účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. K 30,0 mg tokoferolhydrogensukcinatu alfa RRR CRL ve 20ml lahvičce (zváženo s přesností na 0,01 mg) se pipetou převedou 2,0 ml methanolu R, 1,0 ml dimethoxypropanu R a 0,1 ml kyseliny chlorovodíkové R. Lahvička se těsně uzavře, obsah se promíchá v ultrazvukové lázni a ponechá se stát ve tmě 1 h (±5 min). Porovnávací roztok se na 10 min přemístí ze tmy na parní lázeň pod ochrannou dusíkovou atmosférou, pak se přidá pipetou 10,0 ml roztoku vnitřního standardu a promíchá se vířivým míchadlem.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- křemenné kapilární kolony délky 15 m a vnitřního průměru 0,32 mm s vnitřními stěnami pokrytými 0,25 μm vrstvou polydimethylsiloxanu R,
- účinné od 1. 1. 2000- helia pro chromatografii R jako nosného plynu při průtokové rychlosti 3 ml/min až 6 ml/min,
- účinné od 1. 1. 2000- plamenoionizačního detektoru.
účinné od 1. 1. 2000Teplota nástřikového prostoru se udržuje na 300 °C a teplota detektoru na 330 °C. Dělicí poměr se nastaví mezi 1 : 10 až 1 : 20. Teplota kolony je 200 °C a zvyšuje se rychlostí 5 °C/min do 250 °C, při nichž se udržuje 10 min.
účinné od 1. 1. 2000Nastřikuje se přímo na kolonu nebo prostřednictvím skleněné vstřikovací trubice za použití automatického nástřikového zařízení nebo jiné reprodukovatelné nastřikovací metody. Plochy píků se měří elektronickým integrátorem. Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku je rozlišení mezi píky dotriakontanu a tokoferolhydrogensukcinatu alfa nejméně 12,0.
účinné od 1. 1. 2000Zkouška na rušící látky. 0,100 g zkoušené látky se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 50,0 ml. Nastříkne se 1 μl tohoto roztoku a zaznamená se chromatogram. Jestliže je na něm zaznamenán pík se stejnou hodnotou tR jako dotriakontan, vypočítá se relativní plocha tohoto píku vzhledem k ploše píku tokoferolsukcinatu alfa. Jestliže je relativní plocha píku větší než 0,5 %, použije se pro konečný výpočet korigovaná plocha píku S´D(kor) vypočítaná podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000v němž značí:
| SʹD | - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| SI | - plochu rušícího píku (stejné hodnoty tR, jako má vnitřní standard) na chromatogramu získaném ve zkoušce na rušicí látky, |
| SʹT | - plochu píku tokoferolhydrogensukcinatu alfa na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| StI | - plochu píku tokoferolhydrogensukcinatu alfa na chromatogramu získaném ve zkoušce na rušicí látky. |
účinné od 1. 1. 2000Po vhodném nastavení systému se nastříkne 1 μl porovnávacího roztoku a zaznamená se chromatogram. Změří se plochy píků tokoferolhydrogensukcinatu alfa (ST) a dotriakontanu (SD) a vypočítá se odezvový faktor (RF) podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000Stejným způsobem se nastříkne 1 μl zkoušeného roztoku. Změří se plochy píků tokoferolhydrogensukcinatu alfa (S՛t) a dotriakontanu (S՛D).
účinné od 1. 1. 2000Obsah tokoferolhydrogensukcinatu alfa v procentech se vypočítá podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000v němž značí:
| SD | - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu porovnávacího roztoku, |
| SʹD(kor) | - korigovanou plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| ST | - plochu píku tokoferolhydrogensukcinatu alfa RRR CRL na chromatogramu porovnávacího roztoku, |
| Sʹt | - plochu píku tokoferolhydrogensukcinatu alfa DL na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| mD | - hmotnost vnitřního standardu v miligramech ve zkoušeném a v porovnávacím roztoku, |
| mT | - hmotnost tokoferolhydrogensukcinatu alfa RRR CRL v miligramech v porovnávacím roztoku, |
| m | - hmotnost zkoušené látky v miligramech ve zkoušeném roztoku. |
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Separandum.
účinné od 1. 1. 2000Tocoferoli alfa RRR acetas
účinné od 1. 1. 2000Tokoferolacetat alfa RRR
účinné od 1. 1. 2000Synonymum. RRR-a-Tocopheroli acetas
| C31H52O3 | Mr 472,75 |
účinné od 1. 1. 2000Je to (2R)-2,5,7,8-tetramethyl-2-[(4R,8R)-4,8,12-trimethyltridecyl]-6-chromanylacetat. Obsahuje 96,0 % až 102,0 % sloučeniny C31H52O3.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Čirá světle zelenožlutá viskózní olejovitá kapalina. Je prakticky nerozpustný ve vodě, dobře rozpustný v lihu 96%, snadno rozpustný v acetonu, v ethanolu, v etheru a v mastných olejích.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: B a D.
účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, C a D, viz Obecné zásady (1. 2).
- účinné od 1. 1. 2000A. Zkouška Absorbance, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
- účinné od 1. 1. 2000B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky se shoduje se spektrem tokoferolacetatu alfa RRR CRL.
- účinné od 1. 1. 2000C. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití vrstvy silikagelu HF254 R.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). 10 mg se rozpustí ve 2 ml cyklohexanu R.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (b). 10 mg se rozpustí v zábrusové zkumavce ve 2 ml kyseliny sírové v lihu 2,5 mol/l RS. Zahřívá se na vodní lázni 5 min, ochladí se a přidají se 2 ml vody R a 2 ml cyklohexanu R. Třepe se 1 min. Použije se horní vrstva.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 10 mg tokoferolacetatu alfa RRR CRL se rozpustí ve 2 ml cyklohexanu R.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). Připraví se stejným způsobem jako zkoušený roztok (b) za použití tokoferolacetatu alfa RRR CRL místo zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese odděleně po 10 μl každého roztoku a vyvíjí se směsí objemových dílů etheru R a cyklohexanu R (20 + 80) po dráze 15 cm. Vrstva se suší v proudu vzduchu a pozoruje se v ultrafialovém světle při 254 nm. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (a) se polohou a velikostí shoduje s hlavní skvrnou na chromatogramu porovnávacího roztoku (a). Na chromatogramech zkoušeného roztoku (b) a porovnávacího roztoku (b) jsou dvě skvrny: skvrna s vyšší hodnotou RF je skvrna tokoferolacetatu alfa a odpovídá skvrnĕ na chromatogramu porovnávacího roztoku (a); skvrna s nižší hodnotou RF je skvrna tokoferolu alfa. Vrstva se postříká směsí objemových dílů kyseliny chlorovodíkové R, roztoku chloridu železitého R (2,5 g/l) v lihu 96% R a roztoku fenanthroliniumchloridu R (10 g/l) v lihu 96% R (10 + 40 + 40). Na chromatogramech zkoušeného roztoku (b) a porovnávacího roztoku (b) je skvrna tokoferolu alfa zbarvena oranžově.
- účinné od 1. 1. 2000D. Po zmýdelnění je vzniklý tokoferol alfa RRR pravotočivý (2.2.7). Specifická optická otáčivost po oxidaci na chinonovou formu je nejméně +24°.
účinné od 1. 1. 2000Zkouška se provádí za ochrany před aktinickým světlem. 1,0 g se ve 250ml zábrusové baňce s kulatým dnem rozpustí ve 30 ml ethanolu R a 3 min se zahřívá pod zpětným chladičem. Do vroucího roztoku se přidá chladičem 20 ml hydroxidu draselného v lihu 2 mol/l RS, zahřívá se pod zpětným chladičem dalších 20 min a bez ochlazení se přidají chladičem po kapkách 4,0 ml kyseliny chlorovodíkové R. Ochladí se, chladič se opláchne 10 ml ethanolu R, obsah baňky se převede do 500ml dělicí nálevky a baňka se vypláchne čtyřikrát 25 ml vody R a čtyřikrát 25 ml etheru R. Všechny promývací roztoky se převedou do dělicí nálevky a 2 min se intenzivně protřepávají. Po oddělení vrstev se každá vrstva převede do samostatné dělicí nálevky. Vodná vrstva se dvakrát protřepe 50 ml etheru R a spojené extrakty se přidají k hlavnímu etherovému extraktu. Spojené etherové podíly se promyjí čtyřikrát 100 ml vody R a promývací vodné vrstvy se odstraní.
účinné od 1. 1. 2000K etherovému roztoku se přidá 40 ml roztoku hexakyanoželezitanu draselného (100 g/l) v roztoku hydroxidu sodného R (8 g/l) a třepe se 3 min. Etherový roztok se promyje čtyřikrát 50 ml vody R, promývací vodné vrstvy se odstraní, etherová vrstva se vysuší nad síranem sodným bezvodým R. Ether se odpaří na vodní lázni za sníženého tlaku nebo v atmosféře dusíku na zbytek několika mililitrů, potom se bez zahřátí zcela odstraní poslední stopy etheru. Zbytek se ihned rozpustí v 25,0 ml trimethylpentanu R a změří se optická otáčivost.
účinné od 1. 1. 2000Vypočítá se specifická optická otáčivost látky ve zkoušeném roztoku, přičemž c je počet gramů odpovídajících tokoferolu alfa (faktor 0,911) v 1000 ml.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Absorbance (2.2.25). 0,150 g se rozpustí v ethanolu R a zředí se jím na 100 ml. 10,0 ml tohoto roztoku se zředí ethanolem R na 100,0 ml (roztoka). 20,0 ml původního roztoku se zředí ethanolem R na 50,0 ml (roztok b). Změří se absorbance roztoku (a) v maximu při 284 nm a absorbance roztoku (b) v minimu při 254 nm. Specifická absorbance v maximu je 42,0 až 45,0 a v minimu 7,0 až 9,0.
účinné od 1. 1. 2000Číslo kyselosti (2.5.1). Nejvýše 2,0; stanoví se s 2,00 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Volný tokoferol. Nejvýše 1,0%; 0,500 g se rozpustí ve 100 ml kyseliny sírové v lihu 0,25 mol/l RS. Přidá se 20 ml vody R a 0,1 ml roztoku difenylaminu R (2,5 g/l) v kyselině sírové R a titruje se tetrasulfatoceričitanem amonným 0,01 mol/l VS do vzniku modrého zbarvení, které vydrží nejméně 5 s. Provede se slepá zkouška.
účinné od 1. 1. 20001 ml tetrasulfatoceričitanu amonného 0,01 mol/l VS odpovídá 2,154 mg volného tokoferolu.
účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 0,50 g vyhovuje limitní zkoušce D na těžké kovy (20 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 1 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml).
účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky. Použije se kyselina sírová R místo kyseliny sírové zředěné RS.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu
účinné od 1. 1. 2000Provede se plynová chromatografie (2.2.28) za použití dotriakontanu R jako vnitřního standardu.
účinné od 1. 1. 2000Roztok vnitřního standardu. 1,0 g dotriakontanu R se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 0,100 g se rozpustí v 10,0 ml roztoku vnitřního standardu, zředí se hexanem R na 50,0 ml a promíchá se.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. 0,100 g tokoferolacetatu alfa CRL se rozpustí v 10,0 ml roztoku vnitřního standardu, zředí se hexanem R na 50,0 ml a promíchá se.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- křemenné kapilární kolony délky 15 m a vnitřního průměru 0,32 mm s vnitřními stěnami pokrytými 0,25 μm vrstvou polydimethylsiloxanu R,
- účinné od 1. 1. 2000- helia pro chromatografii R jako nosného plynu při průtokové rychlosti 3 ml/min až 6 ml/min,
- účinné od 1. 1. 2000- plamenoionizačního detektoru.
účinné od 1. 1. 2000Teplota nástřikového prostoru se udržuje na 300 °C a teplota detektoru na 330 °C. Dělicí poměr se nastaví mezi 1 : 10 až 1 : 20. Teplota kolony je 200 °C a zvyšuje se rychlostí 5 °C/min do 250 °C, při nichž se udržuje 10 min.
účinné od 1. 1. 2000Nastřikuje se přímo na kolonu nebo prostřednictvím skleněné vstřikovací trubice za použití automatického nástřikového zařízení nebo jiné reprodukovatelné nastřikovací metody. Plochy píků se měří elektronickým integrátorem. Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku je rozlišení mezi píky dotriakontanu a tokoferolacetatu alfa nejméně 4,0.
účinné od 1. 1. 2000Zkouška na rušící látky. 0,100 g zkoušené látky se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 50,0 ml. Nastříkne se 1 μl tohoto roztoku a zaznamená se chromatogram. Jestliže je na něm zaznamenán pík se stejnou hodnotou tR jako dotriakontan, vypočítá se plocha tohoto píku vzhledem k ploše píku tokoferolacetatu alfa. Jestliže je relativní plocha píku větší než 0,5 %, použije se pro konečný výpočet korigovaná plocha píku S՛D(kor) vypočítaná podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000v němž značí:
| S՛d | - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| SI | - plochu rušícího píku (stejné hodnoty tR, jako má vnitřní standard) na chromatogramu získaném ve zkoušce na rušící látky, |
| S՛t | - plochu píku tokoferolacetatu alfa na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| STI | - plochu píku tokoferolacetatu alfa na chromatogramu získaném ve zkoušce na rušicí látky. |
účinné od 1. 1. 2000Po vhodném nastavení systému se nastříkne 1 μl porovnávacího roztoku a zaznamená se chromatogram. Změří se plochy píků tokoferolacetatu alfa (ST) a dotriakontanu (SD) a vypočítá se odezvový faktor (RF) podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000Stejným způsobem se nastříkne 1 μl zkoušeného roztoku. Změří se plochy píků tokoferolace- tatu alfa (S՛T) a dotriakontanu (S՛D).
účinné od 1. 1. 2000Obsah tokoferolacetatu alfa v procentech se vypočítá podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000V nich značí:
| SD | - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu porovnávacího roztoku, |
| S՛D(kor) | - korigovanou plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| ST | - plochu píku tokoferolacetatu alfa CRL na chromatogramu porovnávacího roztoku, |
| S՛t | - plochu píku tokoferolacetatu alfa na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| mD | - hmotnost vnitřního standardu v miligramech ve zkoušeném a v porovnávacím roztoku, |
| mT | - hmotnost tokoferolacetatu alfa CRL v miligramech v porovnávacím roztoku, |
| m | - hmotnost zkoušené látky v miligramech ve zkoušeném roztoku. |
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Separandum.
účinné od 1. 1. 2000Tocoferoli alfa RRR hydrogenosuccinas
účinné od 1. 1. 2000Tokoferolhydrogensukcinat alfa RRR
účinné od 1. 1. 2000Synonymum. RRR-a-Tocopheroli hydrogenosuccinas
| C33H54O5 | Mr 530,78 |
účinné od 1. 1. 2000Je to (2R)-2,5,7,8-tetramethyl-2-[(4R, 8R)-4,8,12-trimethyltridecyl]-6-chromanylhydrogen-sukcinat. Obsahuje 96,0 % až 102,0 % sloučeniny C33H54O5.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Bílý nebo téměř bílý krystalický prášek. Je prakticky nerozpustný ve vodě, dobře rozpustný v acetonu, v ethanolu a v etheru, velmi snadno rozpustný v dichlormethanu.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: B a D.
účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, C a D, viz Obecné zásady (1.2).
- účinné od 1. 1. 2000A. Zkouška Absorbance, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
- účinné od 1. 1. 2000B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky se shoduje se spektrem tokoferolhydrogensukcinatu alfa RRR CRL.
- účinné od 1. 1. 2000C. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití vrstvy silikagelu HF254R.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). 10 mg se rozpustí ve 2 ml cyklohexanu R.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (b). 10 mg se rozpustí v zábrusové zkumavce ve 2 ml kyseliny sírové v lihu 2,5 mol/l RS. Zahřívá se na vodní lázni 5 min, ochladí se a přidají se 2 ml vody R a 2 ml cyklohexanu R. Třepe se 1 min. Použije se horní vrstva.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 10 mg tokoferolhydrogensukcinatu alfa RRR CRL se rozpustí ve 2 ml cyklohexanu R.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). Připraví se stejným způsobem jako zkoušený roztok (b) za použití tokoferolhydrogensukcinatu alfa RRR CRL místo zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese odděleně po 10 μl každého roztoku a vyvíjí se směsí obsahující 0,2 ml kyseliny octové ledové R ve směsi objemových dílů etheru R a cyklohexanu R (20 + 80) po dráze 15 cm. Vrstva se suší v proudu vzduchu a pozoruje se v ultrafialovém světle při 254 nm. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (a) odpovídá svou polohou a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a). Na chromatogramech zkoušeného roztoku (b) a porovnávacího roztoku (b) jsou dvě skvrny: skvrna s vyšší hodnotou RF je skvrna tokoferolu alfa; skvrna s nižší hodnotou RF je skvrna tokoferolhydrogensukcinatu alfa a odpovídá skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a). V závislosti na stupni hydrolýzy může být skvrna s nižší hodnotou RF slabá nebo může dokonce chybět. Vrstva se postříká směsí objemových dílů kyseliny chlorovodíkové R, roztoku chloridu železitého R (2,5 g/l) v lihu 96% R a roztoku fenanthroliniumchloridu R (10 g/l) v lihu 96% R (10 + 40 + 40). Na chromatogramech zkoušeného roztoku (b) a porovnávacího roztoku (b) je skvrna tokoferolu alfa zbarvena oranžově.
- účinné od 1. 1. 2000D. Po zmýdelnění je vzniklý tokoferol alfa RRR pravotočivý (2.2.7). Specifická optická otáčivost po oxidaci na chinonovou formuje nejméně +24°.
účinné od 1. 1. 2000Zkouška se provádí za ochrany před aktinickým světlem. 1,0 g se v 250ml zábrusové baňce s kulatým dnem rozpustí ve 30 ml ethanolu R a 3 min se zahřívá pod zpětným chladičem. Do vroucího roztoku se přidá chladičem 20 ml hydroxidu draselného v lihu 2 mol/l RS, zahřívá se pod zpětným chladičem dalších 20 min a bez ochlazení se přidají chladičem po kapkách 4,0 ml kyseliny chlorovodíkové R. Ochladí se, chladič se opláchne 10 ml ethanolu R, obsah baňky se převede do 500ml dělicí nálevky a baňka se vypláchne čtyřikrát 25 ml vody R a čtyřikrát 25 ml etheru R. Všechny promývací roztoky se převedou do dělicí nálevky a 2 min se intenzivně protřepávají. Po oddělení vrstev se každá vrstva převede do samostatné dělicí nálevky. Vodná vrstva se dvakrát protřepe 50 ml etheru R a spojené extrakty se přidají k hlavnímu etherovému extraktu. Spojené etherové podíly se promyjí čtyřikrát 100 ml vody R a promývací vodné vrstvy se odstraní.
účinné od 1. 1. 2000K etherovému roztoku se přidá 40 ml roztoku hexakyanoželezitanu draselného R (100 g/l) v roztoku hydroxidu sodného R (8 g/l) a třepe se 3 min. Etherový roztok se promyje čtyřikrát 50 ml vody R, promývací vodné vrstvy se odstraní, etherová vrstva se vysuší nad síranem sodným bezvodým R. Ether se odpaří na vodní lázni za sníženého tlaku nebo v atmosféře dusíku na zbytek několika mililitrů, potom se bez zahřátí zcela odstraní poslední stopy etheru. Zbytek se ihned rozpustí v 25,0 ml trimethylpentanu R a změří se optická otáčivost.
účinné od 1. 1. 2000Vypočítá se specifická optická otáčivost látky ve zkoušeném roztoku, přičemž c je počet gramů odpovídajících tokoferolu alfa (faktor 0,811) v 1000 ml.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Absorbance (2.2.25). 0,150 g se rozpustí v ethanolu R a zředí se jím na 100 ml. 10,0 ml tohoto roztoku se zředí ethanolem R na 100,0 ml (roztoka). 20,0 ml původního roztoku se zředí ethanolem R na 50,0 ml (roztok b). Změří se absorbance roztoku (a) v maximu při 284 nm a absorbance roztoku (b) v minimu při 254 nm. Specifická absorbance v maximu je 35,0 až 38,0 a v minimu 6,0 až 8,0.
účinné od 1. 1. 2000Číslo kyselosti (2.5.1). 101 až 108; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Volný tokoferol. Nejvýše 1,0%; 0,500 g se rozpustí ve 100 ml kyseliny sírové v lihu 0,25 mol/l RS. Přidá se 20 ml vody R a 0,1 ml roztoku difenylaminu R (2,5 g/l) v kyselině sírové R atitruje se tetrasulfatoceričitanem amonným 0,01 mol/l VS do vzniku modrého zbarvení, které vydrží nejméně 5 s. Provede se slepá zkouška.
účinné od 1. 1. 20001 ml tetrasulfatoceričitanu amonného 0,01 mol/l VS odpovídá 2,154 mg volného tokoferolu.
účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 0,50 g vyhovuje limitní zkoušce D na těžké kovy (20 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 1 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml).
účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky. Použije se kyselina sírová R místo kyseliny sírové zředěné RS.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu
účinné od 1. 1. 2000Provede se plynová chromatografie (2.2.28) za použití dotriakontanu R jako vnitřního standardu.
účinné od 1. 1. 2000Roztok vnitřního standardu. 0,300 g dotriakontanu R se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. K 30,0 mg ve 20ml lahvičce se pipetou převedou 2,0 ml methanolu R, 1,0 ml dimethoxypropanu R a 0,1 ml kyseliny chlorovodíkové R. Lahvička se těsně uzavře, obsah se promíchá v ultrazvukové lázni a ponechá se stát ve tmě 1 h (±5 min). Vzorek se na 10 min přemístí ze tmy na parní lázeň pod ochrannou dusíkovou atmosférou, pak se přidá pipetou 10,0 ml roztoku vnitřního standardu a pomocí vířivého míchadla se rozpustí.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. K 30,0 mg tokoferolhydrogensukcinatu alfa RRR CRL ve 20ml lahvičce se pipetou převedou 2,0 ml methanolu R, 1,0 ml dimethoxypropanu R a 0,1 ml kyseliny chlorovodíkové R. Lahvička se těsně uzavře, obsah se promíchá v ultrazvukové lázni a ponechá se stát ve tmě 1 h (±5 min). Porovnávací roztok se na 10 min přemístí ze tmy na parní lázeň pod ochrannou dusíkovou atmosférou, pak se přidá pipetou 10,0 ml roztoku vnitřního standardu a pomocí vířivého míchadla se rozpustí.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- křemenné kapilární kolony délky 15 m a vnitřního průměru 0,32 mm s vnitřními stěnami pokrytými 0,25 μm vrstvou polydimethylsiloxanu R,
- účinné od 1. 1. 2000- helia pro chromatografii R jako nosného plynu při průtokové rychlosti 3 ml/min až 6 ml/min,
- účinné od 1. 1. 2000- plamenoionizačního detektoru.
účinné od 1. 1. 2000Teplota nástřikového prostoru se udržuje na 300 °C a teplota detektoru na 330 °C. Dělicí poměr se nastaví mezi 1 : 10 až 1 : 20. Teplota kolony je 200 °C a zvyšuje se rychlostí 5 °C/min do 250 °C, při nichž se udržuje 10 min.
účinné od 1. 1. 2000Nastřikuje se přímo na kolonu nebo prostřednictvím skleněné vstřikovací trubice za použití automatického nástřikového zařízení nebo jiné reprodukovatelné nastřikovací metody. Plochy píků se měří elektronickým integrátorem. Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku je rozlišení mezi píky dotriakontanu a tokoferolhydrogensukcinatu alfa nejméně 12,0.
účinné od 1. 1. 2000Zkouška na rušící látky. 0,100 g zkoušené látky se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 50,0 ml. Nastříkne se 1 μl tohoto roztoku a zaznamená se chromatogram. Jestliže je na něm zaznamenán pík se stejnou hodnotou tR jako pík dotriakontanu, vypočítá se relativní plocha tohoto píku vzhledem k ploše píku tokoferolsukcinatu alfa. Jestliže je relativní plocha píku větší než 0,5 %, použije se pro konečný výpočet korigovaná plocha píku S՛D(kor) vypočítaná podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000v němž značí:
| S՛d | - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| SI | - plochu rušícího píku (stejné hodnoty tR, jako má vnitřní standard) na chromatogramu získaném ve zkoušce na rušící látky, |
| S՛T | - plochu píku tokoferolhydrogensukcinatu alfa na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| STI | - plochu píku tokoferolhydrogensukcinatu alfa na chromatogramu získaném ve zkoušce na rušící látky. |
účinné od 1. 1. 2000Po vhodném nastavení systému se nastříkne 1 μl porovnávacího roztoku a zaznamená se chromatogram. Změří se plochy píků tokoferolhydrogensukcinatu alfa (ST) a dotriakontanu (SD) a vypočítá se odezvový faktor (RF) podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000Stejným způsobem se nastříkne 1 μl zkoušeného roztoku. Změří se plochy píků tokoferolhydrogensukcinatu alfa (S՛T) a dotriakontanu (S՛D).
účinné od 1. 1. 2000Obsah tokoferolhydrogensukcinatu alfa v procentech se vypočítá podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000v němž značí:
| SD | - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu porovnávacího roztoku, |
| SʹD(kor) | - korigovanou plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| ST | - plochu píku tokoferolhydrogensukcinatu alfa RRR CRL na chromatogramu porovnávacího roztoku, |
| SʹT | - plochu píku tokoferolhydrogensukcinatu alfa na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| mD | - hmotnost vnitřního standardu v miligramech ve zkoušeném a v porovnávacím roztoku, |
| mT | - hmotnost tokoferolhydrogensukcinatu alfa RRR CRL v miligramech v porovnávacím roztoku, |
| m | - hmotnost zkoušené látky v miligramech ve zkoušeném roztoku. |
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Separandum.
účinné od 1. 1. 2000Tocoferolum alfa
účinné od 1. 1. 2000Tokoferol alfa
účinné od 1. 1. 2000Synonyma. α-Tocopherolum, Tocoferolum
| C29H50O2 | Mr 430,71 | CAS 10191-41-0 |
účinné od 1. 1. 2000Je to (2RS)-2,5,7,8-tetramethyl-2-[(4RS,8RS)-4,8,12-trimethyltridecyl]-6-chromanol. Obsahuje 96,0% až 102,0 % sloučeniny C29H50O2.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Čirá bezbarvá nebo žlutohnědá viskózní olejovitá kapalina. Je prakticky nerozpustný ve vodě, snadno rozpustný v acetonu, v ethanolu, v etheru, v dichlormethanu a v mastných olejích.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: B, D.
účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, C a D, viz Obecné zásady (1.2).
- účinné od 1. 1. 2000A. Zkouška Absorbance, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
- účinné od 1. 1. 2000B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky je shodné se spektrem tokoferolu alfa CRL.
- účinné od 1. 1. 2000C. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití vrstvy silikagelu HF254 R.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 10 mg se rozpustí ve 2 ml cyklohexanu R.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. 10 mg tokoferolu alfa CRL se rozpustí ve 2 ml cyklohexanu R.
účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese odděleně po 10 μl obou roztoků a vyvíjí se směsí objemových dílů etheru R a cyklohexanu R (20 + 80) po dráze 15 cm. Vrstva se usuší na vzduchu a pozoruje se v ultrafialovém světle při 254 nm. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku odpovídá polohou a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku. Vrstva se postříká směsí objemových dílů kyseliny chlorovodíkové R, roztoku chloridu železitého R (2,5 g/l) v lihu 96% R a roztoku fenantroliniumchloridu R (10 g/l) v lihu 96% R (10 + 40 + 40). Po 1 h až 2 h se hlavní skvrny zbarví oranžově.
- účinné od 1. 1. 2000D. Zkouška Optická otáčivost, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Optická otáčivost (2.2.7). –0,01° až +0,01°; měří se roztok připravený rozpuštěním 2,50 g v ethanoluRa zředěním stejným rozpouštědlem na 25,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Absorbance (2.2.25). 0,100 g se rozpustí v ethanolu R a zředí se jím na 100,0 ml (roztok a). 10,0 ml roztoku (a) se zředí ethanolem R na 100,0 ml (roztok b). Měří se absorbance roztoku (b) v maximu při 292 nm a roztoku (a) v minimu při 255 nm. Specifická absorbance v maximu je 72,0 až 76,0 a v minimu je 6,0 až 8,0.
účinné od 1. 1. 2000Číslo kyselosti (2.5.1). Nejvýše 2; stanoví se s 2,00 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 0,50 g vyhovuje limitní zkoušce D na těžké kovy (20 μg/g). K přípravě porovnávacího roztoku se použije 1 ml základního roztoku olova (10 μgPb/ml).
účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky. Použije se kyselina sírová R namísto kyseliny sírové zředěné RS.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu
účinné od 1. 1. 2000Stanoví se plynovou chromatografií (2.2.28) za použití dotriakontanu R jako vnitřního standardu. Roztok vnitřního standardu. 0,20 g dotriakontanu R se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 0,100 g se rozpustí v roztoku vnitřního standardu a zředí se jím na 50,0 ml. Porovnávací roztok. 0,100 g tokoferolu alfa CRL se rozpustí v roztoku vnitřního standardu a zředí se jím na 50,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- silanizované skleněné kolony délky 2,0 m až 3,0 m a vnitřního průměru 2,2 mm až 4,0 mm naplněné křemelinou pro plynovou chromatografii R (125 μm až 150 μm nebo 150 μm až 180 μm) silanizovanou a impregnovanou 1 % až 5 % polydimethylsiloxanu R; na obou koncích kolony je zátka silanizované skleněné vaty,
- účinné od 1. 1. 2000- dusíku pro chromatografii R jako nosného plynu při průtokové rychlosti 25 ml/min až 90 ml/min,
- účinné od 1. 1. 2000- plamenoionizačního detektoru.
účinné od 1. 1. 2000Teplota kolony se udržuje konstantní v rozmezí 245 °C až 280 °C, teplota nástřikového prostoru a detektoru je v rozmezí 270 °C až 320 °C. Teplota kolony a průtoková rychlost nosného plynu se nastaví tak, aby se dosáhlo požadovaného rozlišení.
účinné od 1. 1. 2000Nastřikuje se přímo do kolony nebo prostřednictvím nástřikového prostoru (přednostně vyloženého sklem) za použití automatického nastřikovancího zařízení nebo nějaké jiné reprodukovatelné nastřikovací metody. Plochy píků se měří elektronickým integrátorem.
účinné od 1. 1. 2000Rozlišení. Nastříkne se 1 μl porovnávacího roztoku. Postup se opakuje, až odezvový faktor (RF) stanovený, jak je popsáno dále, je konstantní s odchylkou ±2 %. Rozlišení (Rs) mezi pikem dotriakontanu a tokoferolu alfa je nejméně 2,6.
účinné od 1. 1. 2000Zkouška na rušící látky. 0,100 g zkoušené látky se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 50,0 ml. Nastříkne se 1 μl a zaznamená se chromatogram. Nastaví se citlivost tak, aby výška píku tokoferolu alfa byla nejméně 50 % celé stupnice zapisovače. Během zaznamenávání se změní citlivost tak, aby pík se stejnou hodnotou tr jako dotriakontan se zaznamenal s citlivostí nejméně osmkrát větší než pík tokoferolu alfa. Jestliže se na registračním papíru šířky 250 mm zaznamená nějaký pík výšky alespoň 5 mm stejné hodnoty tR jako pík dotriakontanu, použije se pro konečný výpočet korigovaná plocha píku S՛D(kor) vypočtená podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000v němž značí:
| Sʹd | - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| SI | - plochu rušícího píku (stejné hodnoty tR, jako má vnitřní standard) na chromatogramu získaném při zkoušce na rušící látky, |
| Sʹt | - plochu píku tokoferolu alfa na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| STI | - plochu píku tokoferolu alfa na chromatogramu získaném při zkoušce na rušící látky, |
| f | - faktor vyjadřující změnu citlivosti. |
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 1 μl porovnávacího roztoku a zaznamená se chromatogram, přičemž se nastaví taková citlivost, aby pík tokoferolu alfa byl nejméně 50 % rozsahu stupnice zapisovače. Změří se plochy píků tokoferolu alfa (ST) a dotriakontanu (SD) a stanoví se odezvový faktor (RF), jak je popsáno níže. Stejným způsobem se nastříkne 1 μl zkoušeného roztoku. Změří se plochy píků tokoferolu alfa (S՛TA) a dotriakontanu (S՛DB).
účinné od 1. 1. 2000Stanoví se odezvový faktor (RF) pro tokoferol alfa na chromatogramu porovnávacího roztoku z plochy píku tokoferolu alfa a píku dotriakontanu podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000Obsah tokoferolu alfa v procentech se vypočítá podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000V nich značí:
| SD | - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu porovnávacího roztoku, |
| SʹD(kor) | - korigovanou plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| ST | - plochu píku tokoferolu alfa CRL na chromatogramu porovnávacího roztoku, |
| SʹT | - plochu píku tokoferolu alfa na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| mD | - hmotnost vnitřního standardu v miligramech ve zkoušeném roztoku a v porovnávacím roztoku, |
| mT | - hmotnost tokoferolu alfa CRL v miligramech v porovnávacím roztoku, |
| m | - hmotnost zkoušené látky v miligramech ve zkoušeném roztoku. |
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000Ve vzduchotěsných obalech pod inertním plynem, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Separandum.
účinné od 1. 1. 2000Tocoferolum alfa RRR
účinné od 1. 1. 2000Tokoferol alfa RRR
účinné od 1. 1. 2000Synonymum. RRR-a-Tocopherolum
| C29H50O2 | Mr 430,71 |
účinné od 1. 1. 2000Je to (2R-2,5,7,8-tetramethyl-2-[(4R,8R)-4,8,12-trimethyltridecyl]-6-chromanol. Obsahuje 96,0 % až 102,0 % sloučeniny C29H50O2.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Čirá bezbarvá nebo žlutohnědá viskózní olejovitá kapalina. Je prakticky nerozpustný ve vodě, snadno rozpustný v acetonu, v ethanolu, v etheru, v dichlormethanu a v mastných olejích.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: B a D.
účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, C a D, viz Obecné zásady (1.2).
- účinné od 1. 1. 2000A. Zkouška Absorbance, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
- účinné od 1. 1. 2000B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky se shoduje se spektrem tokoferolu alfa CRL.
- účinné od 1. 1. 2000C. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití vrstvy silikagelu HF254R.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 10 mg se rozpustí ve 2 ml cyklohexanu R.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. 10 mg tokoferolu alfa CRL se rozpustí ve 2 ml cyklohexanu R.
účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese odděleně po 10 μl každého roztoku a vyvíjí se směsí objemových dílů etheru R a cyklohexanu R (20 + 80) po dráze 15 cm. Vrstva se suší v proudu vzduchu a pozoruje se v ultrafialovém světle při 254 nm. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku se polohou a velikostí shoduje s hlavní skvrnou na chromatogramu porovnávacího roztoku. Vrstva se postříká směsí objemových dílů kyseliny chlorovodíkové R, roztoku chloridu železitého R (2,5 g/l) v lihu 96% R a roztoku fenanthroliniumchloridu R (10 g/l) v lihu 96% R (10 + 40 + 40). Po 1 h až 2 h se hlavní skvrny zbarví oranžově.
- účinné od 1. 1. 2000D. Tokoferol alfa RRR je pravotočivý (2.2.7). Specifická optická otáčivost po oxidaci na chinonovou formuje nejméně +24°.
účinné od 1. 1. 20001,0 g se rozpustí v 50 ml etheru R. K roztoku se přidá 20 ml roztoku hexakyanoželezitanu draselného R (100 g/l) v roztoku hydroxidu sodného R (8 g/l) a třepe se 3 min. Etherový roztok se promyje čtyřikrát 50 ml vody R. Promývací vodné vrstvy se odstraní, etherová vrstva se vysuší nad síranem sodným bezvodým R. Ether se odpaří na vodní lázni za sníženého tlaku nebo v atmosféře dusíku na zbytek několika mililitrů, potom se bez zahřátí zcela odstraní poslední stopy etheru. Zbytek se ihned rozpustí v 5,0 ml trimethylpentanu R a změří se optická otáčivost.
účinné od 1. 1. 2000Vypočítá se specifická optická otáčivost látky ve zkoušeném roztoku, přičemž c je počet gramů odpovídajících tokoferolu alfa v 1000 ml.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Absorbance (2.2.25). 0,100 g se rozpustí v ethanolu R a zředí se jím na 100 ml (roztok a). 10,0 ml roztoku (a) se zředí ethanolem R na 100,0 ml (roztok b). Měří se absorbance roztoku (b) v maximu při 292 nm a absorbance roztoku (a) v minimu při 255 nm. Specifická absorbance v maximu je 72,0 až 76,0 a v minimu 5,5 až 8,0.
účinné od 1. 1. 2000Číslo kyselosti (2.5.1). Nejvýše 2,0; stanoví se s 2,00 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 0,50 g vyhovuje limitní zkoušce D na těžké kovy (20 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 1 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml).
účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky. Použije se kyselina sírová R místo kyseliny sírové zředěné RS.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu
účinné od 1. 1. 2000Provede se plynová chromatografie (2.2.28) za použití dotriakontanu R jako vnitřního standardu.
účinné od 1. 1. 2000Roztok vnitřního standardu. 1,0 g dotriakontanu R se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 0,100 g se rozpustí v 10,0 ml roztoku vnitřního standardu, zředí se hexanem R na 50,0 ml a promíchá se.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. 0,100 g tokoferolu alfa CRL se rozpustí v 10,0 ml roztoku vnitřního standardu, zředí se hexanem R na 50,0 ml a promíchá se.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- křemenné kapilární kolony délky 15 m a vnitřního průměru 0,32 mm s vnitřními stěnami pokrytými 0,25 μm vrstvou polydimethylsiloxanu R,
- účinné od 1. 1. 2000- helia pro chromatografii R jako nosného plynu při průtokové rychlosti 3 ml/min až 6 ml/min,
- účinné od 1. 1. 2000- plamenoionizačního detektoru.
účinné od 1. 1. 2000Teplota nástřikového prostoru se udržuje na 300 °C a teplota detektoru na 330 °C. Dělicí poměr se nastaví mezi 1 : 10 až 1 : 20. Teplota kolony je 200 °C a zvyšuje se rychlostí 5 °C/min do 250 °C, při nichž se udržuje 10 min.
účinné od 1. 1. 2000Nastřikuje se přímo na kolonu nebo prostřednictvím skleněné vstřikovací trubice za použití automatického nástřikového zařízení nebo jiné reprodukovatelné nastřikovací metody. Plochy píků se měří elektronickým integrátorem. Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku je rozlišení mezi píky dotriakontanu a tokoferolu alfa nejméně 9,0.
účinné od 1. 1. 2000Zkouška na rušící látky. 0,100 g zkoušené látky se rozpustí v hexanu R a zředí se jím na 50,0 ml. Nastříkne se 1 μl tohoto roztoku a zaznamená se chromatogram. Jestliže je na něm zaznamenán pík se stejnou hodnotou tR jako dotriakontan, vypočítá se relativní plocha tohoto píku vzhledem k ploše píku tokoferolu alfa. Jestliže je relativní plocha píku větší než 0,5 %, použije se pro konečný výpočet korigovaná plocha píku S՛D(kor) vypočítaná podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000v němž značí:
| S՛D | - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| SI | - plochu rušícího píku (stejné hodnoty tr, jako má vnitřní standard) na chromatogramu získaném ve zkoušce na rušící látky, |
| S՛T | - plochu píku tokoferolu alfa na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| STI | - plochu píku tokoferolu alfa na chromatogramu získaném ve zkoušce na rušící látky. |
účinné od 1. 1. 2000Po vhodném nastavení systému se nastříkne 1 μl porovnávacího roztoku a zaznamená se chromatogram. Změří se plochy píků tokoferolu alfa (ST) a dotriakontanu (SD) a vypočítá se odezvový faktor (RF) podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000Stejným způsobem se nastříkne 1 μl zkoušeného roztoku. Změří se plochy píků tokoferolu alfa (ST) a dotriakontanu (S՛D).
účinné od 1. 1. 2000Obsah tokoferolu alfa v procentech se vypočítá podle vzorce:
účinné od 1. 1. 2000V nich značí:
| SD | - plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu porovnávacího roztoku, |
| S՛D(kor) | - korigovanou plochu píku vnitřního standardu na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| ST | - plochu píku tokoferolu alfa CRL na chromatogramu porovnávacího roztoku, |
| S՛T | - plochu píku tokoferolu alfa na chromatogramu zkoušeného roztoku, |
| mD | - hmotnost vnitřního standardu v miligramech ve zkoušeném a v porovnávacím roztoku, |
| mT | - hmotnost tokoferolu alfa CRL v miligramech v porovnávacím roztoku, |
| m | - hmotnost zkoušené látky v miligramech ve zkoušeném roztoku. |
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000Ve vzduchotěsných obalech pod inertním plynem, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Separandum.
účinné od 1. 1. 2000† Triamcinolonum
účinné od 1. 1. 2000Triamcinolon
| C21H27FO6 | Mr 394,45 | CAS 124-94-7 |
účinné od 1. 1. 2000Je to 9-fluor-11 β,16 α ,17,21-tetrahydroxy-1 4-pregnadien-3,20-dion. Počítáno na bezvodou látku, obsahuje 97,0 % až 103,0 % sloučeniny C21H27FO6.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Bílý nebo téměř bílý krystalický prášek. Je prakticky nerozpustný ve vodě, těžce rozpustný v methanolu, prakticky nerozpustný v dichlormethanu.
účinné od 1. 1. 2000Vykazuje polymorfismus.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
- účinné od 1. 1. 2000A. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky se shoduje se spektrem triamcinolonu CRL. Pokud se spektra získaná v pevném stavu liší, rozpustí se odděleně zkoušená i referenční látka v methanolu R, odpaří se do sucha, vysuší při 60 °C a tlaku nejvýše 0,7 kPa a se zbytky se zaznamenají nová spektra.
- účinné od 1. 1. 2000B. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití vhodné vrstvy silikagelu s fluorescenčním indikátorem pro detekci při 254 nm. Roztoky se připraví těsně před použitím a chrání se před světlem. Vrstva se pozoruje v ultrafialovém světle ihned po vyvíjení.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 10 mg se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 10 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 20 mg triamcinolonu CRL se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 20 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 10 mg dexamethasonu CRL se rozpustí v porovnávacím roztoku (a) a zředí se jím na 10 ml.
účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese odděleně po 5 μl každého roztoku. Vyvíjí se mobilní fází připravenou přidáním směsi objemových dílů vody R a methanolu R (1,2 + 8) ke směsi objemových dílů etheru R a dichlormethanu R (15 + 77) po dráze 15 cm. Vrstva se usuší na vzduchu a pozoruje se v ultrafialovém světle při 254 nm. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku odpovídá svou polohou a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a). Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) jsou dvě zřetelně oddělené skvrny.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Specifická optická otáčivost (2.2.7). +65° až +72°, počítáno na bezvodou látku. Měří se roztok připravený rozpuštěním 0,10 g v dimethylformamidu R a zředěním stejným rozpouštědlem na 10,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Příbuzné látky. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29). Roztoky se připraví těsně před použitím a chrání se před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 20,0 mg se rozpustí v methanolu R a zředí se jím na 20,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. 1,0 ml zkoušeného roztoku se zředí methanolem R na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,25 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem oktadecylsilanizovaným pro chromatografii R (5 μm),
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze s průtokovou rychlostí 2 ml/min, která je směsí stejných objemových dílů vody R a methanolu R,
- účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 238 nm.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl porovnávacího roztoku a nastaví se citlivost systému tak, aby výška hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku byla nejméně 50 % stupnice zapisovače. Jestliže se chromatogramy zaznamenávají za předepsaných podmínek, je retenční čas triamcinolonu asi 5 min. Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku je počet teoretických pater vypočítaných pro pík triamcinolonu nejméně 5000.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl zkoušeného roztoku. Chromatogram se zaznamenává po dobu odpovídající čtyřnásobku retenčního času hlavního píku. Na chromatogramu zkoušeného roztoku není plocha žádného píku, kromě hlavního píku, větší než dvojnásobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (2 %) a nejvýše jeden takový pík má plochu větší, než je plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (1 %). Součet ploch všech píků, kromě hlavního píku, není větší než čtyřnásobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (4 %). Nepřihlíží se k pikům, jejichž plocha je menší než 0,05násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku.
účinné od 1. 1. 2000Voda, semimikrostanovení (2.5.12). Nejvýše 1 %; stanoví se s 0,500 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu
účinné od 1. 1. 2000Roztoky se připraví těsně před použitím a chrání se před světlem.
účinné od 1. 1. 200020,0 mg se rozpustí v lihu 96% R a zředí se jím na 100,0 ml. 10,0 ml tohoto roztoku se zředí lihem 96% R na 100,0 ml, měří se absorbance (2.2.25) v maximu při 238 nm a vypočítá se obsah C21H27FO6 za použití specifické absorbance, která má hodnotu 389.
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Separandum.
účinné od 1. 1. 2000Nečistoty
- účinné od 1. 1. 2000A. triamcinolon-16,21-diacetat,
- účinné od 1. 1. 2000B. triamcinolon-21 -acetat.
účinné od 1. 1. 2000Triflusalum
účinné od 1. 1. 2000Triflusal
| C10H7F3O4 | Mr 248,16 | CAS 322-79-2 |
účinné od 1. 1. 2000Je to kyselina 2-acetoxy-4-(trifluormethyl)benzoová. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 98,5 % až 101,5 % C10H7F3O4.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Bílý nebo téměř bílý prášek. Je prakticky nerozpustný ve vodě, velmi snadno rozpustný v ethanolu, snadno rozpustný v dichlormethanu.
účinné od 1. 1. 2000Taje při asi 118 °C, za rozkladu.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: B, D.
účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, C a D, viz Obecné zásady (1.2).
- účinné od 1. 1. 2000A. 50,0 mg se rozpustí v ethanolu R a zředí se jím na 100,0 ml. 1,0 ml tohoto roztoku se zředí ethanolem R na 20,0 ml. Měří se absorbance tohoto roztoku těsně po přípravě při 220 nm až 300 nm (2.2.25). Roztok vykazuje dvě maxima, při 223 nm a 278 nm. Specifické absorbance v maximech jsou 63 až 73 a 350 až 370.
- účinné od 1. 1. 2000B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) tablety zkoušené látky se shoduje se spektrem tablety triflusalu CRL.
- účinné od 1. 1. 2000C. K 0,2 g se přidají 2,0 ml hydroxidu sodného zředěného RS. Zahřeje se k varu a vaří se 15 min. Potom se ochladí a přidá se 25,0 ml kyseliny sírové zředěné RS. Vznikne krystalická sraženina. Zfiltruje se, sraženina se promyje vodou R a suší se při 100 °C až 105 °C. Krystaly tají (2.2.14) při 176 °C až 178 °C .
- účinné od 1. 1. 2000D. Asi 5 mg se smíchá s 45 mg oxidu hořečnatého těžkého R a žíhá se v kelímku do získání bílého zbytku (obvykle méně než 5 min). Potom se ochladí, přidá se 1 ml vody R, 0,05 ml fenolftaleinu RS1 a asi 1 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS, aby roztok byl bezbarvý. Zfiltruje se a 1,0 ml filtrátu se přidá k čerstvě připravené směsi 0,1 ml alizarinu S RS a 0,1 ml dusičnanoxidu zirkoničitého RS. Promíchá se, nechá se stát 5 min a porovná se barva roztoku s kontrolním roztokem získaným při slepé zkoušce připravené stejným způsobem; roztok je žlutý a kontrolní roztok je červený.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. 1,0 g se rozpustí v lihu 96% R a zředí se jím na 20 ml. Tento roztok je čirý (2.2.1) a není zbarven intenzivněji než porovnávací barevný roztok H7 (2.2.2, Metoda II).
účinné od 1. 1. 2000Kyselina 2-acetoxytereftalová. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 0,10 g se rozpustí v mobilní fázi a zředí se jí na 25,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. 40,0 mg triflusalu nečistoty A CRL se rozpustí v mobilní fázi a zředí se jí na 100,0 ml. 1,0 ml tohoto roztoku se zředí mobilní fází na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,25 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem aminopropylsilanizovaným pro chromatografii R (5 μm),
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze, která je směsí objemových dílů tlumivého roztoku fosforečnanového o pH 4,5 (0,05 mol/l) a acetonitrilu R (25 + 75), s průtokovou rychlostí 1,2 ml/min,
- účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 250 nm.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl zkoušeného roztoku a 20 μl porovnávacího roztoku. Na chromatogramu zaznamenaném za předepsaných podmínek je retenční čas triflusalu asi 2,4 min a retenční čas kyseliny 2-acetoxytereftalové (triflusalu nečistoty A) vzhledem k triflusalu je asi 5. Chromatogram se zaznamenává 20 min. Na chromatogramu zkoušeného roztoku plocha píku kyseliny 2-acetoxytereftalové není větší než plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (0,1 %).
účinné od 1. 1. 2000Kyselina 4-(trifluormethyI)salicylová. 0,10 g se rozpustí v 15 ml lihu 96% R, přidá se 15 ml studené vody R a 0,5 ml roztoku síranu železito-amonného R (5 g/l). Nechá se stát 1 min. Roztok není zbarven intenzivněji (2.2.2, Metoda II) než porovnávací roztok připravený takto: 10,0 mg triflusal nečistoty B CRL se rozpustí ve 100 ml lihu 96% R. Ke 3 ml tohoto roztoku se přidá 0,1 ml kyseliny octové ledové R, 0,5 ml roztoku síranu železito-amonného R (5 g/l), 12 ml lihu 96% R a 15 ml vody R (0,3 %).
účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 1,50 g se rozpustí v 9 ml lihu 96% R a zředí se vodou R na 15 ml. 12 ml tohoto roztoku vyhovuje limitní zkoušce B na těžké kovy (10 μg/g). K přípravě porovnávacího roztoku se použije roztok olova (1 μgPb/ml) získaný zředěním základního roztoku olova (100 μg Pb/ml) směsí objemových dílů vody R a lihu 96% R(6 + 9).
účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 0,5 %, 1,00 g se suší v exsikátoru nad oxidem fosforečným R ve vakuu.
účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky v platinovém kelímku.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu
účinné od 1. 1. 20000,200 g se rozpustí v 50,0 ml ethanolu R a titruje se hydroxidem sodným 0,1 mol/l VS za potenciometrické indikace bodu ekvivalence) (2.2.20).
účinné od 1. 1. 20001 ml hydroxidu sodného 0,1 mol/l VS odpovídá 24,82 mg C10H7F3O4.
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000Ve vzduchotěsných obalech, při teplotě nepřevyšující 25 °C.
účinné od 1. 1. 2000Separandum.
účinné od 1. 1. 2000Nečistoty
- účinné od 1. 1. 2000A. kyselina 2-acetoxy-1,4-benzendikarboxylová (kyselina 2-acetoxytereftalová),
- účinné od 1. 1. 2000B. kyselina 2-hydroxy-4-(trifluormethyl)benzoová (kyselina 4-(trifluormethyl)salicylová).
účinné od 1. 1. 2000Trimethoprimum1)
účinné od 1. 1. 2000Trimethoprim
| C14H18N4O3 | Mt 290,32 | CAS 738-70-5 |
účinné od 1. 1. 2000Je to 5-(3,4,5-trimethoxybenzyl)pyrimidin-2,4-diamin. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 98,5 % až 101,0 % sloučeniny C14H18N4O3.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Bílý nebo nažloutlý prášek. Je velmi těžce rozpustný ve vodě, těžce rozpustný v lihu 96%.
účinné od 1. 1. 2000Vykazuje polymorfismus.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: A a C.
účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, B a D, viz Obecné zásady (1.2).
- účinné od 1. 1. 2000A. Teplota tání (2.2.14). 199 °C až 203 °C.
- účinné od 1. 1. 2000B. Asi 20 mg se rozpustí v hydroxidu sodném 0,1 mol/l RS a zředí se jím na 100,0 ml. 1,0 ml tohoto roztoku se zředí hydroxidem sodným 0,1 mol/l RS na 10,0 ml. Měří se absorbance roztoku (2.2.25) při 230 nm až 350 nm; roztok vykazuje absorpční maximum při 287 nm. Specifická absorbance v maximu je 240 až 250.
- účinné od 1. 1. 2000C. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky se shoduje se spektrem trimethoprimu CRL.
- účinné od 1. 1. 2000D. Asi 25 mg se zahřátím rozpustí v 5 ml kyseliny sírové 0,005 mol/l RS, přidají se 2 ml roztoku manganistanu draselného R (16 g/l) v hydroxidu sodném 0,1 mol/l RS a zahřeje se k varu. K horkému roztoku se přidá 0,4 ml formaldehydu R, zamíchá se a přidá se 1 ml kyseliny sírové 0,5 mol/l RS, znovu se zamíchá a zahřeje k varu, pak se ochladí a zfiltruje. K filtrátu se přidají 2 ml dichlormethanu R a intenzivně se protřepe. Organická vrstva při pozorování v ultrafialovém světle při 365 nm vykazuje zelenou fluorescenci.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. 0,5 g se rozpustí v 10 ml směsi objemových dílů vody R, methanolu R a dichlormethanu R (1+4,5+ 5). Roztok není zbarven intenzivněji než porovnávací barevný roztok HŽ7 (2.2.2, Metoda II).
účinné od 1. 1. 2000Příbuzné látky.
- účinné od 1. 1. 2000A. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 25,0 mg se rozpustí v mobilní fázi a zředí se jí na 25,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 1,0 ml zkoušeného roztoku se zředí mobilní fází na 200,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 5,0 mg trimethoprimu CRL a 2,5 mg trimethoprimu nečistoty E CRL se rozpustí v mobilní fázi a zředí se jí na 100,0 ml. 1,0 ml tohoto roztoku se zředí mobilní fází na 10,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,250 m a vnitřního průměru 4,0 mm naplněné silikagelem oktadecylsilanizovaným deaktivovaným pro chromatografii bazických látek R (5 jam),
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze, kterou je směs objemových dílů methanolu R a roztoku chloristanu sodného R (1,4 g/l), jehož pH bylo upraveno kyselinou fosforečnou R na hodnotu 3,6 (30 + 70); průtoková rychlost je 1,3 ml/min,
- účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 280 nm.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl porovnávacího roztoku (a). Citlivost systému se nastaví tak, aby výška hlavního píku na získaném chromatogramu byla nejméně 50 % celé stupnice zapisovače.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se odděleně 20 μl zkoušeného roztoku a 20 μl porovnávacího roztoku (b). Chromatogram se zaznamenává po dobu odpovídající 11násobku retenčního času trimethoprimu. Při zaznamenání chromatogramů za předepsaných podmínek relativní retenční časy látek jsou:
| Látka | Přibližný relativní retenční čas | Korekční faktor |
|---|---|---|
| Trimethoprim | 1,0 (Rt = 5,2 min) | 1 |
| Nečistota A | 1,5 | - |
| Nečistota B | 2,3 | 0,43 |
| Nečistota C | 0,8 | - |
| Nečistota D | 2,0 | - |
| Nečistota E | 0,9 | 0,53 |
| Nečistota F | 4,0 | - |
| Nečistota G | 2,1 | - |
| Nečistota J | 2,7 | 0,66 |
účinné od 1. 1. 2000Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) je rozlišení mezi dvěma píky nejméně 2,5. Na chromatogramu zkoušeného roztoku: plocha žádného píku, kromě hlavního píku, není větší než 0,2násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a) (0,1 %) s použitím korekčních faktorů uvedených v tabulce pro nečistoty B, E a J; součet ploch všech píku, kromě hlavního píku, není větší než 0,4násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a) (0,2 %) s použitím korekčních faktorů uvedených v tabulce pro nečistoty B, E a J. Nepřihlíží se k pikům s plochou menší než 0,04násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a) a k píku odpovídajícímu nečistotě H (relativní retenční čas asi 10,3).
- účinné od 1. 1. 2000B. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 25,0 mg se rozpustí v mobilní fázi a zředí se jí na 25,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 1,0 ml zkoušeného roztoku se zředí mobilní fází na 200,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 5,0 mg trimethoprimu CRL a 5,0 mg trimethoprimu nečistoty B CRL se rozpustí v mobilní fázi a zředí se jí na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,25 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem kyanopropylsilanizovaným pro chromatografii R (5 μm) se specifickým povrchem 350m2/g a velikostí pórů 10 nm,
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze, kterou je směs připravená takto: 1,14 g hexansulfonanu sodného R se rozpustí v 600 ml roztoku dihydrogenfosforečnanu draselného R (13,6 g/l), upraví se pH kyselinou fosforečnou R na hodnotu 3,1 a tento roztok se smíchá se 400 objemovými díly methanolu R; průtoková rychlost je 0,8 ml/min,
- účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 280 nm.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl porovnávacího roztoku (a). Citlivost systému se nastaví tak, aby výška hlavního píku na získaném chromatogramu byla nejméně 50 % celé stupnice zapisovače.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se odděleně 20 μl zkoušeného roztoku a 20 μl porovnávacího roztoku (b). Chromatogram se zaznamenává po dobu odpovídající 6násobku retenčního času trimethoprimu. Při zaznamenání chromatogramů za předepsaných podmínek relativní retenční časy látek jsou:
| Látka | Přibližný relativní retenční čas | Odezvový faktor |
|---|---|---|
| Trimethoprim | 1,0 (Rt = 4,3 min) | i |
| Nečistota B | 1,3 | - |
| Nečistota H | 1,8 | 0,50 |
| Nečistota I | 4,9 | 0,28 |
účinné od 1. 1. 2000Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) je rozlišení mezi dvěma píky nejméně 2,0. Na chromatogramu zkoušeného roztoku: plocha žádného píku, kromě hlavního píku, není větší než 0,2násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a) (0,1 %), za použití korekčních faktorů uvedených v tabulce pro nečistoty Hal; součet ploch všech píků, kromě hlavního píku, není větší než 0,4násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a) (0,2 %), za použití odezvových faktorů uvedených v tabulce pro nečistoty Hal. Nepřihlíží se k pikům s plochou menší než 0,04násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a).
účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 1,0 g vyhovuje limitní zkoušce C na těžké kovy (20 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 2 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml).
účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 1,0 %; 1,000 g se suší v sušárně při 100 °C až 105 °C.
účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu
účinné od 1. 1. 20000,250 g se rozpustí v 50 ml kyseliny octové bezvodé R a titruje se kyselinou chloristou 0,1 mol/l VS za potenciometrické indikace bodu ekvivalence (2.2.20).
účinné od 1. 1. 20001 ml kyseliny chloristé 0,1 mol/l VS odpovídá 29,03 mg C14H18N4O3.
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000Separandum.
účinné od 1. 1. 2000Nečistoty
účinné od 1. 1. 2000U kapalinové chromatografie A:
- účinné od 1. 1. 2000A. N2-methyl-5-(3,4,5-trimethoxybenzyl)pyrimidin-2,4-diamin,
- účinné od 1. 1. 2000B. (2,4-diaminopyrimidin-5-yl)-3,4,5-trimethoxyfenylketon,
- účinné od 1. 1. 2000C. (RS)-(2,4-diaminopyrimidin-5-yl)(3,4,5-trimethoxyfenyl)methanol,
- účinné od 1. 1. 2000D. 2-amino-5-(3,4,5-trimethoxybenzyl)pyrimidin-4-ol,
- účinné od 1. 1. 2000E. 4-amino-5-(3,4,5-trimetoxybenzyl)pyrimidin-2-ol,
- účinné od 1. 1. 2000F. 5-(3-brom-4,5-dimethoxybenzyl)pyridin-2,4-diamin,
- účinné od 1. 1. 2000G. 5-(4-ethoxy-3,5-dimethoxybenzyl)pyrimidin-2,4-diamin,
- účinné od 1. 1. 2000J. kyselina 3,4,5-trimethoxybenzoová.
účinné od 1. 1. 2000U kapalinové chromatografíe B:
- účinné od 1. 1. 2000H. methyl-3,4,5-trimethoxybenzoat (detekce také u kapalinové chromatografie A),
- účinné od 1. 1. 2000I. 3-fenylamino-2-(3,4,5-trimethoxybenzyl)prop-2-ennitril.
účinné od 1. 1. 2000Tritici oleum raffinatum
účinné od 1. 1. 2000Čištěný pšeničný olej
účinné od 1. 1. 2000Synonymum. Tritici aestivi oleum raffinatum
účinné od 1. 1. 2000Je to mastný olej získaný z klíčků semen druhu Triticum aestivum L. lisováním za studená nebo jinými vhodnými mechanickými způsoby. Potom je přečištěn a může být přidána vhodná antioxidační přísada.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Čirá nažloutlá kapalina. Je prakticky nerozpustný ve vodě a v lihu 96%, mísitelný s etherem petrolejovým (40 °C až 60 °C).
účinné od 1. 1. 2000Relativní hustota je asi 0,925 a index lomu je asi 1,475.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
- účinné od 1. 1. 2000A. Provede se zkouška Totožnost mastných olejů tenko vrstvou chromatografií (2.3.2). Chromatogram zkoušené látky odpovídá charakteristickému chromatogramu pšeničného oleje.
- účinné od 1. 1. 2000B. Zkouška Podíl mastných kyselin, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Číslo kyselosti (2.5.1). Nejvýše 0,5; stanoví se s 10,0 g zkoušené látky. Pokud je látka určena k výrobě parenterálních lékových forem, je číslo kyselosti nejvýše 0,3.
účinné od 1. 1. 2000Číslo peroxidové (2.5.5). Nejvýše 10,0. Pokud je látka určena k výrobě parenterálních lékových forem, je číslo peroxidové nejvýše 5,0.
účinné od 1. 1. 2000Nezmýdelnitelné látky (2.5.7). Nejvýše 5,0 %; stanoví se s 5,0 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Zásaditě reagující látky (2.4.19). Vyhovuje zkoušce Zásaditě reagující látky v mastných olejích.
účinné od 1. 1. 2000Podíl mastných kyselin. Provede se zkouška Cizí oleje v mastných olejích plynovou chromatografií (2.4.22). Podíl mastných kyselin oleje má následující složení:
| kyselina palmitová | 14,0 % až 19,0 %, |
| kyselina stearová | nejvýše 2,0 %, |
| kyselina olejová | 12,0 % až 23,0 %, |
| kyselina linolová | 52,0 % až 59,0 %, |
| kyselina linolenová | 3,0 % až 10,0 %, |
| kyselina eikosenová | nejvýše 2,0 %. |
účinné od 1. 1. 2000Brassikasterol (2.4.23). Nejvýše 0,3 % brassikasterolu ve sterolovém podílu zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Voda, mikrostanovení (2.5.32). Pokud je látka určena k výrobě parenterálních lékových forem, obsahuje nejvýše 0,1% vody; stanoví se s 5,00 g zkoušené látky. Použije se směs stejných objemových dílů methanolu R a dichlormethanu R jako rozpouštědlo.
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000Ve zcela naplněných vzduchotěsných obalech, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Označování
účinné od 1. 1. 2000V označení na obalu se uvede:
- účinné od 1. 1. 2000- zda je látka vhodná k výrobě parenterálních lékových forem,
- účinné od 1. 1. 2000- název a množství případně přidaného antioxidantu.
účinné od 1. 1. 2000Tryptophanum1)
účinné od 1. 1. 2000Tryptofan
účinné od 1. 1. 2000Synonymum. L-Tryptophanum
| C11H12N2O2 | Mr 204,23 | CAS 73-22-3 |
účinné od 1. 1. 2000Je to kyselina (S)-2-amino-3-(1H-indol-3-yl)propanová. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 98,5 % až 101,0 % sloučeniny C11H12N2O2.
účinné od 1. 1. 2000Výroba
účinné od 1. 1. 2000Je-li vyráběn fermentací, vyhovuje požadavkům článku Producta fermentationis.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Bílý nebo téměř bílý krystalický nebo amorfní prášek. Je mírně rozpustný ve vodě, těžce rozpustný v lihu 96%, prakticky nerozpustný v etheru. Rozpouští se ve zředěných roztocích alkalických hydroxidů a minerálních kyselin.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: A a B.
účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, C a D, viz Obecné zásady (1.2).
- účinné od 1. 1. 2000A. Zkouška Specifická optická otáčivost, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
- účinné od 1. 1. 2000B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) tablety zkoušené látky se shoduje se spektrem tablety tryptofanu CRL.
- účinné od 1. 1. 2000C. Hodnotí se chromatogramy získané ve zkoušce Látky reagující s ninhydrinem, viz Zkoušky na čistotu. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (b) odpovídá polohou, zbarvením a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a).
- účinné od 1. 1. 2000D. Asi 20 mg se rozpustí v 10 ml vody R, přidá se 5 ml dimethylaminobenzaldehydu RS6 a 2 ml kyseliny chlorovodíkové RS a zahřeje se na vodní lázni; vzniká nachově modré zbarvení.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. 0,1 g se rozpustí v kyselině chlorovodíkové 1 mol/l RS a zředí se jí na 10 ml. Roztok je čirý (2.2.1) a není zbarven intenzivněji než porovnávací barevný roztok HŽ6 (2.2.2, Metoda II).
účinné od 1. 1. 2000Specifická optická otáčivost (2.2.7). -30,0° až -33,0°, počítáno na vysušenou látku. Měří se následující roztok: 0,25 g se rozpustí, je-li třeba zahřátím na vodní lázni, ve vodě R a zředí se jí na 25,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Látky reagující s ninhydrinem. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití desky s vrstvou silikagelu pro TLC R.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). 0,10 g se rozpustí ve směsi stejných objemových dílů kyseliny octové ledově R a vody R a zředí se stejnou směsí na 10 ml.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (b). 1 ml zkoušeného roztoku (a) se zředí směsí stejných objemových dílů kyseliny octové ledové R a vody R na 50 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 10 mg tryptofanu CRL se rozpustí ve směsi stejných objemových dílů kyseliny octové ledové R a vody R a zředí se stejnou směsí na 50 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 5 ml zkoušeného roztoku (b) se zředí směsí stejných objemových dílů kyseliny octové ledové R a vody R na 20 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (c). 10 mg tryptofanu CRL a 10 mg tyrosinu CRL se rozpustí ve směsi stejných objemových dílů kyseliny octové ledové R a vody R a zředí se stejnou směsí na 25 ml.
účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se odděleně nanese po 5 μl každého roztoku a vyvíjí se směsí objemových dílů kyseliny octové ledové R, vody R a 1-butanolu R (20 + 20 + 60) po dráze 15 cm. Vrstva se usuší na vzduchu, postříká se ninhydrinem RS a zahřívá se 15 min při 100 °C až 105 °C. Žádná skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (a), kromě hlavní skvrny, není intenzivnější než skvrna na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,5 %). Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku (c) jsou dvě zřetelně oddělené skvrny.
účinné od 1. 1. 20001,1ʹ-Ethylidenbistryptofan a jiné příbuzné látky. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).
účinné od 1. 1. 2000Tlumivý roztok o pH 2,3. 3,90 g dihydrogenfosforečnanu sodného R se rozpustí v 1000 ml vody R, přidá se asi 700 ml roztoku kyseliny fosforečné R (2,9 g/l) a stejnou kyselinou se upraví pH na hodnotu 2,3.
účinné od 1. 1. 2000Roztoky se připraví těsně před použitím.
účinné od 1. 1. 2000Standardní roztok. 10,0 mg N-acetyltryptofanu R se rozpustí ve směsi objemových dílů acetonitrilu R a vody R (10 + 90) a zředí se stejnou směsí na 100,0 ml. 2,0 ml tohoto roztoku se zředí stejnou směsí na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). 0,10 g se rozpustí ve směsi objemových dílů acetonitrilu R a vody R (10 + 90) a zředí se stejnou směsí na 10,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (b). 0,10 g se rozpustí ve standardním roztoku a zředí se jím na 10,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 1,0 mg 1,1'-ethylidenbistryptofanu R se rozpustí ve směsi objemových dílů acetonitrilu R a vody R (10 + 90) a zředí se stejnou směsí na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 10,0 ml porovnávacího roztoku (a) se zředí standardním roztokem na 50,0 ml. Porovnávací roztok (c). 10,0 ml porovnávacího roztoku (a) se zředí směsí objemových dílů acetonitrilu R a vody R (10 + 90) na 50,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (d). 0,10 g zkoušené látky se rozpustí v porovnávacím roztoku (c) a zředí se jím na 10,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (e). 1,0 ml porovnávacího roztoku (c) se zředí směsí objemových dílů acetonitrilu Rdi vody R (10 + 90) na 10,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,25 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem oktadecylsilanizovaným pro chromatografli R (5 μm),
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze s průtokovou rychlostí 0,7 ml/min:
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze A - směs objemových dílů acetonitrilu R a tlumivého roztoku o pH 2,3 (115 + 885),
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze B - směs objemových dílů acetonitrilu R a tlumivého roztoku o pH 2,3 (350 + 650),
- účinné od 1. 1. 2000- gradientového programu za použití následujících podmínek:
| Čas (min) | Mobilní fáze A % (V/V) | Mobilní fáze B % (V/V) | Poznámky |
|---|---|---|---|
| 0 - 10 | 100 | 0 | izokraticky |
| 10 - 45 | 100 → 0 | 0 → 100 | lineární gradient |
| 45 - 65 | 0 | 100 | izokraticky |
| 65 - 66 | 0 → 100 | 100 → 0 | lineární gradient |
| 66 - 80 | 100 | 0 | ustalování |
- účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 220 nm.
účinné od 1. 1. 2000Teplota kolony se udržuje na 40 °C.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl porovnávacího roztoku (b), 20 μl porovnávacího roztoku (d) a 20 μl porovnávacího roztoku (e). Jsou-li chromatogramy zaznamenány za předepsaných podmínek, retenční časy látek jsou: tryptofan asi 8 min, N-acetyltryptofan asi 29 min a 1,1ˈ-ethylidenbistryptofan asi 34 min. Nastaví se citlivost systému tak, aby výška píku N-acetyltryptofanu na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) byla nejméně 50 % celé stupnice zapisovače.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) rozlišení mezi píky N-acetyltryptofanu a 1,1ˈ-ethylidenbistryptofanu je nejméně 8,0. Je-li třeba, upraví se gradientevý program. Zvýšením mobilní fáze A v průběhu eluce se prodlouží retenční časy a zlepší se rozlišení; na chromatogramu porovnávacího roztoku (e) je signál píku k šumu nejméně 15.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl zkoušeného roztoku (a) a 20 μl zkoušeného roztoku (b). Zjistí se, není-li na chromatogramu zkoušeného roztoku (a) pík se stejným retenčním časem, jako má pík N-acetyltryptofanu (v takovém případě se provede korekce píku N-acetyltryptofanu). Na chromatogramu zkoušeného roztoku (b) plocha píku odpovídajícího 1,1ˈ-ethylidenbistryptofanu není větší než 0,5násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (e) (10 μg/g). Součet ploch všech píků s retenčním časem menším, než má tryptofan, není větší než 0,5násobek plochy píku odpovídajícího N-acetyltryptofanu na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (100 μg/g).
účinné od 1. 1. 2000Součet ploch všech píků s retenčním časem větším, než má tryptofan, kromě píku N-acetyltryptofanu a píku do 1,8násobku retenčního času N-acetyltryptofanu, není větší než 1,5násobek plochy píku odpovídajícího N-acetyltryptofanu na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (300 μg/g). Nepřihlíží se k pikům s plochou menší než 0,02násobek plochy píku odpovídajícího N-acetyltryptofanu na chromatogramu porovnávacího roztoku (b).
účinné od 1. 1. 2000Chloridy (2.4.4). 0,25 g se rozpustí ve 3 ml kyseliny dusičné zředěné RS a zředí se vodou R na 15 ml. Tento roztok vyhovuje limitní zkoušce na chloridy (200 μg/g), bez dalšího přidání kyseliny dusičné.
účinné od 1. 1. 2000Sírany (2.4.13). 0,5 g se rozpustí ve směsi objemových dílů kyseliny chlorovodíkové zředěné RS a vody destilované R (5 + 25) a zředí se stejnou směsí na 15 ml. Tento roztok vyhovuje limitní zkoušce na sírany (300 μg/g).
účinné od 1. 1. 2000Amonium (2.4.1). 0,10 g vyhovuje limitní zkoušce B na amonium (200 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 0,2 ml základního roztoku amonia (100 μg NH/ml).
účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 2,0 g vyhovují limitní zkoušce D na těžké kovy (10 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 2 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml).
účinné od 1. 1. 2000Železo (2.4.9). 0,50 g se rozpustí v dělicí nálevce v 10 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS a vytřepává se třikrát 3 min vždy s 10 ml isobutylmethylketonu R1. Ke spojeným organickým vrstvám se přidá 10 ml vody R a třepe se 3 min. Vodná vrstva vyhovuje limitní zkoušce na železo (20 μg/g).
účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 0,5 %; 1,000 g se suší v sušárně při 100 °C až 105 °C.
účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu
účinné od 1. 1. 20000,150 g se rozpustí ve 3 ml kyseliny mravenčí bezvodé R, přidá se 30 ml kyseliny octové bezvodé R a 0,1 ml naftolbenzeinu RS a titruje se kyselinou chloristou 0,1 mol/l VS.
účinné od 1. 1. 20001 ml kyseliny chloristé 0,1 mol/l VS odpovídá 20,42 mg C11H12N2O2.
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Nečistoty
- účinné od 1. 1. 2000A. kyselina 3,3՛-[ethylidenbis(1H-indol-1,3-diyl)]bis[(2S)-2-aminopropanová] (1,1՛-ethylidenbistryptofan),
- účinné od 1. 1. 2000B. kyselina (S)-2-amino-3-[(3RS-3-hydroxy-2-oxo-2,3-dihydro-1H-indol-3-yl]propanová (dioxyindolylalanin),
- účinné od 1. 1. 2000C. kyselina (S)-2-amino-4-(2-aminofenyl)-4-oxobutanová (kynurenin),
- účinné od 1. 1. 2000D. kyselina (S)-2-amino-3-(5-hydroxy-1H-indol-3-yl)propanová (5-hydroxytryptofan),
- účinné od 1. 1. 2000E. kyselina (S)-2-amino-4-[2-(formylamino)fenyl]-4-oxobutanová (N-formylkynurenin),
- účinné od 1. 1. 2000F. kyselina (S)-2-amino-3-(fenylamino)propanová (3-fenylaminoalanin),
- účinné od 1. 1. 2000G. kyselina (S)-2-amino-3-(2-hydroxy-1H-indol-3-yl)propanová (2-hydroxytryptofan),
- účinné od 1. 1. 2000H. kyselina (3RS)-1,2,3,4-tetrahydro-9H-β-karbolin-3-karboxylová,
- účinné od 1. 1. 2000I. kyselina 1-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-9H-β-karbolin-3-karboxylová,
- účinné od 1. 1. 2000J. kyselina (S)-2-amino-3-{2-[2,3-dihydroxy-1-(1H-indol-3-yl)propyl]-1H-indol-3-yl}propanová,
- účinné od 1. 1. 2000K. kyselina (S)-2-amino-3-[2-(1H-indol-3-ylmethyl)-1H-indol-3-yl]propanová,
- účinné od 1. 1. 2000L. kyselina 1-(1H-indol-3-ylmethyl)-1,2,3,4-tetrahydro-9H-β-karbolin-3-karboxylová.
účinné od 1. 1. 2000†Tylosini tartras ad usum veterinarium
účinné od 1. 1. 2000Tylosiniumtartarat pro veterinární použití
účinné od 1. 1. 2000CAS 1401-69-0
účinné od 1. 1. 2000Je to směs vínanů makrolidových antibiotik produkovaných organismem Streptomyces fradiae nebo získaná jiným způsobem. Hlavní složkou směsi je tylosinium A tartarat (Mr 1982,29), tj. bis {(11E, 13E)-(4R,5S,6S,7R,9R, 15R, 16R)-15-[[(6-deoxy-2,3-di-O-methyl-β-D-allopyranosyl)oxy]-methyl]-6-[[3,6-dideoxy-4-O-(2,6-dideoxy-3-C-methyl-a-L-ribo-hexapyranosyl)-3-(dimethylamonio)-β-D-glukopyranosyl]oxy]-16-ethyl-4-hydroxy-5,9,13-trimethyl-7-(2-oxoethyl)-11,13-oxacyklohexadekadien-2,10-dion}tartarat. TylosinB (demykosini-umtartarat, Mr 1693,97), tylosin C (makrociniumtartarat, Mr 1954,25) a tylosin D (relomycini-umtartarat, Mr 1986,33) mohou být také přítomny a přispívají k účinnosti zkoušené látky. Účinnost je nejméně 800 m.j. v miligramu, počítáno na vysušenou látku.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Téměř bílý nebo slabě žlutý hygroskopický prášek. Je snadno rozpustný ve vodě a v dich- lormethanu, těžce rozpustný v ethanolu. Rozpouští se ve zředěných roztocích minerálních kyselin.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
- účinné od 1. 1. 2000A. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) se shoduje s referenčním spektrem Ph. Eur. tylosiniumtartaratu.
- účinné od 1. 1. 2000B. Hodnotí se chromatogramy získané ve zkoušce Složení, viz Zkoušky na čistotu. Retenční čas a velikost hlavního píku na chromatogramu zkoušeného roztoku se shodují s retenčním časem a velikostí hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a).
- účinné od 1. 1. 2000C. 30 mg se rozpustí ve směsi 0,15 ml vody R, 2,5 ml acetanhydridu R a 7,5 ml pyridinu R a nechá se stát asi 10 min; vznikne zelené zbarvení.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Hodnota pH (2.2.3). 5,0 až 7,2; měří se roztok připravený rozpuštěním 0,25 g v 10 ml vody prosté oxidu uhličitého R.
účinné od 1. 1. 2000Složení. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29). Roztoky se připraví těsně před použitím. Obsah tylosinu A je nejméně 80,0% a součet obsahů tylosinu A, tylosinu B, tylosinu C a tylosinu D je nejméně 95,0 %.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 20,0 mg se rozpustí ve směsi stejných objemových dílů acetonitrilu R a vody R a zředí se touto směsí rozpouštědel na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 20,0 mg tylosinu CRL se rozpustí ve směsi stejných objemových dílů acetonitrilu R a vody R a zředí se touto směsí rozpouštědel na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 2 mg tylosinu CRL a 2 mg tylosinu D CRL se rozpustí ve směsi stejných objemových dílů acetonitrilu R a vody R a zředí se touto směsí rozpouštědel na 10 ml.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony 0,20 m dlouhé a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem oktadecylsilanizovaným pro chromatografii R (5 μm),
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze, kterou je směs objemových dílů acetonitrilu R a roztoku chloristanu sodného R (200 g/l), jehož pH bylo předem upraveno kyselinou chlorovodíkovou 1 mol/l RS na hodnotu 2,5 (40 + 60); průtoková rychlost je 1,0 ml/min,
- účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 290 nm.
účinné od 1. 1. 2000Teplota kolony se udržuje na 35 °C.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl porovnávacího roztoku (b). Jestliže se chromatogramy zaznamenávají za předepsaných podmínek, je retenční čas tylosinu A asi 12 min. Zkoušku lze hodnotit, jestliže na získaném chromatogramu je rozlišení mezi píky tylosinu A a tylosinu D nejméně 2,0. Nastříkne se 20 μl zkoušeného roztoku a 20 μl porovnávacího roztoku (a). Obsah složek v procentech se vypočítá z ploch píků na chromatogramu zkoušeného roztoku obvyklým postupem (metoda normalizace).
účinné od 1. 1. 2000Tyramin. Nejvýše 0,35 %. 50,0 mg se rozpustí ve 25,0ml odměrné baňce v 5,0 ml roztoku kyseliny fosforečné R (3,4 g/l). Přidá se 1,0 ml pyridinu R a 2,0 ml nasyceného roztoku ninhydrinu R (asi 40 g/l). Baňka se uzavře kouskem hliníkové fólie a zahřívá se 30 min na vodní lázni při 85 °C. Roztok se rychle ochladí a zředí vodou R na 25,0 ml. Promíchá se a ihned se měří absorbance (2.2.25) roztoku při 570 nm proti kontrolnímu roztoku. Absorbance není větší než absorbance porovnávacího roztoku připraveného současně stejným způsobem za použití 5,0 ml roztoku tyr aminu R (35 mg/l) v roztoku kyseliny fosforečné R (3,4 g/l).
účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 4,5 %; 1,000 g se 3 h suší při 60 °C při tlaku nepřevyšujícím 0,7 kPa.
účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 2,5 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení účinnosti
účinné od 1. 1. 2000Provede se mikrobiologické stanovení účinnosti antibiotik (2.7.2) za použití tylosinu CRL.
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000Ve vzduchotěsných obalech, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Separandum.
účinné od 1. 1. 2000Nečistoty
- účinné od 1. 1. 2000A. demycinosyltylosin,
- účinné od 1. 1. 2000B. aldol tylosinu A.
účinné od 1. 1. 2000†Tylosinum ad usum veterinarium
účinné od 1. 1. 2000Tylosin pro veterinární použití
| CAS 1401-69-0 |
účinné od 1. 1. 2000Je to směs makrolidových antibiotik produkovaných organismem Streptomyces fradiae nebo získaná jiným způsobem. Hlavní složkou směsi je tylosin A (Mr 916,10), tj. (11E,13E)-(4R,5S,6S,7R?,9R,15R,16R)-15-[[(6-deoxy-2,3-di-O-methyl-β-D-allopyranosyl)oxy]methyl]-6-[[3,6-dideoxy-4-O-(2,6-dideoxy-3-C-methyl-α-L-ribo-hexopyranosyl)-3-dimethylamino-β-D-glukopyranosyl]oxy]-16-ethy 1-4-hydroxy-5,9,13-trimethyl-7-(2-oxoethyl)-11,13-oxacyklohexadekadien-2,10-dion. Tylosin B (demykosin, Mr 771,94), tylosin C (makrocin, Mr 902,08) a tylosin D (relomycin, Mr 918,12) mohou být také přítomny a přispívají k účinnosti zkoušené látky. Účinnost je nejméně 900 m.j. v miligramu, počítáno na vysušenou látku.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Téměř bílý nebo slabě žlutý prášek. Je těžce rozpustný ve vodě, snadno rozpustný v ethanolu a v dichlormethanu. Rozpouští se ve zředěných roztocích minerálních kyselin.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
- účinné od 1. 1. 2000A. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) se shoduje se spektrem tylosinu CRL.
- účinné od 1. 1. 2000B. Hodnotí se chromatogramy získané ve zkoušce Složení, viz Zkoušky na čistotu. Retenční čas a velikost hlavního píku na chromatogramu zkoušeného roztoku se shodují s retenčním časem a velikostí hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a).
- účinné od 1. 1. 2000C. 30 mg se rozpustí ve směsi 0,15 ml vody R, 2,5 ml acetanhydridu R a 7,5 ml pyridinu R a nechá se stát asi 10 min; nevznikne zelené zbarvení.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Hodnota pH (2.2.3). 8,5 až 10,5; měří se suspenze 0,25 g v 10 ml vody prosté oxidu uhličitého R.
účinné od 1. 1. 2000Složení. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29). Roztoky se připraví těsně před použitím. Obsah tylosinu A je nejméně 80,0% a součet obsahů tylosinu A, tylosinuB, tylosinu C a tylosinu D je nejméně 95,0 %.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 20,0 mg se rozpustí ve směsi stejných objemových dílů acetonitrilu R a vody R a zředí se touto směsí rozpouštědel na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 20,0 mg tylosinu CRL se rozpustí ve směsi stejných objemových dílů acetonitrilu R a vody R a zředí se touto směsí rozpouštědel na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 2 mg tylosinu CRL a 2 mg tylosinu D CRL se rozpustí ve směsi stejných objemových dílů acetonitrilu R a vody R a zředí se touto směsí rozpouštědel na 10 ml.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony 0,20 m dlouhé a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem okta- decylsilanizovaným pro chromatografíi R (5 μm),
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze, kterou je směs objemových dílů acetonitrilu R a roztoku chloristanu sodného R (200 g/l), jehož pH bylo předem upraveno kyselinou chlorovodíkovou 1 mol/l RS na hodnotu 2,5 (40 + 60); průtoková rychlost je 1,0 ml/min,
- účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 290 nm.
účinné od 1. 1. 2000Teplota kolony se udržuje na 35 °C.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 20 μl porovnávacího roztoku (b). Jestliže se chromatogramy zaznamenávají za předepsaných podmínek, je retenční čas tylosinu A asi 12 min. Zkoušku lze hodnotit, jestliže na získaném chromatogramu je rozlišení mezi píky tylosinu A a tylosinu D nejméně 2,0. Nastříkne se 20 μl zkoušeného roztoku a 20 μl porovnávacího roztoku (a). Obsah složek v procentech se vypočítá z ploch píků na chromatogramu zkoušeného roztoku obvyklým postupem (metoda normalizace).
účinné od 1. 1. 2000Tyramin. Nejvýše 0,35 %. 50,0 mg se rozpustí ve 25,0ml odměrné baňce v 5,0 ml roztoku kyseliny fosforečné R (3,4 g/l). Přidá se 1,0 ml pyridinu R a 2,0 ml nasyceného roztoku ninhydrinu R (asi 40 g/l). Baňka se uzavře kouskem hliníkové fólie a zahřívá se 30 min na vodní lázni při 85 °C. Roztok se rychle ochladí a zředí vodou R na 25,0 ml. Promíchá se a ihned se měří absorbance (2.2.25) roztoku při 570 nm proti kontrolnímu roztoku. Absorbance není větší než absorbance porovnávacího roztoku připraveného současně stejným způsobem za použití 5,0 ml roztoku tyraminu R (35 mg/l) v roztoku kyseliny fosforečné R (3,4 g/l).
účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 5,0 %; 1,000 g se 3 h suší při 60 °C při tlaku nepřevyšujícím 0,7 kPa.
účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 3,0 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení účinnosti
účinné od 1. 1. 2000Provede se mikrobiologické stanovení účinnosti antibiotik (2.7.2) za použití tylosinu CRL.
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Separandum.
účinné od 1. 1. 2000Nečistoty
- účinné od 1. 1. 2000A. demycinosyltylosin,
- účinné od 1. 1. 2000B. aldol tylosinu A.
účinné od 1. 1. 2000Tyrosinum1)
účinné od 1. 1. 2000Tyrosin
| C9H11NO3 | Mr 181,19 | CAS 60-18-4 |
účinné od 1. 1. 2000Je to kyselina (S)-2-amino-3-(4-hydroxyfenyl)propanová. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 99,0 % až 101,0 % sloučeniny C9H11O3.
účinné od 1. 1. 2000Výroba
účinné od 1. 1. 2000Je-li vyráběn fermentací, vyhovuje požadavkům článku Producta fermentationis.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Bílý krystalický prášek nebo bezbarvé krystaly. Je velmi těžce rozpustný ve vodě, prakticky nerozpustný v lihu 96%. Rozpouští se ve zředěných minerálních kyselinách a ve zředěných roztocích alkalických hydroxidů.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: A a B.
účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, C, D a E, viz Obecné zásady (1.2).
- účinné od 1. 1. 2000A. Zkouška Specifická optická otáčivost, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
- účinné od 1. 1. 2000B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) tablety zkoušené látky se shoduje se spektrem tablety tyrosinu CRL.
- účinné od 1. 1. 2000C. Hodnotí se chromatogramy získané ve zkoušce Látky reagující s ninhydrinem, viz Zkoušky na čistotu. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (b) odpovídá polohou, zbarvením a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a).
- účinné od 1. 1. 2000D. K asi 50 mg se přidá 1 ml kyseliny dusičné zředěné RS; během 15 min vznikne tmavě červené zbarvení.
- účinné od 1. 1. 2000E. Asi 30 mg se rozpustí ve 2 ml hydroxidu sodného zředěného RS, přidají se 3 ml čerstvě připravené směsi stejných objemových dílů roztoku dusitanu sodného R (100 g/l) a roztoku 0,5 g kyseliny sulfanilové R ve směsi 6 ml kyseliny chlorovodíkové RS a 94 ml vody R; vznikne oranžovočervené zbarvení.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. 0,5 g se rozpustí v kyselině chlorovodíkové zředěné RS a zředí se jí na 20 ml. Roztok je čirý (2.2.1) a není zbarven intenzivněji než porovnávací barevný roztok Ž7 (2.2.2, Metoda II).
účinné od 1. 1. 2000Specifická optická otáčivost (2.2.7). –11,0° až –12,3°, počítáno na vysušenou látku; měří se roztok připravený rozpuštěním 1,25 g ve směsi stejných objemových dílů kyseliny chlorovodíkové zředěné RS a vody R a zředěním stejnou směsí na 25,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Látky reagující s ninhydrinem. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití desky s vrstvou silikagelu pro TLC R.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). 0,10 g se rozpustí v amoniaku zředěném RS2 a zředí se vodou R na 10 ml.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (b). 1 ml zkoušeného roztoku (a) se zředí vodou R na 50 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 10 mg tyrosinu CRL se rozpustí v 1 ml amoniaku zředěného RS2 a zředí se vodou R na 50 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 5 ml zkoušeného roztoku (b) se zředí vodou R na 20 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (c). 10 mg tyrosinu CRL a 10 mg fenylalaninu CRL se rozpustí v 1 ml amoniaku zředěného RS2 a zředí se vodou R na 25 ml.
účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese po 5 μl každého roztoku a vyvíjí se směsí objemových dílů amoniaku 32% R a 1-propanolu R (30 + 70) po dráze 15 cm. Vrstva se vysuší na vzduchu, postříká se ninhydrinem RS a zahřívá se 15 min při 100 °C až 105 °C. Žádná skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (a), kromě hlavní skvrny, není intenzivnější než skvrna na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,5 %). Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku (c) jsou dvě zřetelně oddělené skvrny.
účinné od 1. 1. 2000Chloridy (2.4.4). 0,25 g se rozpustí ve 3 ml kyseliny dusičné zředěné RS a zředí se vodou R na 15 ml. Tento roztok vyhovuje limitní zkoušce na chloridy (200 μg/g), bez dalšího přidání kyseliny dusičné.
účinné od 1. 1. 2000Sírany (2.4.13). 0,5 g se opatrným zahřátím rozpustí v 5 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS a zředí se vodou destilovanou R na 15 ml. Tento roztok vyhovuje limitní zkoušce na sírany (300 μg/g).
účinné od 1. 1. 2000Amonium (2.4.1). 0,10 g vyhovuje limitní zkoušce B na amonium (200 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 0,2 ml základního roztoku amonia (100 μg NH4/ml). Oxid horečnatý těžký R se nahradí 2,0 ml hydroxidu sodného koncentrovaného RS.
účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 2,0 g vyhovují limitní zkoušce C na těžké kovy (10 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 2 ml základního roztoku olova (10μg Pb/ml).
účinné od 1. 1. 2000Železo (2.4.9). 1,0 g se rozpustí v dělicí nálevce v 10 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS a vytřepává se třikrát 3 min 10 ml isobutyImethylketonu R1. Ke spojeným organickým vrstvám se přidá 10 ml vody R a třepe se 3 min. Vodná vrstva vyhovuje limitní zkoušce na železo (10 μg/g).
účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 0,5 %; suší se 1,000 g v sušárně při 100 °C až 105 °C.
účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu
účinné od 1. 1. 20000,150 g se rozpustí v 5 ml kyseliny mravenčí bezvodé R, přidá se 30 ml kyseliny octové bezvodé R a titruje se kyselinou chloristou 0,1 mol/l VS za potenciometrické indikace bodu ekvivalence (2.2.20).
účinné od 1. 1. 20001 ml kyseliny chloristé 0,1 mol/l VS odpovídá 18,12 mg C9H11NO3.
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Valinum1)
účinné od 1. 1. 2000Valin
| C5H11NO2 | Mr 117,15 | CAS 72-18-4 |
účinné od 1. 1. 2000Je to kyselina (S)-2-amino-3-methylbutanová. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 98,5 % až 101,0 % sloučeniny C5H11NO2.
účinné od 1. 1. 2000Výroba
účinné od 1. 1. 2000Je-li vyráběn fermentací, vyhovuje požadavkům článku Producta fermentationis.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Bílý nebo téměř bílý krystalický prášek nebo bezbarvé krystaly. Je dobře rozpustný ve vodě, velmi těžce rozpustný v lihu 96%, prakticky nerozpustný v etheru.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: A, B.
účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, C, viz Obecné zásady (1.2).
- účinné od 1. 1. 2000A. Zkouška Specifická optická otáčivost, viz Zkoušky na čistotu, je zároveň zkouškou totožnosti.
- účinné od 1. 1. 2000B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) tablety zkoušené látky se shoduje se spektrem tablety valinu CRL.
- účinné od 1. 1. 2000C. Hodnotí se chromatogramy získané ve zkoušce Látky reagující s ninhydrinem, viz Zkoušky na čistotu. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (b) odpovídá polohou, zbarvením a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a).
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Roztok S. 2,5 g se rozpustí ve vodě R a zředí se jí na 100 ml.
účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. Roztok S je čirý (2.2.1) a není zbarven intenzivněji než porovnávací barevný roztok HŽ6 (2.2.2, Metoda II).
účinné od 1. 1. 2000Specifická optická otáčivost (2.2.7). +26,5° až +29,0°, počítáno na vysušenou látku; měří se roztok připravený rozpuštěním 2,00 g v kyselině chlorovodíkové RS a zředěním stejnou kyselinou na 25,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Látky reagující s ninhydrinem. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití desky s vrstvou silikagelu pro TLC R.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok (a). 0,10 g se rozpustí v kyselině chlorovodíkové zředěné RS a zředí se jí na 10 ml. Zkoušený roztok (b). 1 ml zkoušeného roztoku (a) se zředí vodou R na 50 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 10 mg valinu CRL se rozpustí v kyselině chlorovodíkové 0,1 mol/l RS a zředí se jí na 50 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 5 ml zkoušeného roztoku (b) se zředí vodou R na 20 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (c). 10 mg fenylalaninu CRL a 10 mg valinu CRL se rozpustí v kyselině chlorovodíkové 0,1 mol/l RS a zředí se jí na 25 ml.
účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese po 5 μl každého roztoku a vyvíjí se směsí objemových dílů kyseliny octové ledové R, vody R a 1-butanolu R (20 + 20 + 60) po dráze 15 cm. Vrstva se usuší na vzduchu, postříká se ninhydrinem RS a zahřívá se 15 min při 100 °C až 105 °C. Žádná skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku (a), kromě hlavní skvrny, není intenzivnější než skvrna na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,5 %). Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku (c) jsou dvě zřetelně oddělené skvrny.
účinné od 1. 1. 2000Chloridy (2.4.4). 10 ml roztoku S se zředí vodou R na 15 ml. Tento roztok vyhovuje limitní zkoušce na chloridy (200 μg/g).
účinné od 1. 1. 2000Sírany (2.4.13). 0,5 g se rozpustí ve vodě destilované R a zředí se jí na 15 ml. Tento roztok vyhovuje limitní zkoušce na sírany (300 μg/g).
účinné od 1. 1. 2000Amonium. Připraví se dvě hodinová sklíčka o průměru 60 mm a umístí se těsně vedle sebe. Na vnitřní stěnu horního sklíčka se přilepí čtvereček papíru lakmusového červeného R o velikosti strany 5 mm a navlhčí se několika kapkami vody R. 50 mg upráškované zkoušené látky se umístí na spodní sklíčko a rozpustí se nebo suspenduje v 0,5 ml vody R. K roztoku nebo k suspenzi se přidá 0,30 g oxidu horečnatého těžkého R a rychle se promíchá skleněnou tyčinkou. Sklíčko s lakmusovým papírem se překlopí na sklíčko se zkoušenou látkou a vzniklá komůrka se zahřívá 15 min při 40 °C. Lakmusový papír není zbarven intenzivněji modře než lakmusový papír u porovnávacího vzorku připraveného současně stejným způsobem za použití 0,1 ml základního roztoku amonia (100 μg NH4/ml), 0,5 ml vody R a 0,30 g oxidu hořečnatého těžkého R (200 μg/g).
účinné od 1. 1. 2000Železo (2.4.9). 1,0 g se rozpustí v dělicí nálevce v 10 ml kyseliny chlorovodíkové zředěné RS a vytřepává se třikrát 3 min s 10 ml isobutylmethylketonu R1. Ke spojeným organickým vrstvám se přidá 10 ml vody R a třepe se 3 min. Vodná vrstva vyhovuje limitní zkoušce na železo (10 μg/g).
účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 2,0 g vyhovují limitní zkoušce D na těžké kovy (10 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 2,0 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml).
účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 0,5 %; 1,000 g se suší v sušárně při 100 °C až 105 °C.
účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu
účinné od 1. 1. 20000,100 g se rozpustí ve 3 ml kyseliny mravenčí bezvodé R, přidá se 30 ml kyseliny octové bezvodé R a titruje se kyselinou chloristou 0,1 mol/l VS za použití 0,1 ml naftolbenzeinu RS jako indikátoru do změny hnědožlutého zbarvení na zelené.
účinné od 1. 1. 20001 ml kyseliny chloristé 0,1 mol/l VS odpovídá 11,71 mg C5H11NO2.
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000† Verapamili hydrochloridum
účinné od 1. 1. 2000Verapamiliumchlorid
| C27H39CIN2O4 | Mr 491,07 | CAS 152-11-4 |
účinné od 1. 1. 2000Je to N-[2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethyl]-N-methyl-N-{[(4RS)-4-(3,4-diinethoxyfenyl)-4-isopropyl-4-kyan]butyl}amoniumchlorid. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 99,0 % až 101,0 % sloučeniny C27H39ClN2O4.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Bílý krystalický prášek. Je dobře rozpustný ve vodě, mírně rozpustný v lihu 96%, snadno rozpustný v methanolu.
účinné od 1. 1. 2000Taje při asi 144 °C.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky totožnosti
účinné od 1. 1. 2000Základní sestava zkoušek: B a D.
účinné od 1. 1. 2000Alternativní sestava zkoušek: A, C a D, viz Obecné zásady (1.2).
- účinné od 1. 1. 2000A. 20,0 mg se rozpustí v kyselině chlorovodíkové 0,01 mol/l RS a zředí se jí na 100,0 ml. 5,0 ml tohoto roztoku se zředí stejnou kyselinou na 50,0 ml. Měří se absorbance roztoku (2.2.25) při 210 nm až 340 nm; roztok vykazuje dvě absorpční maxima, při 229 nm a 278 nm, a prodlevu při 282 nm. Poměr absorbance naměřené v maximu při 278 nm k absorbanci naměřené v maximu při 229 nm je 0,35 až 0,39.
- účinné od 1. 1. 2000B. Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) tablety zkoušené látky se shoduje se spektrem tablety verapamiliumchloridu CRL.
- účinné od 1. 1. 2000C. Provede se tenkovrstvá chromatografie (2.2.27) za použití vrstvy vhodného silikagelu s fluorescenční přísadou pro detekci při 254 nm.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 10 mg se rozpustí v dichlormethanu R a zředí se jím na 5 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 20 mg verapamiliumchloridu CRL se rozpustí v dichlormethanu R a zředí se jím na 10 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 5 mg papaveriniumchloridu CRL se rozpustí v porovnávacím roztoku (a) a zředí se jím na 5 ml.
účinné od 1. 1. 2000Na vrstvu se nanese odděleně po 5 μl každého roztoku a vyvíjí se směsí objemových dílů diethylaminu R a cyklohexanu R (15 + 85) po dráze 15 cm. Vrstva se usuší na vzduchu a pozoruje se v ultrafialovém světle při 254 nm. Hlavní skvrna na chromatogramu zkoušeného roztoku odpovídá polohou a velikostí hlavní skvrně na chromatogramu porovnávacího roztoku (a). Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) jsou dvě zřetelně oddělené hlavní skvrny.
- účinné od 1. 1. 2000D. Vyhovuje zkoušce (b) na chloridy (2.3.1).
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Roztok S. 1,0 g se rozpustí za mírného zahřívání ve vodě prosté oxidu uhličitého R a zředí se jí na 20,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. Roztok S je čirý (2.2.1) a bezbarvý (2.2.2, Metoda II).
účinné od 1. 1. 2000Hodnota pH (2.2.3). 4,5 až 6,0; měří se roztok S.
účinné od 1. 1. 2000Optická otáčivost (2.2.7). –0,10° až +0,10°; měří se roztok S.
účinné od 1. 1. 2000Příbuzné látky. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29).
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 25,0 mg se rozpustí v mobilní fázi počátečního složení a zředí se jí na 10,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 5 mg verapamiliumchloridu CRL, 5 mg verapamilu nečistoty I CRL a 5 mg verapamilu nečistoty M CRL se rozpustí v mobilní fázi počátečního složení a zředí se jí na 20 ml. 1 ml tohoto roztoku se zředí stejnou mobilní fází na 10 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 1,0 ml zkoušeného roztoku se zředí mobilní fází základního složení na 100,0 ml. 1,0 ml tohoto roztoku se zředí na 10,0 ml stejnou mobilní fází.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,25 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem oktadekanoylaminopropylsilanizovaným pro chromatografii R (5 μm),
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze při průtokové rychlosti 1,5 ml/min a tomto elučním programu:
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze A - roztok hydrogenfosforečnanu draselného R (6,97 g/l), jehož pH se upraví na hodnotu 7,20 kyselinou fosforečnou R,
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze B - acetonitril R,
| Čas (min) | Mobilní fáze A % (V/V) | Mobilní fáze B % (V/V) | Poznámka |
|---|---|---|---|
| 0 - 22 | 63 | 37 | izokraticky |
| 22 - 27 | 63→35 | 37→65 | přepnutí na druhý izokratický chod |
| 27 - 35 | 35 | 65 | izokraticky |
| 35 - 36 | 35→63 | 65→37 | přepnutí na původní podmínky |
| 36 - 50 | 63 | 37 | ustalování |
- účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 278 nm.
účinné od 1. 1. 2000Kolona se ustaluje asi 60 min mobilní fází počátečního složení.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 10 μl porovnávacího roztoku (a) a při zaznamenání chromatogramu za předepsaných podmínek jsou retenční časy: verapamilu asi 16 min, verapamilu nečistoty I asi 21 min a verapamilu nečistoty M, která se eluuje jako dublet, asi 32 min. Zkoušku lze hodnotit, jestliže rozlišení mezi píky verapamilu a verapamilu nečistoty I je nejméně 5,0 a dochází k eluci verapamilu nečistoty M.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se 10 μl porovnávacího roztoku (b) a nastaví se citlivost systému tak, aby výška hlavního píku na chromatogramu byla nejméně 15 % celé stupnice zapisovače.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se odděleně 10 μl zkoušeného roztoku a 10 μl porovnávacího roztoku (b). Na chromatogramu zkoušeného roztoku: plocha žádného píku, kromě hlavního píku, není větší než plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,1 %); součet ploch všech píků, kromě hlavního píku, není větší než trojnásobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) (0,3 %). Nepřihlíží se k pikům s plochou menší než 0,1 násobek plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (b).
účinné od 1. 1. 2000Těžké kovy (2.4.8). 1,0 g vyhovuje limitní zkoušce C na těžké kovy (10 μg/g). Porovnávací roztok se připraví za použití 1 ml základního roztoku olova (10 μg Pb/ml).
účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením (2.2.32). Nejvýše 0,5 %; 1,000 g se suší v sušárně při 100 °C až 105 °C.
účinné od 1. 1. 2000Síranový popel (2.4.14). Nejvýše 0,1 %; stanoví se s 1,00 g zkoušené látky.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu
účinné od 1. 1. 20000,400 g se rozpustí v 50 ml ethanolu R a přidá se 5,0 ml kyseliny chlorovodíkové 0,01 mol/l VS. Titruje se hydroxidem sodným 0,1 mol/l VS za potenciometrické indikace bodu ekvivalence (2.2.20). Odečte se spotřeba mezi dvěma inflexními body.
účinné od 1. 1. 20001 ml hydroxidu sodného 0,1 mol/l VS odpovídá 49,11 mg C27H39CIN2O4.
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000V dobře uzavřených obalech, chráněn před světlem.
účinné od 1. 1. 2000Separandum.
účinné od 1. 1. 2000Nečistoty
- účinné od 1. 1. 2000A. N,Nʹ-bis[2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethyl]-N,Nʹdimethyltrimethylen-1,3-diamin,
- účinné od 1. 1. 2000B. N-methyl-2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethylamin,
- účinné od 1. 1. 2000C. N,N-dimethyl-2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethylamin,
- účinné od 1. 1. 2000D. N-(3-chlorpropyl)-N-methyl-2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethylamin,
- účinné od 1. 1. 2000E. Ar-CH2OH: (3,4-dimethoxyfenyl)methanol,
- účinné od 1. 1. 2000F. (2RS)-2-isopropyl-2-(3,4-dimethoxyfenyl)-5-(methylamino)pentannitril,
- účinné od 1. 1. 2000G. Ar-CHO: 3,4-dimethoxybenzaldehyd,
- účinné od 1. 1. 2000H. (2RS)-2-ethyl-2-(3,4-dimethoxyfenyl)-5-{[2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethyl](methyl)amino}pentannitril,
- účinné od 1. 1. 2000I. (2RS)-2-isopropyl-2-(3,4-dimethoxyfenyl)-4-{[2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethyl](methyl)amino}butannitril,
- účinné od 1. 1. 2000J. (2/RS)-2-isopropyl-2-(3,4-dimethoxyfenyl)-5-{[2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethyl]amino}pentannitril (N-norverapamil),
- účinné od 1. 1. 2000K. (2RS-2-(3,4-dimethoxyfenyl)-3-methylbutannitril,
- účinné od 1. 1. 2000L. isopropyl (3,4-dimethoxyfenyl)keton,
- účinné od 1. 1. 2000M. 5,5ʹ-{[2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethyl]imino}bis[2-isopropyl-2-(3,4-dimethoxyfenyl)pentannitril,
- účinné od 1. 1. 2000N. 5,5ʹ-(methylimino)bis[2-isopropyl-2-(3,4-dimethoxyfenyl)pentannitril],
- účinné od 1. 1. 2000O. (2RS)-2-(3,4-dimethoxyfenyl)-5-{[2-(3,4-dimethoxyfenyl)ethyl](methyl)amino}-2-propylpentannitril,
- účinné od 1. 1. 2000P. 2,6-diisopropyl-2,6-bis(3,4-dimethosyfenyl)-1,7-heptanndinitril.
účinné od 1. 1. 2000† Vindesini sulfas
účinné od 1. 1. 2000Vindesiniumslfat
| C43H57N5O11S | Mr 852,01 | CAS 59917-39-4 |
účinné od 1. 1. 2000Je to (5S,7R,9S)-9-[(3aR,4R,5S,5aR,10bR,13aR)-3a-ethyl-4,5-dihydroxy-5-karbamoyl-8-methoxy-6-methyl-3a,4,5,5a,6,11,12,13a-oktahydro-1H-indolizino[8,1-cd]karbazol-4-ium-9-yl]-5-ethyl-5-hydroxy-9-methoxy karbony 1-1,4,5,6,7,8,9,10-oktahydro-2H-3,7-methano-3-azacykloundecino[4,5-b]indol-3-iumsulfat. Počítáno na vysušenou látku, obsahuje 96,0 % až 103,0 % sloučeniny C43H57N5O11S.
účinné od 1. 1. 2000Vlastnosti
účinné od 1. 1. 2000Bílá nebo téměř bílá amorfní látka, hygroskopická. Je snadno rozpustný ve vodě a v methanolu, prakticky nerozpustný v cyklohexanu.
účinné od 1. 1. 2000Zkouška totožnosti
účinné od 1. 1. 2000Infračervené absorpční spektrum (2.2.24) zkoušené látky se shoduje s referenčním spektrem Ph. Eur. vindesiniumsulfatu.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušky na čistotu
účinné od 1. 1. 2000Roztok S. 50 mg se rozpustí ve vodě prosté oxidu uhličitého R a zředí se jí na 10 ml.
účinné od 1. 1. 2000Vzhled roztoku. Roztok S je čirý (2.2.1) a není zbarven intenzivněji než porovnávací barevný roztok Ž7 (2.2.2, Metoda I).
účinné od 1. 1. 2000Hodnota pH (2.2.3). 3,5 až 5,5; měří se roztok S.
účinné od 1. 1. 2000Příbuzné látky. Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29). Připravené roztoky je nutno před použitím uchovávat ve vodě s ledem.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 10,0 mg se rozpustí ve vodě R a zředí se jí na 10,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). 1,0 ml zkoušeného roztoku se zředí vodou R na 50,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). 1,0 mg deacetylvinblastinu CRL se rozpustí ve vodě R, přidá se 1,0 ml zkoušeného roztoku a zředí se vodou R na 50,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (c). 1,0 ml porovnávacího roztoku (a) se zředí vodou R na 200,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,15 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem oktadecylsilanizovaným pro chromatografii R (5 μm),
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze s průtokovou rychlostí 2 ml/min:
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze A - roztok diethylaminu R 1,5% (V/V), jehož pH bylo upraveno na hodnotu 7,4 kyselinou fosforečnou R,
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze B - methanol R,
- účinné od 1. 1. 2000- gradientového programu za použití následujících podmínek:
účinné od 1. 1. 2000 Uchovávání Tocoferoli alfa RRR acetas Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Tocoferoli alfa RRR hydrogenosuccinas Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Tocoferolum alfa Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Tocoferolum alfa RRR Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání † Triamcinolonum Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Nečistoty Triflusalum Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Nečistoty Trimethoprimum1) Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Příbuzné látky. Stanovení obsahu Uchovávání Nečistoty Tritici oleum raffinatum Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Uchovávání Označování Tryptophanum1) Výroba Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Nečistoty †Tylosini tartras ad usum veterinarium Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení účinnosti Uchovávání Nečistoty †Tylosinum ad usum veterinarium Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení účinnosti Uchovávání Nečistoty Tyrosinum1) Výroba Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Valinum1) Výroba Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání † Verapamili hydrochloridum Vlastnosti Zkoušky totožnosti Zkoušky na čistotu Stanovení obsahu Uchovávání Nečistoty † Vindesini sulfas Vlastnosti Zkouška totožnosti Zkoušky na čistotu Čas
(min)Mobilní fáze A
% (V/V)Mobilní fáze B
% (V/V)Poznámky 49 51 ustalování 0 - 40 49 51 izokraticky 40 - 49 49 → 30 51 → 70 lineární gradient 49 - konec 30 70 izokraticky
- účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 270 nm.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se odděleně po 200 μl každého roztoku. Udržuje se konečná koncentrace mobilní fáze, dokud celkový čas záznamu chromatogramů není dvojnásobkem retenčního času hlavního píku na chromatogramu zkoušeného roztoku. Zkoušku lze hodnotit, jestliže na chromatogramu porovnávacího roztoku (b) je retenční čas vindesinu menší než 40 min; faktor symetrie píku vindesinu je nejvýše 2,0; rozlišení mezi píky vindesinu a deacetylvinblastinu je nejméně 2,0. Na chromatogramu zkoušeného roztoku plocha žádného píku, kromě hlavního píku, není větší než polovina plochy hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a) (1 %) a součet ploch všech píků, kromě hlavního píku, není větší než plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (a) (2 %). Nepřihlíží se k pikům, jejichž plocha je menší než plocha hlavního píku na chromatogramu porovnávacího roztoku (c).
účinné od 1. 1. 2000Acetonitril. Nejvýše 1,5 %; provede se plynová chromatografie (2.2.28).
účinné od 1. 1. 2000Roztok vnitřního standardu (a). 0,500 g 1-propanolu R se zředí vodou R na 100,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Roztok vnitřního standardu (b). 10,0 ml roztoku vnitřního standardu (a) se zředí vodou R na 50,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok. 10,0 g acetonitrilu R se zředí vodou R na 1000 ml. Ke 3,0 ml tohoto roztoku se přidá 10,0 ml roztoku vnitřního standardu (a) a zředí se vodou R na 50,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 40 mg se rozpustí v 1,0 ml roztoku vnitřního standardu (b).
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- skleněné kolony délky 1,25 m a vnitřního průměru 3 mm naplněné ethylvinylbenzen-divinylbenzen kopolymerem R,
- účinné od 1. 1. 2000- helia pro chromatografii R jako nosného plynu při průtokové rychlosti 60 ml/min,
- účinné od 1. 1. 2000- plamenoionizačního detektoru.
účinné od 1. 1. 2000Teplota kolony se udržuje na 170 °C, teplota nástřikového prostoru a detektoru na 250 °C. Nastříknou se 3 μl porovnávacího roztoku. Zkoušku lze hodnotit, jestliže rozlišení mezi píky acetonitrilu a 1-propanolu je větší než 1,5 a faktor symetrie píku acetonitrilu je nejvýše 1,6.
účinné od 1. 1. 2000Nastříknou se 3 μl porovnávacího roztoku a 3 μl zkoušeného roztoku.
účinné od 1. 1. 2000Ztráta sušením. Nejvýše 10,0%; stanoví se termogravimetricky (2.2.34) s 9,00 mg zkoušené látky. Zahřívá se rychlostí 5 °C/min na teplotu 200 °C v proudu dusíku pro chromatografii R s průtokovou rychlostí 40 ml/min.
účinné od 1. 1. 2000Sterilita (2.6.1). Pokud je látka určena k výrobě parenterálních přípravků bez dalšího vhodného sterilizačního postupu, vyhovuje zkoušce na sterilitu.
účinné od 1. 1. 2000Stanovení obsahu
účinné od 1. 1. 2000Provede se kapalinová chromatografie (2.2.29). Připravené roztoky je nutno před použitím uchovávat v ledové vodě.
účinné od 1. 1. 2000Zkoušený roztok. 5,0 mg se rozpustí ve vodě R a zředí se jí na 10,0 ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (a). Úplný obsah lahvičky vindesiniumsulfatu CRL se rozpustí ve vodě R tak, aby koncentrace roztoku byla přibližně 0,50 mg/ml.
účinné od 1. 1. 2000Porovnávací roztok (b). K 1,0 mg deacetylvinblastinu CRL se přidají 2,0 ml porovnávacího roztoku (a).
účinné od 1. 1. 2000Chromatografický postup se obvykle provádí za použití:
- účinné od 1. 1. 2000- nerezové ocelové kolony délky 0,15 m a vnitřního průměru 4,6 mm naplněné silikagelem oktadecylsilanizovaným pro chromatografii R (5 pm),
- účinné od 1. 1. 2000- mobilní fáze s průtokovou rychlostí 1 ml/min, která je směsí objemových dílů roztoku diethylaminu R 1,5% (V/V), jehož pH je upraveno na hodnotu 7,4 kyselinou fosforečnou R, a methanolu R (38 + 62),
- účinné od 1. 1. 2000- spektrofotometrického detektoru, 270 nm.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se pětkrát po 20 μl porovnávacího roztoku (b). Zkoušku lze hodnotit, jestliže rozlišení mezi píky vindesiniumsulfatu a deacetylvinblastiniumsulfatu je nejméně 1,5; faktor symetrie píku vindesinu je nejvýše 2,0; relativní směrodatná odchylka plochy píku vindesinu, vypočtená z pěti nástřiků, je nejvýše 1,5 %.
účinné od 1. 1. 2000Nastříkne se odděleně 20 pl zkoušeného roztoku a 20 μl porovnávacího roztoku (a).
účinné od 1. 1. 2000Vypočítá se obsah vindesiniumsulfatu (C43H57N5O11S) za použití deklarovaného obsahu vindesiniumsulfatu CRL.
účinné od 1. 1. 2000Uchovávání
účinné od 1. 1. 2000Ve vzduchotěsných polypropylenových obalech s polypropylenovým uzávěrem, při teplotě nepřevyšující -50 °C. Jestliže je látka sterilní, uchovává se ve sterilních, vzduchotěsných, zabezpečených obalech.
účinné od 1. 1. 2000Separandum.
účinné od 1. 1. 2000Označování
účinné od 1. 1. 2000V označení na obalu se uvede, zda je látka sterilní.
účinné od 1. 1. 2000Nečistoty
