ochlazení se zfiltruje přes středně rychlý filtrační papír a zředí se vodou prostou oxidu uhličitého R na 50,0 ml. 25,0 ml tohoto filtrátu se odpaří do sucha a 1 h se zahřívá při 105 °C. Zbytek váží nejvýše 10 mg (0,2 %).

účinné od 1. 1. 2000Hliník. Nejvýše 2,0 %; stanoví se atomovou absorpční spektrometrií (2.2.23, Metoda I).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. K 5,0 ml roztoku S2 se přidá 10 ml roztoku chloridu česného R (25,34 g/l), 10,0 ml kyseliny chlorovodíkové R a zředí se vodou R na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztoky. Do čtyř stejných odměrných baněk obsahujících po 10,0 ml kyseliny chlorovodíkové R a po 10 ml roztoku chloridu česného R (25,34 g/l), se převede 5,0 ml, 10,0 ml, 15,0 ml a 20,0 ml základního roztoku hliníku (100 μg Al/ml) a všechny roztoky se zředí vodou R na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Změří se absorbance při 309,3 nm za použití hliníkové lampy s dutou katodou jako zdroje záření a plamene oxid dusný-acetylen.

účinné od 1. 1. 2000Vápník. Nejvýše 0,9 %; stanoví se atomovou absorpční spektrometrií (2.2.23, Metoda I).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. K 5,0 ml roztoku S2 se přidá 10,0 ml kyseliny chlorovodíkové R, 10 ml chloridu lanthanitého RS a zředí se vodou R na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztoky. Do čtyř stejných odměrných baněk obsahujících po 10,0 ml kyseliny chlorovodíkové R a po 10 ml chloridu lanthanitého RS se převede 1,0 ml, 2,0 ml, 3,0 ml a 4,0 ml základního roztoku vápníku (100 μg Ca/ml)(l) a všechny roztoky se zředí vodou R na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Změří se absorbance při 422,7 nm za použití vápníkové lampy s dutou katodou jako zdroje záření a plamene oxid dusný-acetylen.

účinné od 1. 1. 2000Železo. Nejvýše 0,25 %; stanoví se atomovou absorpční spektrometrií (2.2.23, Metoda I).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. K 2,5 ml roztoku S1 se přidá 50,0 ml kyseliny chlorovodíkové 0,5 mol/l RS a zředí se vodou R na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztoky. Do čtyř stejných odměrných baněk obsahujících po 50,0 ml kyseliny chlorovodíkové 0,5 mol/l RS se převedou 2,0 ml, 2,5 ml, 3,0 ml a 4,0 ml základního roztoku železa (250 μg Fe/ml) a všechny roztoky se zředí vodou R na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Změří se absorbance při 248,3 nm za použití železné lampy s dutou katodou jako zdroje záření a plamene vzduch-acetylen. Provede se korekce za použití deuteriové lampy.

účinné od 1. 1. 2000Hořčík. 17,0 % až 19,5 %; stanoví se atomovou absorpční spektrometrií (2.2.23, Metoda I).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 0,5 ml roztoku S2 se zředí vodou R na 100,0 ml. K 4,0 ml tohoto roztoku se přidá 10,0 ml kyseliny chlorovodíkové R, 10 ml chloridu lanthanitého RS a zředí se vodou R na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztoky. Do čtyř stejných odměrných baněk obsahujících po 10,0 ml kyseliny chlorovodíkové R a po 10 ml chloridu lanthanitého RS se převedou 2,5 ml, 3,0 ml, 4,0 ml a 5,0 ml základního roztoku hořčíku (10 μg Mg/ml)(l) a všechny roztoky se zředí vodou R na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Změří se absorbance při 285,2 nm za použití hořčíkové lampy s dutou katodou jako zdroje záření a plamene vzduch-acetylen.

účinné od 1. 1. 2000Olovo. Nejvýše 10 μg/g; stanoví se atomovou absorpční spektrometrií (2.2.23, Metoda I).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. Roztok S1.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztoky. Do čtyř stejných odměrných baněk obsahujících po 50,0 ml kyseliny chlorovodíkové 0,5 mol/l RS se převede 5,0 ml, 7,5 ml, 10,0 ml a 12,5 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml)(l) a všechny roztoky se zředí vodou R na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Změří se absorbance při 217,0 nm za použití olověné lampy s dutou katodou jako zdroje záření a plamene vzduch-acetylen.

účinné od 1. 1. 2000Ztráta žíháním. Nejvýše 7,0 %; 1,000 g se žíhá při 1050 °C až 1100 °C do konstantní hmotnosti.

účinné od 1. 1. 2000Mikrobiální znečištění. Pokud je látka určena pro lokální podání, celkový počet živých mikroorganismů (2.6.12) je nejvýše 10² aerobních bakterií a hub v gramu.

účinné od 1. 1. 2000Pokud je látka určena pro perorální podání, celkový počet živých mikroorganismů (2.6.12) je nejvýše 10³ aerobních bakterií v gramu a nejvýše 10² hub v gramu.

účinné od 1. 1. 2000Označování

účinné od 1. 1. 2000V označení na obalu se uvede, zda je látka vhodná pro lokální nebo perorální podání.

účinné od 1. 1. 2000† Terbutalini sulfas

účinné od 1. 1. 2000Terbutaliniumsulfat

účinné od 1. 1. 2000

účinné od 1. 1. 2000Je to bis {N-terc.butyl-[(2RS)-2-(3,5-dihydroxyfenyl)-2-hydroxyethyl]amonium} sulfát. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 98,0 % až 101,0 % sloučeniny C₂₄H₄₀N₂O₁₀S.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Bílý nebo téměř bílý krystalický prášek. Je snadno rozpustný ve vodě, těžce rozpustný v lihu 96%.

účinné od 1. 1. 2000Vykazuje polymorfismus.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

1. účinné od 1. 1. 2000A. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky se shoduje se spektrem terbutaliniumsulfatu CRL. Pokud se spektra získaná v pevném stavu liší, rozpustí se odděleně zkoušená látka i referenční látka v methanolu prostém aldehydů R, odpaří se do sucha a se zbytky se zaznamenají nová spektra.
2. účinné od 1. 1. 2000B. 5 ml roztoku S, viz Zkoušky na čistotu, vyhovuje zkoušce (a) na sírany (2.3.1).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Roztok S. 1,0 g se rozpustí ve vodě prosté oxidu uhličitého R a zředí se jí na 50 ml.

účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. Roztok S je čirý (2.2.1). Absorbance roztoku S (2.2.25) měřená při 400 nm v 2cm kyvetě je nejvýše 0,11.

účinné od 1. 1. 2000Kysele reagující látky. K 10 ml roztoku S se přidá 0,05 ml červeně methylové RS. Ke změně indikátoru na žluté zbarvení se spotřebuje nejvýše 1,2 ml hydroxidu sodného 0,01 mol/l VS.

účinné od 1. 1. 2000Optická otáčivost (2.2.7). –0,10° až +0,10°. Měří se roztok S.

účinné od 1. 1. 2000Příbuzné látky. Stanoví se kapalinovou chromatografií (2.2.29).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 75,0 mg se rozpustí v mobilní fázi a zředí se jí na 50,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 7,5 mg terbutalinu nečistoty C CRL a 22,5 mg terbutaliniumsulfatu CRL se rozpustí v mobilní fázi a zředí se jí na 50,0 ml. 1 ml tohoto roztoku se zředí mobilní fází na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 1 ml zkoušeného roztoku se zředí mobilní fází na 50,0 ml. 2 ml tohoto roztoku se zředí mobilní fází na 20,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

1. účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,15 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem oktadecylsilanizovaným deaktivovaným pro chromatografii bazických látek R (5 μm),
2. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze, kterou je roztok 4,23 g hexansulfonanu sodného R v 770 ml roztoku mravenčanu amonného R (0,050 mol/l), který se připraví následovně: 3,15 g mravenčanu amonného R se rozpustí v 980 ml vody R, pH se upraví přidáním asi 8 ml kyseliny mravenčí bezvodé R na hodnotu 3,0 a zředí se vodou R na 1000 ml; potom se přidá 230 ml methanolu R; průtoková rychlost je 1,0 ml/min,
3. účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 276 nm.

účinné od 1. 1. 2000Citlivost systému se nastaví tak, aby výška hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) byla nejméně 50 % rozsahu celé stupnice zapisovače.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl porovnávacího roztoku (a). Při zaznamenání chromatogramu za předepsaných podmínek jsou retenční časy: terbutaliniumsulfatu nečistoty C asi 9 min a terbutaliniumsulfatu asi 11 min.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušku lze hodnotit, jestliže rozlišení mezi píkem terbutalinu nečistoty C a pikem terbutaliniumsulfatu je nejméně 2,0. Je-li třeba, upraví se složení mobilní fáze. Zvýšením koncentrace methanolu se zvýší retenční čas.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se odděleně 20 μl zkoušeného roztoku, 20 μl porovnávacího roztoku (a) a 20 μl porovnávacího roztoku (b). Chromatogram se zaznamenává po dobu odpovídající 2,5násobku retenčního času terbutaliniumsulfatu. Na chromatogramu zkoušeného roztoku není plocha žádného píku, odpovídajícího píku terbutalinu nečistotě C, větší než dvojnásobek plochy odpovídajícího píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a) (0,2 %); plocha žádného jiného píku, kromě hlavního píku, není větší než plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,2 %); součet ploch všech píků, kromě hlavního píku a píku odpovídajícího terbutalinu nečistotě C, není větší než dvojnásobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,4 %). Nepřihlíží se k píkům mobilní fáze a k píkům, jejichž plocha je menší než 0,lnásobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b).

účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 0,5 %; 1,000 g se suší 3 h v sušárně při 100 °C až 105 °C.

účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu

účinné od 1. 1. 20000,400 g se zahřátím rozpustí v 70 ml kyseliny octové bezvodé R a titruje se kyselinou chloristou 0,1 mol/l VS za potenciometrické indikace (2.2.20) bodu ekvivalence.

účinné od 1. 1. 20001 ml kyseliny chloristé 0,1 mol/l VS odpovídá 54,87 mg C₂₄H₄₀N₂O₁₀S.

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech.

účinné od 1. 1. 2000Separandum.

účinné od 1. 1. 2000Nečistoty

účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000A. kyselina 3,5-dihydroxybenzoová (kyselina α-resorcylová),
   účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000B. (4RS)-2-terc.butyl-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-4,6,8-triol,
   účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000C. (3,5-dihydroxyfenyl)-terc.butylaminomethylketon.

účinné od 1. 1. 2000† Terconazolum

účinné od 1. 1. 2000Terkonazol

účinné od 1. 1. 2000

účinné od 1. 1. 2000Je to 1-{4-{[(2RS,4SR)-2-(2,4-dichlorfenyl)-2-[(1H-1,2,4-triazol-1-yl)methyl]-1,3-dioxolan-4-yl]methoxy}fenyl}-4-isopropylpiperazin. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 99,0 % až 101,0 % sloučeniny C₂₆H₃₁CI₂N₅O₃.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Bílý nebo téměř bílý prášek. Je prakticky nerozpustný ve vodě, snadno rozpustný v dichlormethanu, dobře rozpustný v acetonu, mírně rozpustný v lihu 96%.

účinné od 1. 1. 2000Vykazuje polymorfismus.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: A.

účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: B a C, viz Obecné zásady (1.2).

1. účinné od 1. 1. 2000A. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky se shoduje se spektrem terkonazolu CRL. Pokud se spektra získaná v pevném stavu liší, rozpustí se odděleně zkoušená látka i referenční látka v minimálním množství acetonu R, odpaří se do sucha v proudu vzduchu a se zbytky se zaznamenají nová spektra.
2. účinné od 1. 1. 2000B. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití vrstvy vhodného oktadecylsilanizovaného silikagelu.

   účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 30 mg se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 5 ml.

   účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 30 mg terkonazolu CRL se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 5 ml.

   účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 30 mg terkonazolu CRL a 30 mg ketokonazolu CRL se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 5 ml.

   účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese odděleně po 5 μl každého roztoku. Vyvíjí se v nenasycené komoře mobilní fází, která je směsí objemových dílů octanu amonného RS, dioxanu R a methanolu R (20 + 40 + 40) po dráze 10 cm. Vrstva se suší 15 min v proudu horkého vzduchu a pak se vystaví působení jodových par do objevení skvrn. Pozoruje se v denním světle; hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku se shoduje polohou, barvou a velikostí s hlavní skvrnou na chromatogramu porovnávacího roztoku (a). Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) jsou dvě zřetelně oddělené skvrny.

1. účinné od 1. 1. 2000C. K 30,0 mg v porcelánovém kelímku se přidá 0,3 g uhličitanu sodného bezvodého R, 10 min se zahřívá nad otevřeným plamenem a nechá se zchladnout. Zbytek se rozpustí v 5 ml kyseliny dusičné zředěné RS a zfiltruje se. K 1 ml filtrátu se přidá 1 ml vody R; roztok vyhovuje zkoušce (a) na chloridy (2.3.1).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Optická otáčivost. –0,10° až +0,10°; měří se roztok připravený rozpuštěním 1,0 g v dichlormethanu R a zředěním stejným rozpouštědlem na 10 ml.

účinné od 1. 1. 2000Příbuzné látky. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 0,100 g se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 10,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 2,5 mg terkonazolu CRL a 2,0 mg ketokonazolu CRL se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 1,0 ml zkoušeného roztoku se zředí methanolem R na 100,0 ml. 5,0 ml tohoto roztoku se zředí methanolem R na 20,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

1. účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,1 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem oktadecylsilanizovaným deaktivovaným pro chromatografii bazických látek R (3 μm),
2. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze s průtokovou rychlostí 2,0 ml/min:
3. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze A - roztok tetrabutylamoniumhydrogensulfatu R (3,4 g/l),
4. účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze B - acetonitril R,
5. účinné od 1. 1. 2000- gradientového programu za použití následujících podmínek:
   účinné od 1. 1. 2000

   Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Označování † Somatropinum Výroba Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Označování † Stannosi chloridum dihydricum Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Stearinum Výroba Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Uchovávání Stearomacrogolum Výroba Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Uchovávání Označování §§ Sufentanili dihydrogenocitras Vlastnosti Zkouška totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Nečistoty Talcum Výroba Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Označování † Terbutalini sulfas Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Nečistoty † Terconazolum Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu

   Čas (min)	Mobilní fáze A % (V/V)	Mobilní fáze B % (V/V)	Poznámky
   0 - 10	95 → 50	5 → 50	lineární gradient
   10 - 15	50	50	izokraticky
   15 - 20	95	5	přepnutí na původní
   			podmínky
   20 = 0	95	5	začátek dalšího
   			gradientu

1. účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 220 nm.

účinné od 1. 1. 2000Kolona se promývá do ustavení rovnováhy nejméně 30 min acetonitrilem R při průtokové rychlosti 2 ml/min a pak nejméně 5 min mobilní fází o počátečním složení.

účinné od 1. 1. 2000Nastaví se citlivost systému tak, aby výška hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) při nástřiku 10 μl byla nejméně 50 % celé stupnice zapisovače.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 10 (0,1 porovnávacího roztoku (a). Při zaznamenání chromatogramu za předepsaných podmínek jsou retenční časy: ketokonazolu asi 6 min a terkonazolu asi 7,5 min. Zkoušku lze hodnotit, jestliže rozlišení mezi píky ketokonazolu a terkonazolu je nejméně 13,0. Je-li třeba, upraví se koncentrace acetonitrilu v mobilní fázi nebo program lineárního gradientu.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se odděleně 10 μl methanolu R jako slepá zkouška, 10 μl zkoušeného roztoku a 10 μl porovnávacího roztoku (b). Na chromatogramu zkoušeného roztoku plocha žádného píku, kromě hlavního píku, není větší než plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,25 %); součet ploch všech píků, kromě hlavního píku, není větší než dvojnásobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,5 %). Nepřihlíží se k žádnému píku získanému ve slepé zkoušce a k žádnému píku s plochou menší než 0,2násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b).

účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 0,5 %, 1,000 g se suší v sušárně při 100 °C až 105 °C.

účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.

účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu

účinné od 1. 1. 20000,150 g se rozpustí v 70 ml směsi objemových dílů kyseliny octové ledové R a 2-butanonu R (1 + 7). Titruje se kyselinou chloristou 0,1 mol/l VS za potenciometrické indikace bodu ekvivalence do druhého inflexního bodu (2.2.20).

účinné od 1. 1. 20001 ml kyseliny chloristé 0,1 mol/l VS odpovídá 17,75 mg C₂₆H₃₁Cl₂N₅O₃.

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.

účinné od 1. 1. 2000Separandum.

účinné od 1. 1. 2000Nečistoty

účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000A. 1-{4-{[(2RS,4RS)-2-(2,4-dichlorfenyl)-2-[(1H-1,2,4-triazol-1-yl)methyl]-1,3-dioxolan-4-yl [methoxy} fenyl}-4-isopropylpiperazin,
   účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000B. 1-{4-{[(2RS,4SR)-2-(2,4-dichlorfenyl)-2-[(4H-1,2,4-triazol-4-yl)methyl]-1,3-dioxolan-4-yl]methoxy} fenyl}-4-isopropylpiperazin.

účinné od 1. 1. 2000† Testosteronum

účinné od 1. 1. 2000Testosteron

účinné od 1. 1. 2000

účinné od 1. 1. 2000Je to 17β-hydroxy-4-androsten-3-on. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 97,0 % až 103,0 % sloučeniny C₁₉H₂₈O₂.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Bílý krystalický prášek nebo bezbarvé nebo nažloutle bílé krystaly. Je prakticky nerozpustný ve vodě, snadno rozpustný v lihu 96% a v dichlormethanu, prakticky nerozpustný v mastných olejích.

účinné od 1. 1. 2000Taje při asi 155 °C.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

1. účinné od 1. 1. 2000A. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky se shoduje se spektrem testosteronu CRL.
2. účinné od 1. 1. 2000B. Hodnotí se chromatogramy ze zkoušky Příbuzné látky, viz Zkoušky na čistotu. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (b) odpovídá polohou a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (b).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Specifická optická otáčivost (2.2.7). +106° až +114°, počítáno na vysušenou látku. Měří se roztok připravený rozpuštěním 0,250 g v ethanolu R a zředěním stejným rozpouštědlem na 25,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Příbuzné látky. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití desky s vrstvou silikagelu F₂₅₄ pro TLC R.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). 0,25 g se rozpustí v dichlormethanu R a zředí se jím na 10 ml.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (b). 1 ml zkoušeného roztoku (a) se zředí dichlormethanem R na 10 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 1 ml zkoušeného roztoku (a) se zředí dichlormethanem R na 100 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 12,5 mg testosteronu CRL se rozpustí v dichlormethanu R a zředí se jím na 5 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (c). 10 mg testosteronu nečistoty A CRL se rozpustí v dichlormethanu R a zředí se jím na 10 ml. 1 ml tohoto roztoku se zředí zkoušeným roztokem (a) na 5 ml.

účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se odděleně nanese po 5 μl každého roztoku a vyvíjí se směsí stejných objemových dílů ethylacetatu R a toluenu R po dráze 15 cm. Vrstva se usuší na vzduchu a pak se pozoruje v ultrafialovém světle při 254 nm. Na chromatogramu zkoušeného roztoku (a) žádná skvrna, kromě hlavní skvrny, není intenzivnější než hlavní skvrna na chromatogramu porovnávacího roztoku (a) (1,0 %). Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku (c) jsou dvě zřetelně oddělené skvrny.

účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.22). Nejvýše 1,0 %; 0,500 g se suší 2 h v sušárně při 100 °C až 105 °C.

účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu

účinné od 1. 1. 200050,0 mg se rozpustí v lihu 96% R a zředí se jím na 100,0 ml. 2,0 ml tohoto roztoku se zředí lihem 96% R na 100,0 ml. Měří se absorbance (2.2.25) v maximu při 241 nm.

účinné od 1. 1. 2000Vypočítá se obsah C₁₉H₂₈O₂ za použití specifické absorbance, která má hodnotu 569.

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000Chráněn před světlem.

účinné od 1. 1. 2000Separandum.

účinné od 1. 1. 2000Nečistoty

účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000A. 4-androsten-3,17-dion (androstendion),
   účinné od 1. 1. 2000

1. účinné od 1. 1. 2000B. 3-ethoxy-3,5-androstadien-17-on (enolether androstendionu).

účinné od 1. 1. 2000†† Thiomersalum

účinné od 1. 1. 2000Thiomersal

účinné od 1. 1. 2000

účinné od 1. 1. 2000Je to natrium-2-(ethylhydrargyriothio)benzoat. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 97,0 % až 101,0 % sloučeniny C₉H₉HgNaO₂S.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Bílý až slabě nažloutlý krystalický prášek. Je snadno rozpustný ve vodě, dobře rozpustný v lihu 96% a prakticky nerozpustný v etheru.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

1. účinné od 1. 1. 2000A. 0,5 g se rozpustí v 10 ml vody a přidá se 0,5 ml kyseliny sírové zředěné RS. Vyloučená bílá sraženina se odfiltruje, promyje se malým množstvím vody R a překrystalizuje se z lihu 96% R. Vzniklé krystaly se odfiltrují a usuší se nad oxidem fosforečným R za sníženého tlaku nepřevyšujícího 2,7 kPa; taje (2.2.14) při 107 °C až 115 °C (za rozkladu).
2. účinné od 1. 1. 2000B. Asi 0,1 g se rozpustí v 10 ml vody R a přidají se 2 ml dusičnanu stříbrného RS2; vzniká nažloutlá sraženina.
3. účinné od 1. 1. 2000C. 50 mg se rozpustí v 5 ml kyseliny sírové R. Zelenožlutý roztok se zahřeje na vodní lázni; do 2 min vznikne sytě červené zbarvení.
4. účinné od 1. 1. 2000D. 50 mg se spálí v kyslíku (2.5.10), při tom se plyny absorbují do směsi 50 ml vody R a 1 ml peroxidu vodíku koncentrovaného R. K získanému roztoku se přidá 5 ml kyseliny dusičné zředěné RS. 0,1 ml tohoto roztoku vyhovuje zkoušce (a) na rtuť (2.3.1). Ke zbytku roztoku se přidá 10 ml kyseliny chlorovodíkově zředěné RS a vzniklá sraženina se zfiltruje. 5 ml filtrátu vyhovuje zkoušce (a) na sírany (2.3.1) (bez přidání kyseliny chlorovodíkové zředěné RS).
5. účinné od 1. 1. 2000E. 20 mg se rozpustí v 0,5 ml vody R. Roztok vyhovuje zkoušce (b) na sodík (2.3.1).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Hodnota pH (2.2.3). 6,0 až 7,4. Měří se roztok připravený rozpuštěním 0,1 g ve vodě prosté oxidu uhličitého R a zředěním stejným rozpouštědlem na 10,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Cizí snadno zuhelnitelné organické látky. 20 mg se rozpustí ve 2 ml kyseliny sírové R. Roztok není zbarven intenzivněji než porovnávací barevný roztok ZŽ₁ (2.2.2, Metoda I).

účinné od 1. 1. 2000Anorganické sloučeniny rtuti. Nejvýše 0,70 %.

účinné od 1. 1. 2000Jodidové zkoumadlo. 33,2 g jodidu draselného R se rozpustí ve vodě R a zředí se jí na 100,0 ml. Roztok se uchovává nejvýše 1 den dobře uzavřen a chráněn před světlem.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). 0,500 g se rozpustí ve vodě R a zředí se jí na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (b). 10,0 ml zkoušeného roztoku (a) se zředí vodou R na 50,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (c). K 10,0 ml zkoušeného roztoku (a) se přidá 5 ml porovnávacího roztoku (a) a zředí se vodou R na 50,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 0,1900 g chloridu rtuťnatého R se zředí vodou R na 200,0 ml. 5,0 ml tohoto roztoku se zředí vodou R na 50,0 ml (asi 95 μg chloridu rtuťnatého v mililitru).

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 1,0 ml porovnávacího roztoku (a) se smíchá s 5 ml jodidového zkoumadla a zředí se vodou R na 10,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Během stanovení absorbance musí být všechny roztoky chráněny před světlem.

účinné od 1. 1. 2000Pět odměrných baněk o objemu 10 ml se označí A, B, C, D a E. Do baněk A a B se převede po 5,0 ml zkoušeného roztoku (b), do baněk C a D se převede po 5,0 ml zkoušeného roztoku (c) a do baňky E se převede 5,0 ml vody R. Baňky A a C se doplní vodou R a baňky B, D a E jodidovým zkoumadlem po značku.

účinné od 1. 1. 2000Měří se absorpční maximum porovnávacího roztoku (b) (2.2.25) při vlnové délce asi 323 nm proti vodě R. Nakonec se změří absorbance roztoků ve zkumavkách A, B, C, D a E proti vodě R při stejné vlnové délce (A_A, A_B, A_C, A_D a A_E).

účinné od 1. 1. 2000Obsah anorganických sloučenin rtuti v procentech se vypočítá podle vztahu:

účinné od 1. 1. 2000v němž značí:

účinné od 1. 1. 2000Látky rozpustné v etheru. 0,5 g se protřepává 10 min s 20 ml etheru R. Směs se zfiltruje a filtr s nerozpuštěnou látkou se promyje 5 ml etheru R a spojené filtráty se odpaří v předem vysušené a zvážené odpařovací misce do sucha. Zbytek se usuší nad oxidem fosforečným R za sníženého tlaku nepřevyšujícího 2,7 kPa; váží nejvýše 3 mg.

účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 0,5 %; 1,000 g se suší v sušárně 2 h při 105 °C.

účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu

účinné od 1. 1. 2000Asi 0,500 g se ve spalovací Kjeldahlově baňce s vloženou nálevkou zahřívá s 5 ml kyseliny sírové R až do počínajícího uhelnatění. Pak se v zahřívání pokračuje a zároveň se opatrně přidává po kapkách peroxid vodíku koncentrovaný R do vzniku čirého roztoku. Po přidání 10 ml vody R se roztok zahřívá do vzniku bílého dýmu. Potom se přidá 10 ml vody R, nechá se ochladit a po přidání 2 ml síranu amonno-železitého RS2 se titruje thiokyanatanem amonným 0,1 mol/l VS do červenohnědého zbarvení.

účinné od 1. 1. 20001 ml thiokyanatanu amonného 0,1 mol/l VS odpovídá 20,24 mg C₉H₉HgNaO₂S.

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.

účinné od 1. 1. 2000Venenum.

účinné od 1. 1. 2000Threoninum ¹)

účinné od 1. 1. 2000Threonin

účinné od 1. 1. 2000

účinné od 1. 1. 2000Je to kyselina (2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanová. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 99,0 % až 101,0 % sloučeniny C₄H₉NO₃.

účinné od 1. 1. 2000Výroba

účinné od 1. 1. 2000Je-li vyráběn fermentací, vyhovuje požadavkům článku Producta fermentationis.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Bílý krystalický prášek nebo bezbarvé krystaly. Je dobře rozpustný ve vodě, prakticky nerozpustný v lihu 96% a v etheru.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: A a B.

účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, C a D, viz Obecné zásady (1.2).

1. účinné od 1. 1. 2000A. Zkouška Specifická optická otáčivost, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
2. účinné od 1. 1. 2000B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) tablety zkoušené látky se shoduje se spektrem tablety threoninu CRL.
3. účinné od 1. 1. 2000C. Hodnotí se chromatogramy získané ve zkoušce Látky reagující s ninhydrinem, viz Zkoušky na čistotu. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (b) odpovídá polohou, zbarvením a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a).
4. účinné od 1. 1. 2000D. 1 ml roztoku zkoušené látky (2 g/l) se smíchá s 1 ml roztoku jodistanu sodného R (20 g/l). Přidá se 0,2 ml piperidinu R a 0,1 ml roztoku nitroprussidu sodného R (25 g/l); vznikne modré zbarvení, které se po několika minutách mění na žluté.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Roztok S. 2,5 g se rozpustí ve vodě prosté oxidu uhličitého R a zředí se jí na 100 ml.

účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. Roztok S je čirý (2.2.1) a. bezbarvý (2.2.2, Metoda II).

účinné od 1. 1. 2000Hodnota pH (2.2.3). 5,0 až 6,5; měří se roztok S.

účinné od 1. 1. 2000Specifická optická otáčivost (2.2.7). –27,6° až –29,0°, počítáno na vysušenou látku; měří se roztok připravený rozpuštěním 1,50 g ve vodě R a zředěním stejným rozpouštědlem na 25,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Látky reagující s ninhydrinem. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití desky s vrstvou silikagelu pro TLC R.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). 0,10 g se rozpustí v kyselině chlorovodíkové zředěné RS a zředí se jí na 10 ml.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (b). 1 ml zkoušeného roztoku (a) se zředí vodou R na 50 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 10 mg threoninu CRL se rozpustí v roztoku kyseliny chlorovodíkové R 1% (V/V) a zředí se jím na 50 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 5 ml zkoušeného roztoku (b) se zředí vodou R na 20 ml.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (c). 10 mg threoninu CRL a 10 mg prolinu CRL se rozpustí v roztoku kyseliny chlorovodíkové R 1% (V/V) a zředí se jím na 25 ml.

účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se odděleně nanese po 5 μl každého roztoku, usuší se na vzduchu a vyvíjí se směsí objemových dílů kyseliny octové ledové R, vody R a 1-butanolu R (20 + 20 + 60) po dráze 15 cm. Vrstva se usuší na vzduchu, postříká se ninhydrinem RS a zahřívá se 15 min při 100 °C až 105 °C. Žádná skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (a), kromě hlavní skvrny, není intenzivnější než skvrna na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,5 %). Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku (c) jsou dvě zřetelně oddělené skvrny.

účinné od 1. 1. 2000Chloridy (2.4.4). 10 ml roztoku S se zředí vodou R na 15 ml. Tento roztok vyhovuje limitní zkoušce na chloridy (200 μg/g).

účinné od 1. 1. 2000Sírany (2.4.13). 0,5 g se rozpustí ve vodě destilované R a zředí se jí na 15 ml. Tento roztok vyhovuje limitní zkoušce na sírany (300 μg/g).

účinné od 1. 1. 2000Amonium (2.4.1). 0,10 g vyhovuje limitní zkoušce B na amonium (200 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 0,2 ml základního roztoku amonia (100 μg NH/ml).

účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 2,0 g vyhovují limitní zkoušce C na těžké kovy (10 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 2 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml).

účinné od 1. 1. 2000Železo (2.4.9). 1,0 g se rozpustí v dělicí nálevce v 10 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS a vytřepává se třikrát po 3 min vždy s 10 ml isobutylmethylketonu R1. Ke spojeným organickým vrstvám se přidá 10 ml vody R a třepe se 3 min. Vodná vrstva vyhovuje limitní zkoušce na železo (10 μg/g).

účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 0,5 %; suší se 1,000 g v sušárně při 100 °C až 105 °C.

účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.

účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu

účinné od 1. 1. 20000,100 g se rozpustí v 5 ml kyseliny mravenčí bezvodé R, přidá se 30 ml kyseliny octové bezvodé R a titruje se kyselinou chloristou 0,1 mol/l VS za potenciometrické indikace bodu ekvivalence (2.2.20).

účinné od 1. 1. 20001 ml kyseliny chloristé 0,1 mol/l VS odpovídá 11,91 mg C₄H₉NO₃.

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.

účinné od 1. 1. 2000Thymi etheroleum

účinné od 1. 1. 2000Tymiánová silice

účinné od 1. 1. 2000Synonyma. Oleum thymi, Thymi aetheroleum

účinné od 1. 1. 2000CAS 8007-46-3

účinné od 1. 1. 2000Je to silice získaná z čerstvé kvetoucí natě druhu Thymus vulgaris L., Thymus zygis LOEFL. ex L. nebo směsi obou druhů destilací s vodní párou.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Čirá žlutá nebo velmi tmavá červenohnědá těkavá kapalina, charakteristického aromatického kořeněného pachu, připomínajícího thymol, mísitelná s ethanolem, etherem a etherem petrolejovým.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: B.

účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, viz Obecné zásady (1.2).

1. účinné od 1. 1. 2000A. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití vhodné vrstvy silikagelu.

   účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 0,2 g zkoušené látky se rozpustí v pentanu R a zředí se jím na 10 ml.

   účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. 0,15 g thymolu R, 25 μl terpinen-4-olu R a 40 μl linalolu R se rozpustí v pentanu R a zředí se jím na 10 ml.

   účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese odděleně do pruhů po 20 μl každého roztoku. Vyvíjí se směsí objemových dílů ethylacetatu R a toluenu R (5 + 95) po dráze 15 cm. Vrstva se usuší na vzduchu, postříká se anisaldehydem RS a suší se 5 min až 10 min při 100 °C až 105 °C. Pozoruje se v denním světle. Tři skvrny na chromatogramu zkoušeného roztoku odpovídají polohou a zbarvením skvrnám na chromatogramu porovnávacího roztoku: fialová skvrna odpovídá terpinen-4-olu, další fialová skvrna odpovídá linalolu a hnědorůžová skvrna odpovídá thymolu. Bezprostředně pod těmito skvrnami je bleděfialová skvrna odpovídající karvakrolu. Velká fialová skvrna v čele chromatogramu odpovídá uhlovodíkům.

1. účinné od 1. 1. 2000B. Hodnotí se chromatogramy ve zkoušce Chromatografický profil, viz Zkoušky na čistotu. Retenční časy hlavních píků na chromatogramu zkoušeného roztoku odpovídají retenčním časům hlavních píků na chromatogramu porovnávacího roztoku.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Relativní hustota (2.2.5). 0,915 až 0,935.

účinné od 1. 1. 2000Index lomu (2.2.6). 1,490 až 1,505.

účinné od 1. 1. 2000Chromatografický profil. Provede se plynová chromatografie (2.2.28).

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. Zkoušená látka.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok 0,15 g β-myrcenu R, 0,1 g γ-terpinenu R, 0,1 g p-cymenu R, 0,1 g linalolu R, 0,2 g terpinen-4-olu R, 0,2 g thymolu R a 0,05 g karvakrolu R se rozpustí v 5 ml hexanu R.

účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:

1. účinné od 1. 1. 2000- křemenné kapilární kolony délky 25 m až 60 m a vnitřního průměru asi 0,3 mm s vnitřní stěnou pokrytou makrogolem 20 000 R,
2. účinné od 1. 1. 2000- helia pro chromatografii R jako nosného plynu,
3. účinné od 1. 1. 2000- plamenoionizačního detektoru,
4. účinné od 1. 1. 2000- dělicího poměru 1/100.

účinné od 1. 1. 2000Teplota kolony se udržuje 15 min na 60 °C, pak se zvyšuje rychlostí 3 °C za min až na 180 °C, při níž se udržuje; teplota nástřikového prostoru je 200°C a detektoru 220°C.

účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 0,2 μl porovnávacího roztoku. Při dodržení předepsaných podmínek eluují jednotlivé látky v pořadí uvedeném ve složení porovnávacího roztoku. Zaznamenají se retenční časy těchto látek.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušku lze hodnotit pouze v případě, že počet teoretických pater je nejméně 30 000, počítáno pro pík p-cymenu při 80 °C, a je-li rozlišení píků thymolu a karvakrolu nejméně 1,5. Nastříkne se 0,2 μl zkoušeného roztoku. Porovnáním retenčních časů píků na chromatogramu zkoušeného roztoku s retenčními časy píků na chromatogramu porovnávacího roztoku se identifikují látky, které jsou přítomny ve zkoušeném roztoku (nepřihlíží se k píku odpovídajícímu hexanu). Obsah jednotlivých látek v procentech se stanoví obvyklým postupem (metoda normalizace). Obsah látek v procentech se pohybuje v rozmezí:

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000Ve zcela naplněných, vzduchotěsných obalech, chráněna před světlem a teplem.

účinné od 1. 1. 2000Následující vzor chromatogramu je pouze pro informaci a tato část není součástí požadavků článku.

účinné od 1. 1. 2000

účinné od 1. 1. 2000Obr. 1. Vzorový chromatogram tymiánové silice pro zkoušku Chromatografický profil

účinné od 1. 1. 2000† Tinzaparinum natricum

účinné od 1. 1. 2000Sodná sůl tinzaparinu

účinné od 1. 1. 2000

účinné od 1. 1. 2000n = 1 až 25, R = H nebo SO₃Na, R¹ = H nebo SO₃Na nebo COCH₃

účinné od 1. 1. 2000R² = H a R³= COONa nebo R² = COONa a R³ = H

účinné od 1. 1. 2000Je to sodná sůl nízkomolekulárního heparinu, která se získává enzymatickou depolymerizací heparinu z prasečí střevní sliznice heparinasou z Flavobacterium heparinum. Většina složek má na neredukujícím konci řetězce strukturu kyseliny 2-0-sulfo-4-enpyranosuronové a na redukujícím konci řetězce strukturu 2-N,6-0-disulfo-D-ghikosaminu.

účinné od 1. 1. 2000Sodná sůl tinzaparinu vyhovuje požadavkům článku Heparina massae molecularis minoris s následujícími změnami a doplňky.

účinné od 1. 1. 2000Průměrná molekulová hmotnost je v rozmezí 5500 až 7500 s charakteristickou hodnotou asi 6500.

účinné od 1. 1. 2000Stupeň sulfatace je 1,8 až 2,5 na disacharidovou jednotku.

účinné od 1. 1. 2000Účinnost je 70 m.j. až 120 m.j. účinnosti protifaktoru Xa v miligramu, počítáno na vysušenou látku. Poměr účinnosti protifaktoru Xa k účinnosti protifaktoru IIa je v rozmezí 1,5 až 2,5.

účinné od 1. 1. 2000Zkouška totožnosti

účinné od 1. 1. 2000Provede se zkouška totožnosti C uvedená v článku Heparina massae molecularis minoris s následujícími požadavky:

účinné od 1. 1. 2000Průměrná molekulová hmotnost je v rozmezí 5500 až 7500. Podíl řetězců s molekulovou hmotností nižší než 2000 je nejvýše 10,0%. Podíl řetězců s molekulovou hmotností v rozmezí 2000 až 8000 je 60,0 % až 72,0 %. Podíl řetězců s molekulovou hmotností nad 8000 je v rozmezí 22,0 % až 36,0 %.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. 1,0 g se rozpustí v 10 ml vody R. Roztok je čirý (2.2.1) a není zbarven intenzivněji než stupeň 5 nejpodobnějšího porovnávacího barevného roztoku (2.2.2, Metoda II)

účinné od 1. 1. 2000Absorbance (2.2.25) 50,0 mg se rozpustí v 100 ml kyseliny chlorovodíkové 0,01 mol/l RS. Měří se absorbance při 231 nm; specifická absorbance je 8,0 až 12,5, počítáno na vysušenou látku.

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000Separandum.

účinné od 1. 1. 2000Tocoferoli alfa acetas

účinné od 1. 1. 2000Tokoferolacetat alfa

účinné od 1. 1. 2000Synonyma. a-Tocopheroli acetas, Tocoferolum aceticum, Tocoferoli acetas, octan vitaminu E

účinné od 1. 1. 2000

účinné od 1. 1. 2000Je to (2RS)-2,5,7,8-tetramethyl-2-[(4RS,8RS)-4,8,12-trimethyltridecyl]chroman-6-ylacetat. Obsahuje 96,0 % až 102,0 % sloučeniny C₃₁H₅₂O₃.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Čirá slabě zelenožlutá viskózní olejovitá kapalina. Je prakticky nerozpustný ve vodě, snadno rozpustný v acetonu, v ethanolu, v etheru a v mastných olejích, dobře rozpustný v lihu 96%.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: B, D.

účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, C a D, viz Obecné zásady (1.2).

1. účinné od 1. 1. 2000A. 10 mg se rozpustí v ethanolu R a zředí se jím na 100 ml. Měří se absorbance tohoto roztoku při 230 nm až 350 nm (2.2.25). Absorpční maximum roztoku je při 284 nm, prodleva při 278 nm a minimum při 254 nm.
2. účinné od 1. 1. 2000B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky se shoduje se spektrem tokoferolacetatu alfa CRL.
3. účinné od 1. 1. 2000C. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití vrstvy silikagelu HF₂₅₄ R.

   účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). Asi 10 mg se rozpustí ve 2 ml cyklohexanu R.

   účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (b). Ve zkumavce se zabroušenou zátkou se rozpustí asi 10 mg ve 2 ml kyseliny sírové v lihu 2,5 mol/l RS a 5 min se zahřívá na vodní lázni. Po ochlazení se přidají 2 ml vody R, 2 ml cyklohexanu R a 1 min se protřepává. Po oddělení se použije horní vrstva.

   účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). Asi 10 mg tokoferolacetatu alfa CRL se rozpustí ve 2 ml cyklohexanu R.

   účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). Připraví se, jak je popsáno u zkoušeného roztoku (b). Namísto zkoušené látky se použije tokoferolacetat alfa CRL.

   účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese odděleně po 10 μl každého roztoku a vyvíjí se směsí objemových dílů etheru R a cyklohexanu R (20 + 80) po dráze 15 cm. Vrstva se usuší na vzduchu a pozoruje se v ultrafialovém světle při 254 nm. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (a) odpovídá polohou a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a). Na chromatogramech zkoušeného roztoku (b) a porovnávacího roztoku (b) jsou dvě skvrny: skvrna s vyšší hodnotou R_F je skvrna tokoferolacetatu alfa a odpovídá skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a); skvrna o nižší hodnotě R_F je skvrna tokoferolu alfa. Vrstva se pak postříká směsí objemových dílů kyseliny chlorovodíkové R, roztoku chloridu železitého R (2,5 g/l) v lihu 96% R a roztoku fenantroliniumchloridu R (10 g/l) v lihu 96% R (10 + 40 + 40); na chromatogramech zkoušeného roztoku (b) a porovnávacího roztoku (b) je skvrna tokoferolu alfa zbarvena oranžově.

1. účinné od 1. 1. 2000D. Zkouška Optická otáčivost, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Optická otáčivost (2.2.7). -0,01° až +0,01°; měří se roztok připravený rozpuštěním 2,50 g v ethanolu R a zředěním stejným rozpouštědlem na 25,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Absorbance (2.2.25). 0,150 g se rozpustí v ethanolu R a zředí se jím na 100,0 ml. 10,0 ml tohoto roztoku se zředí ethanolem R na 100,0 ml (roztoka). 20,0 ml původního roztoku se zředí na 50,0 ml ethanolem R (roztok b). Změří se absorbance roztoku (a) v maximu při 284 nm a absorbance roztoku (b) v minimu při 254 nm. Specifická absorbance v maximu je 42,0 až 45,0 a v minimu je 7,0 až 9,0.

účinné od 1. 1. 2000Číslo kyselosti (2.5.1). Nejvýše 2,0; stanoví se s 2,00 g zkoušené látky.

účinné od 1. 1. 2000Volný tokoferol. Nejvýše 1,0%; 0,500 g se rozpustí ve 100 ml roztoku kyseliny sírové v lihu 0,25 mol/l RS. Přidá se 20 ml vody R a 0,1 ml roztoku difenylaminu R (2,5 g/l) v kyselině sírové R atitruje se tetrasulfatoceričitanem amonným 0,01 mol/l VS do modrého zbarvení, které vydrží alespoň 5 s. Provede se slepá zkouška.

účinné od 1. 1. 20001 ml tetrasulfatoceričitanu amonného 0,01 mol/l VS odpovídá 2,154 mg volného tokoferolu.

účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 0,5 g vyhovuje limitní zkoušce D na těžké kovy (20 μg/g). K přípravě porovnávacího roztoku se použije 1 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml).

účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.

účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu

účinné od 1. 1. 2000Stanoví se plynovou chromatografií (2.2.28) za použití dotriakontanu R jako vnitřního standardu.

účinné od 1. 1. 2000Roztok vnitřního standardu. 1,0 g dotriakontanu R se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 100,0 ml. Zkoušený roztok. 0,100 g se rozpustí v 10,0 ml roztoku vnitřního standardu, zředí se hexanem R na 50,0 ml a promíchá se.

účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. 0,100 g tokoferolacetatu alfa CRL se rozpustí v 10,0ml roztoku vnitřního standardu, zředí se hexanem R na 50,0 ml a promíchá se.

účinné od 1. 1. 2000Chromatografícký postup se obvykle provádí za použití:

1. účinné od 1. 1. 2000- silanizované skleněné kolony délky 2,0 m až 3,0 m a vnitřního průměru 2,2 mm až 4,0 mm naplněné křemelinou pro plynovou chromatografii R (125 μm až 150 μm nebo 150 μm až 180 μm) impregnovanou 1 % až 5 % polydimethylsiloxanu R; na obou koncích kolony je zátka silanizované skleněné vaty,
2. účinné od 1. 1. 2000- dusíku pro chromatografii R jako nosného plynu při průtokové rychlosti 25 ml/min až 90 ml/min,
3. účinné od 1. 1. 2000- plamenoionizačního detektoru.

účinné od 1. 1. 2000Teplota kolony se udržuje konstantní v rozmezí 245 °C až 280 °C, teplota nástřikového prostoru a detektoru je v rozmezí 270 °C až 320 °C. Teplota kolony a průtoková rychlost nosného plynu se nastaví tak, aby se dosáhlo požadovaného rozlišení.

účinné od 1. 1. 2000Nastřikuje se přímo do kolony nebo prostřednictvím nástřikového prostoru (přednostně vyloženého sklem) za použití automatického nastřikovacího zařízení nebo nějaké jiné reprodukovatelné nastřikovací metody. Plochy píků se měří elektronickým integrátorem.

účinné od 1. 1. 2000Rozlišení. Nastříkne se 1 μl porovnávacího roztoku. Postup se opakuje, až odezvový faktor (RF), stanovený, jak je popsáno dále, je konstantní s odchylkou do ±2 %. Rozlišení (R_s) musí být větší než 1,4.

účinné od 1. 1. 2000Zkouška na rušící látky. 0,100 g zkoušené látky se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 50,0 ml. Nastříkne se 1 μl a zaznamená se chromatogram. Nastaví se citlivost tak, aby výška píku tokoferolacetatu alfa byla nejméně 50 % celé stupnice zapisovače. Během zaznamenávání se změní citlivost tak, aby pík se stejnou hodnotou t_R jako dotriakontan se zaznamenal s citlivostí nejméně osmkrát větší než pík tokoferolacetatu alfa. Jestliže se na registračním papíru šířky 250 mm zaznamená nějaký pík výšky alespoň 5 mm stejné hodnoty t_R jako pík dotriakontanu, použije se, je-li to nutné, pro konečný výpočet korigovaná plocha píku Sˈ_D(_kor) podle vzorce:

účinné od 1. 1. 2000v němž značí:

1. účinné od 1. 1. 2000Sʹ_d - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu zkoušeného roztoku,
2. účinné od 1. 1. 2000S_I - plochu rušícího píku (stejné hodnoty t_R, jako má vnitřní standard) na chromatogramu získaném při zkoušce na rušící látky,
3. účinné od 1. 1. 2000Sʹ_t - plochu píku tokoferolacetatu alfa na chromatogramu zkoušeného roztoku,
4. účinné od 1. 1. 2000S_TI - plochu píku tokoferolacetatu alfa na chromatogramu získaném při zkoušce na rušící látky,
5. účinné od 1. 1. 2000f - faktor vyjadřující změnu citlivosti.

účinné od 1. 1. 2000Po ověření rozlišení kolony se nastříkne 1 μl porovnávacího roztoku a zaznamená se chromatogram, přičemž se nastaví taková citlivost, aby pík tokoferolacetatu alfa byl nejméně 50 % rozsahu stupnice zapisovače. Změří se plochy píků tokoferolacetatu alfa (S_T) a dotriakontanu (S_D) a stanoví se odezvový faktor (RF), jak je popsáno níže. Stejným způsobem se nastříkne 1 μl zkoušeného roztoku. Změří se plochy píků tokoferolacetatu alfa (S՛_T a dotriakontanu (S՛_D).

účinné od 1. 1. 2000Stanoví se odezvový faktor (RF) pro tokoferolacetat alfa na chromatogramu porovnávacího roztoku z ploch píku tokoferolacetatu alfa a píku dotriakontanu podle vzorce:

účinné od 1. 1. 2000Obsah tokoferolacetatu alfa v procentech se vypočítá podle vzorce:

účinné od 1. 1. 2000V nich značí:

účinné od 1. 1. 2000Uchovávání

účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.

účinné od 1. 1. 2000Separandum.

účinné od 1. 1. 2000Tocoferoli alfa DL hydrogenosuccinas

účinné od 1. 1. 2000Tokoferolhydrogensukcinat alfa DL

účinné od 1. 1. 2000Synonymum. DL-a-Tocopheroli hydrogenosuccinas

účinné od 1. 1. 2000

účinné od 1. 1. 2000Je to 2,5,7,8-tetramethyl-2-(4,8,12-trimethyltridecyl)-6-chromanylhydrogensukcinat. Obsahuje 96,1 % až 102,0 % sloučeniny C₃₃H₅₄O₅.

účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti

účinné od 1. 1. 2000Bílý nebo téměř bílý krystalický prášek. Je prakticky nerozpustný ve vodě, dobře rozpustný v acetonu, v ethanolu a v etheru, velmi snadno rozpustný v dichlormethanu.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti

účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: B a D.

účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, C a D, viz Obecné zásady (1.2).

1. účinné od 1. 1. 2000A. Zkouška Absorbance, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
2. účinné od 1. 1. 2000B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky se shoduje se spektrem tokoferolhydrogensukcinatu alfa RRR CRL.
3. účinné od 1. 1. 2000C. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití vrstvy silikagelu HF₂₅₄ R.

   účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). 10 mg se rozpustí ve 2 ml cyklohexanu R.

   účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (b). 10 mg se rozpustí v zábrusové zkumavce ve 2 ml kyseliny sírové v lihu 2,5 mol/l RS. Zahřívá se na vodní lázni 5 min, ochladí se a přidají se 2 ml vody R a 2 ml cyklohexanu R. Třepe se 1 min. Použije se horní vrstva.

   účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 10 mg tokoferolhydrogensukcinatu alf a RRR CRL se rozpustí ve 2 ml cyklohexanu R.

   účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). Připraví se stejným způsobem jako zkoušený roztok (b) za použití tokoferolhydrogensukcinatu alfa RRR CRL místo zkoušené látky.

   účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese odděleně po 10 μl každého roztoku a vyvíjí se směsí obsahující 0,2 ml kyseliny octové ledové R ve směsi objemových dílů etheru R a cyklohexanu R (20 + 80) po dráze 15 cm. Vrstva se suší v proudu vzduchu a pozoruje se v ultrafialovém světle při 254 nm. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (a) odpovídá svou polohou a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a). Na chromatogramech zkoušeného roztoku (b) a porovnávacího roztoku (b) jsou dvě skvrny: skvrna s vyšší hodnotou R_F je skvrna tokoferolu alfa; skvrna s nižší hodnotou R_F je skvrna tokoferolhydrogensukcinatu alfa a odpovídá skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a). V závislosti na stupni hydrolýzy může být skvrna s nižší hodnotou R_F slabá nebo může dokonce chybět. Vrstva se postříká směsí objemových dílů kyseliny chlorovodíkové R, roztoku chloridu železitého R (2,5 g/l) v lihu 96 % R a roztoku fenanthroliniumchloridu R (10 g/l) v lihu 96% R (10 + 40 + 40). Na chromatogramech zkoušeného roztoku (b) a porovnávacího roztoku (b) je skvrna tokoferolu alfa zbarvena oranžově.

1. účinné od 1. 1. 2000D. Zkouška Optická otáčivost, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu

účinné od 1. 1. 2000Optická otáčivost (2.2.7). –0,01° až +0,01°; měří se roztok připravený rozpuštěním 2,50 g v ethanolu R a zředěním stejným rozpouštědlem na 25,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Absorbance (2.2.25). 0,150 g se rozpustí v ethanolu R a zředí se jím na 100 ml. 10,0 ml tohoto roztoku se zředí ethanolem R na 100,0 ml (roztok a). 20,0 ml původního roztoku se zředí ethanolem R na 50,0 ml (roztok b). Změří se absorbance roztoku (a) v maximu při 284 nm a absorbance roztoku (b) v minimu při 254 nm. Specifická absorbance v maximu je 35,0 až 38,0 a v minimu 6,0 až 8,0.

účinné od 1. 1. 2000Číslo kyselosti (2.5.1). 101 až 108; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.

účinné od 1. 1. 2000Volný tokoferol. Nejvýše 1,0 %; 0,500 g se rozpustí ve 100 ml kyseliny sírové v lihu 0,25 mol/l RS. Přidá se 20 ml vody R a 0,1 ml roztoku difenylaminu R (2,5 g/1) v kyselině sírové R a titruje se tetrasulfatoceričitanem amonným 0,01 mol/l VS do vzniku modrého zbarvení, které vydrží nejméně 5 s. Provede se slepá zkouška.

účinné od 1. 1. 20001 ml tetrasulfatoceričitanu amonného 0,01 mol/l VS odpovídá 2,154 mg volného tokoferolu.

účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 0,50 g vyhovuje limitní zkoušce D na těžké kovy (20 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 1 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml).

účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky. Použije se kyselina sírová R místo kyseliny sírové zředěné RS.

účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu

účinné od 1. 1. 2000Provede se plynová chromatografie (2.2.28) za použití dotriakontanu R jako vnitřního standardu.

účinné od 1. 1. 2000Roztok vnitřního standardu. 0,300 g dotriakontanu R se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 100,0 ml.

účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. K 30,0 mg ve 20ml lahvičce se pipetou převede 2,0 ml methanolu R, 1,0 ml dimethoxypropanu R a 0,1 ml kyseliny chlorovodíkové R. Lahvička se těsně uzavře, obsah se promíchá v ultrazvukové lázni a ponechá se stát ve tmě 1 h (±5 min). Vzorek se na 10 min přemístí ze tmy na parní lázeň pod ochrannou dusíkovou atmosférou, pak se přidá pipetou 10,0 ml roztoku vnitřního standardu a promíchá se vířivým míchadlem.